Серологические исследования.
Для массовых профилактических и
диагностических обследований скота на бруцеллез широко используют РА,
РСК и РДСК. Кроме этих реакций применяют РБП (роз бенгал пробу) и
кольцевую реакцию (КР) с молоком коров.
На ранних стадиях бруцеллезного процесса наиболее чувствительна
РА. Агглютинины в сыворотках крови больных животных в низких титрах
можно выявить уже с 10-15 дня, а затем в течение 1-3 месяцев после
инфицирования. В более поздние сроки диагностическая ценность РА
снижается.
Роз бенгал пробу (РБП) применяют при плановых профилактических
исследованиях животных на бруцеллез. Сыворотки крови животных
благополучных хозяйств, дающие положительную РБП, сразу же
исследуют в РА и РСК для установления титра агглютининов и наличия
комплементсвязывающих антител.
РСК и РДСК по времени выявления зараженных животных несколько
отстают от показаний РА у крупного рогатого скота, но являются более
ценными и чувствительными при диагностике бруцеллеза у овец и свиней.
201
Обе реакции стабильны, специфичны и существенно дополняют показания
РА у всех видов животных.
Для контроля за благополучием стад по бруцеллезу за рубежом
широко применяют кольцевую реакцию (КР) с молоком. В некоторых
странах эту реакцию используют и при оздоровлении скота от бруцеллеза.
В Казахстане эта проба рекомендуется для контроля эпизоотического
состояния животных по бруцеллезу в зонах, стабильно благополучных по
этой болезни. Но ценность КР снижается в связи с тем, что она может
давать положительные реакции при исследовании молока коров, больных
маститами и другими болезнями, сопровождающимися лихорадкой, а
также в первые 2 недели после отела. Поэтому всех животных,
реагирующих по КР в свободных от бруцеллеза стадах, необходимо
перепроверять по РА и РСК (РДСК).
При проведении массовых диагностических исследований животных
на
бруцеллез
применяют
серологические
тесты,
официально
рекомендованные Всемирной организацией здоровья животных (далее –
МЭБ): реакцию связывания комплемента CF (РСК/РДСК), тест с
забуферным антигеном Бруцелла - ВВАТ (ПРА/РБП), иммуноферментный
анализ - ELISA (ИФА) и флуоресцентной поляризации - FPA (ФПА). Для
определения статуса стада (отары) по бруцеллезу применяются
бактериологический метод (с биопробой) или ПЦР.
Для исследования отдельных видов животных на территории
Республики Казахстан применяются следующие методы диагностики
бруцеллеза:
1) крупный рогатый скот, маралы (олени), зебра и другие –
серологические: реакция агглютинации (РА), реакция связывания
комплемента (РСК) или реакция длительного связывания комплемента
(РДСК), Роз-бенгал проба (РБП), кольцевая реакция с молоком (КР),
реакция иммунодиффузии с О-ПС антигеном (РИД), иммуноферментный
анализ (ИФА). Для подтверждения статуса стада (отары) биологический
материал, в случае абортов – абортированные плоды исследуют
бактериологически с постановкой биологической пробы (биопроба) или
ПЦР;
2) овцы, козы – серологические: РА, РСК (РДСК), РБП, ИФА,
аллергический и бактериологический (с постановкой биопробы) или ПЦР;
3) свиньи – серологические: РСК, РБП; ИФА, бактериологические (с
постановкой биопробы) или ПЦР;
4) лошади – серологические: РА, РСК, РБП; бактериологический (с
постановкой биопробы) или ПЦР;
5) верблюды – серологические: РА, РСК, РБП; бактериологический (с
постановкой биопробы) или ПЦР;
202
6) собаки и животные других видов - серологические: РА в
пробирках, бактериологический (с постановкой биопробы) или ПЦР;
7) пушные звери – путем бактериологических исследований (с
постановкой биопробы) или ПЦР абортированных плодов.
Для подтверждения (уточнения) диагноза на бруцеллез, помимо
вышеуказанных методов диагностических исследований, используются
методы, рекомендованные МЭБ.
