Определение иммуноглобулинов в сыворотке крови

В ветеринарной лабораторной практике существует несколько методов определения иммуноглобулинов.

1. 
   Количественное определение иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии в геле, содержащем мо­носпецифичную иммунную сыворотку (по Манчини). Суть методики: на стекляные пластины разливают раствор агара, содержащий моноспецифичную сыворотку, после застывания, в агаре делают лунки, в которые вносят исследуемую сыворотку крови животных. Затем пластины помещают во влажную камеру при 37оС и инкубируют в течение опреде­ленного времени. Далее замеряют диаметр образовавшихся колец преципитатов. В качестве стандарта используется сыворотка с известным количеством определенного иммуноглобулина.
   
2. 
   Определение иммуноглобулинов методом дифференциального электрофореза в полиакриламидномгеле (в моди­фикации В.М.Холода, 1983). Принцип метода: разделяют белки в зависимости от заряда белковой мицеллы и размера молекулы.
   
3. 
   Определение иммуноглобулинов в сыворотке крови путем осаждения цинком сульфатом или натрия сульфитом. Принцип метода основан на том, что при добавлении цинка сульфата или натрия сульфита происходит осаждение из сыворотки иммуноглобулинов. Образующееся при этом помутнение, интенсивность которого зависит от концентрации иммуноглобулинов, можно оценить с помощью колориметра или нефелометра. Методы эти простые, но недостаточно специфичные.
   

Ig G - самый легкий из иммуноглобулинов. Молекулярный вес его 150 000, подразделяется на 4 класса. Его количе­ство составляет 70 - 80 % от всех иммуноглобулинов. Ig G - составляет основную массу противобактериальных, проти­вовирусных и др. антител, антитоксинов. Период полураспада составляет 12 - 14 дней. Активный синтез иммуноглобу­линов G наступает на 3 - 7 дни после антигенного раздражения. Его количество возрастает во время инфекционных заболеваний (особенно п/острых и хронических), при некоторых болезнях печени и аутоиммунных растройствах, после вакцинаций. Уровень этих иммуноглобулинов снижается при иммунодефицитах, задержке развития и некоторых опухо­лях лимфоидной системы.

Ig M - самый большой из иммуноглобулинов, молекулярная масса 900 000 - 950 000. Его количество составляет 10 - 15 % отвсех иммуногобулинов. Несет на себе 5 - 10 активных, связывающих центров. Он в иммунном ответе появля­ется сразу. Способен связывать клеточные структуры и комплемент, антитоксической активностью практически не об­ладает. Период полураспада 3,5 сут. Концентрация Ig M повышается при острых инфекционных заболеваниях, пора­жающих систему крови, при острых гепатитах и первичном билиарном циррозе. Снижается - иммунодефицитах, неко­торых опухолях лимфоидной системы.

Ig A - в организме существует в двух формах: сывороточной и секреторной (на слизистых). Связывается с клетками эпителия слизистых дисульфидными связями. Секретируется в молоко, слюну и секреты ЖКТ. Ig A связывает антиген, но не активизирует комплемент. Он играет решающую роль в местном иммунитете слизистых. Период полураспада составляет 3 - 6 суток. Количество от всех иммуноглобулинов 10 - 20 %. Уровень сывороточного Ig A возрастает при заболеваниях дыхательных путей и кишечного тракта, при перитониальных инфекциях. Снижается - при гипо- и агам-маглобулинемиях, некоторых опухолях лимфоидной системы.

Ig Е - содержаться в сыворотке крови лишь в следовых количествах. В его состав входят реагины, подготавливаю­щие базофилы и тучные клетки для участвия в аллергических реакциях. Молекулярная масса 190 000. Количество воз­растает при аллергических и инвазионных заболеваниях.

Ig D - также находится в крови в следовых количествах. Биологическая роль не установлена. Но считают, что он играет роль в развитии иммунологической толерантности и является как бы фактором предохраняющим иммунную сис­тему от перенагрузки и истощения.

Кроме общего иммунологического анализа крови (тесты первого уровня) существуют тесты второго и третьего уровня, которые более специфичны и позволяют установить и дифференцировать конкретную па­тологию иммунной системы. К ним можно отнести разделение лимфоцитов на субпопуляции, выявление специфического аг или ат в иммунологической реакции и др.

Показательны при иммунологических реакциях и традиционные биохимические тесты (определение общего белка в сыворотке крови, концентрации гистамина, серотонина и др.).

Что касается нозологии, семиотики, классификации и номенклатуры болезней иммунной системы у животных, то этот вопрос в ветеринарной медицине более-менее оформлен. Примечательно, что родоначальниками этого выступали и выступают сотрудники ВГАВМ (Жаков, Прудников - иммуноморфология, Карпуть - иммунопатология и иммунитет при внутренних болезнях, Ятусевич - иммунитет при инвазионных болезнях, Конопелько, Могиленко, Абрамов, Севрюк, -иммунитет при незаразных болезнях, Веремей - при хирургической патологии, Кузьмич - при акушерско-гинекологической патологии и целый ряд др. сотрудников).

Поскольку иммунная система животных является наиболее динамичной, то она, естественно, постоянно меняются с возрастом, подвержена сезонным колебаниям, резко изменяется под влиянием различных факторов окружающей среды. В ветеринарной медицине выделяют следующие патологические состояния иммунной системы, или их можно объеди­нить подтермином "иммунопатология":

1. 
   Иммунные дефициты (иммунодефициты).
   
2. 
   Аутоиммунные болезни.
   
3. 
   Аллергическиезаболевания.
   
4. 
   Болезни иммунных комплексов.
   
5. 
   Лимфопролиферативные заболевания.