Резус-фактор в повседневной практике определяется при помощи антирезусных сывороток или моноклинальными анти-D-антителами (цоликлонами). Используется универсальная антирезусная сыворотка для экспресс-
Резус-фактор в повседневной практике определяется при помощи антирезусных сывороток или моноклинальными анти-D-антителами (цоликлонами). Используется универсальная антирезусная сыворотка для экспресс-метода.
Кровь для исследования берется из пальца непосредственно перед исследованием (можно использовать консервированную кровь без предварительной обработки), а также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки.
Капля стандартной антирезусной сыворотки для экспресс-метода наносится на дно пробирки.
Туда же добавляется капля исследуемой крови.
Осторожными движениями необходимо добиться, чтобы образовавшийся раствор растекся по стеклу пробирки.
Через 3 минуты после внесения эритроцитов добавляется 2-3 мл физиологического раствора.
Пробирка осторожно переворачивается 3 раза, после чего считывается результат:
Rh- - при гомогенно окрашенной жидкости (отсутствие агглютинации).
Определение Rh-принадлежности цоликлонами Чтобы узнать резус-фактор, применяют моноклональные реагенты – цоликлоны, которые получают методом генной инженерии из асцитной жидкости мышей. Rh определяется во время реакции агглютинации, которая происходит на плоскости.
Алгоритм действий:
На планшет индивидуальной пипеткой капают большую каплю реагента (примерное количество – 0,1 мл).
Около реагента капают исследуемую кровь (маленькую каплю) или эритроциты в количестве 0,01 мл.
С помощью стеклянной палочки как следует смешивают реагент и кровь и каждые 30 секунд тарелку покачивают в течение трех минут, наблюдая за реакцией визуально.
Реакция агглютинации начинается через 15 секунд, явно выраженной становится через 1 минуту, но результат учитывают только спустя три минуты.
Если началась реакция агглютинации (склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок), кровь маркируют резус-положительной, если слипания красных клеток не наблюдается, резус-фактор отрицательный. Склеенные эритроциты, которые представляют собой хлопья, видны