Ниже перечислены современные тест системы диагностики бруцеллеза
сельскохозяйственных животных:
Тест-система «БРУ-КОМ» для выявления возбудителя бруцеллеза методом ПЦР,
производитель ФГУН «ЦНИИЭ», Россия;
Тест-система для диагностики бруцеллеза животных методами иммунохроматографического
и дот-иммуноанализа, производитель ТОО «Бицентр», Казахстан;
Набор для выявления и дифференциации антител к S и R формам возбудителей бруцеллеза
иммуноферментным методом, производитель ФГУП «Курская биофабрика», Россия;
Конкурентная иммуноферментная тест-система на основе моноклональных антител для
диагностики бруцеллеза животных, выявляет антитела против бруцелл в цельной крови, сыворотки и
молоке животных, производитель ТОО «Бицентр», Казахстан;
Иммунохроматографическая тест-система для экспресс-обнаружения специфических антител
к Brucella abortus в сыворотке крови КРС, производитель РГП «Национальный центр биотехнологии»,
Казахстан;
Иммунохроматографическая тест-система для экспресс-обнаружения липополисахаридного
антигена Brucella abortus в биоматериале, производитель РГП «Национальный центр биотехнологии»,
Казахстан;
Набор для выявления антител к возбудителю бруцеллеза крупного рогатого скота методом
имуноферментного анализа «БРУкод», производитель ТОО «Вита-СТ», Казахстан;
Тест-система ИФА «PrioCHCK
R
Brucella Ab», производитель компания «Pronics AG»,
Швейцария;
Тест-система ИФА «INGEZIM Brucella Compac», производитель «Immunologia Y Cenetica
Aplicada S.A.C. (Ingenasa»), Испания;
«Набор для определения антител к Brucella методом флюоресцирующей поляризации»
(Brucella FPA. Brucella S antibody test kit), производитель Компания «Diachemix LLC», США;
Тест-система
для
диагностики
бруцеллеза
животных
методом
конкурентного
иммуноферментного анализа «Брукон-Бц», производитель ТОО «Бицентр», Казахстан;
Иммунохроматографический тест Anigen на быстрое выявление наличия антител к B. Brucella,
производитель «ВioNote Inc», Южная Корея;
ИХА для выявления антител к возбудителю бруцеллеза животных «BruLtflowAb»,
производитель ЗАО «ЛТ Биотех», Литва;
Набор для диагностики бруцеллеза животных в реакции Сайдулдина, производитель ТОО
«ДАУА», Казахстан;
LilliTestRapidBrucellaAbTestKit для определения антител к бруцелле в сыворотке крови
животных
методом
иммунохроматографического
анализа,
производительКомпания
«Lillidale
Diagnostics», Англия;
IngeneBruce-LadderV-набор ПЦР для выявления и дифференциации бактерий рода Brucella в
биологических образцах, производитель «Immunologia y genetic aplicada, S.A.», Испания;
IDEXXBrucellosisSerumAbTest для выявления антител к возбудителю бруцеллеза крупного
рогатого скота, производитель «IDEXX Switzerland AG», Швейцария;
SERELISA
R
Brucella OCB Ab Mono Indirectдля диагностики бруцеллеза крупного и мелкого
рогатого скота, производитель «SYNBIOTICSEUROPESAS, 2», Франция;
ID Screen
R
Brucellosis Serum Indirect Multi-Species -Тест-система для выявления антител к
возбудителям бруцеллеза крупного рогатого скота, овец, коз и свиней методом иммуноферментного
анализа, производитель «IDVET», Франция.
203
Аллергические
исследования.
Наибольшую
диагностическую
ценность они имеют в поздних стадиях развития болезни. Для
аллергических исследований применяют бруцеллин ВИЭВ. Препарат
вводят пальпебрально под кожу нижнего века овцам, козам и оленям в дозе
0,5 мл, крупному рогатому скоту и буйволам – в дозе 1 мл, свиньям –
внутрикожно с наружной стороны основания уха в дозе 0,2 мл. Реакцию
учитывают через 36-48 чаов. Воспаление на месте введения аллергена
расценивается как положительная реакция, животные признаются
больными и подлежат убою. Повторно животных исследуют
аллергическим методом через 25-30 дней. Не разрешается вводить
бруцеллин под кожу века животным, имеющим травматические
повреждения, абсцессы и другие поражения глаз. Животных с
заболеванием глаз или с густым шерстным покровом в области век метят и
вводят им бруцеллин в середину одной из подхвостовых складок,
внутрикожно в дозах: овцам и козам 0,2 мл и крупному рогатому скоту 0,3
мл (внутрикожная проба).
Достарыңызбен бөлісу: |