1. Медицинская микробиология, ее цели и задачи, отношение к другим медицинским наукам. Роль медицинской микробиологии в создании профилактического направления в здравоохранении. Микробиология —



бет32/154
Дата30.03.2023
өлшемі0,95 Mb.
#173351
1   ...   28   29   30   31   32   33   34   35   ...   154
Байланысты:
Otvety po mikrobiologii-1





Метод Грама

Метод Бурри-Гинса




Цель применения

Для отличия одних видов бактерий от других (грамположительных от грамотрицательных), что является важным таксономическим признаком

Для выявления капсул у чистых культур капсульных бактерий

Реактивы:
Красящие растворы

  1. Карболовый генцианвиолет или пропитанная им фильтровальная бумажка

  2. Водный раствор фуксина или пропитанная им фильтровальная бумажка

  1. Тушь

  2. Разведённый (1:3) карболовый фуксин Циля

Протрава

Раствор Люголя – на 300 мл дист воды 1,0 г йода и 2,0 г KI




Дифференцирующее вещество

Этиловый спирт




Способ фиксации, состав фиксатора

В пламени горелки

В пламени горелки

Этапы окраски

  1. На фиксированный мазок поместить фильтр.бумажку, пропитанную генцианвиолетом, смочить её водой, выдержать 3 минуты

  2. Снять бумажку, слить с препарата оставшуюся краску и налить р-р Люголя на 1 минуту.

  3. Слить р-р Люголя, провести дифференциацию, погрузив препарат несколько раз в стаканчик со спиртом (пока не перестанут отходить фиолетовые струйки)

  4. Тщательно промыть препарат водой

  5. Дополнительно подкрасить препарат с помощью красящей бумажки, пропитанной р-ром карболового фуксина, в течение 3 минут.

  6. Промыть водой, высушить.

  1. На предметное стекло нанести рядом каплю туши и каплю воды, в которой суспензировать внесённую петлёй капсульную культуру

  2. Обе капли соединить в одну и размазать её тонким слоем с помощью второго предметного стекла

  3. Высохший на воздухе мазок осторожно фиксировать в пламени горелки

  4. Докрасить препарат разведённым карболовым фуксином Циля в течение 2-3 мин, после чего промыть водой и высушить.

Сущность метода

При окраске генцианвиолетом и последующем воздействии раствором Люголя образуется комплексное соединение краски с йодом, которое при дифференциации спиртом удерживается в клетках грамположительных (они остаются фиолетовыми) и удаляются из грамотрицательных (при дополнительной окраске фуксином приобретают красный цвет). Способность бактерий удерживать комплекс генцианвиолета с йодом зависит, главным образом, от строения клеточной стенки, имеющей существенные различия у грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Фуксин окрашивает тела бактерий в красный цвет, капсулы остаются неокрашенными.

Результат: описание микроскопической картины

В поле зрения видны стафилококки сине-фиолетового цвета – грамположительные – и расположенные между ними кишечные палочки, имеющие красный цвет, т.е. грамотрицательные.

В поле зрения видны бациллы красного цвета, окруженные белыми ореолами капсул, которые хорошо видны на серовато-коричневом тушевом фоне.










Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   28   29   30   31   32   33   34   35   ...   154




©engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет