Методические рекомендации для курсантов по разделу «Инфекционные болезни и туберкулез в работе врача общей практики»
жүктеу/скачать 328 Kb.
|
2. инÑекÑионнÑе болезни и ÑÑбеÑкÑлез в ÑабоÑе вÑаÑа обÑей пÑакÑики
- Бұл бет үшін навигация:
- Иммунный блоттинг
| 7. Антиген X
Состоит из 159 аминокислот и представляет собой регуляторный белок, хотя возможна и роль его как структурного вирусного белка. Полагают, что он является активатором транскрипции и функционирует наиболее активно в клетках первичного рака печени. Антитела к антигену X выявляются в крови части больных хроническим, но не острым гепатитом В. Выявление антител к ВИЧВыявление антител к ВИЧ в сыворотке крови - наиболее распространенный прием в лабораторной диагностике ВИЧ-инфекции. Хотя положительный результат исследования при определении антител к ВИЧ не является окончательным критерием оценки состояния и прогноза болезни, он дает возможность с достаточной долей вероятности установить факт инфицирования. Данный вид диагностики обладает достаточно высокой чувствительностью, однако далеко не 100% специфичен из-за возможности получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Это происходит из-за того, что в инфицированном организме на разных стадиях болезни продуцируются и персистируют антитела к различным структурным и регуляторным белковым компонентам ВИЧ. Для выявления антител к ВИЧ чаще всего используют метод иммуноферментного анализа (ИФА). При проведении ИФА в 3—5% случаев возможны ложноотрицательные результаты - если инфицирование произошло относительно недавно и уровень антител еще очень низкий, или в терминальной стадии болезни, характеризующейся тяжелым поражением иммунной системы с глубоким нарушением процесса антителообразования. Поэтому при наличии данных, свидетельствующих о контакте с инфицированными ВИЧ, обычно проводят повторные исследования через 2 - 3 мес. Но даже при повторных исследованиях удается выявить не всех инфицированных лиц, так как существуют сероотрицательные носители ВИЧ, т.е. те, у которых антитела не вырабатываются в течение очень длительного времени. В США количество таких ложноотрицательных исследований составляет около 1% в год. Причиной ложноположительных результатов ("обнаружение" ВИЧ там, где его нет) при постановках ИФА является наличие у пациентов аутоиммунных процессов, антител к ревматоидному фактору, вирусу Эпштейна - Барр, молекулам главного комплекса гистосовместимости. Частота ложноположительных результатов при использовании различных тест-систем (разных диагностических наборов) колеблется от 0,02 до 0,5%. Число ошибочных результатов можно значительно снизить при использовании в качестве антигена рекомбинантных белков ВИЧ. Чувствительность и специфичность тест-систем для ИФА в этом случае можно сравнить с иммунным блоттингом. Иммунный блоттинг (иммуноблот, Western Blot, вестерн-блот) - сочетает в себе иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску (стрип) антигенов вируса. Иммуноблот (ИБ) включает в себя несколько стадий. Подготовка стрипа. Предварительно очищенный и разрушенный до составных компонентов вирус иммунодефицита (ВИЧ) подвергается электрофорезу, при этом входящие в состав ВИЧ антигены разделяются по молекулярному весу. Затем методом блоттинга (аналог выдавливания на "промокашку" избытка чернил) антигены переносят на полоску нитроцеллюлозы, которая отныне содержит невидимый пока глазом спектр антигенных полос, характерный для ВИЧ. Исследование пробы. На нитроцеллюлозную полоску наносится исследуемый материал (сыворотка, плазма крови пациента и т.п.), и если в пробе есть специфические антитела, то они связываются со строго соответствующими им (комплиментарными) антигенными полосами. В результате последующих манипуляций результат этого взаимодействия визуализируется - делается видимым. Трактовка результата. Наличие полос на определённых участках нитроцеллюлозной пластины подтверждает присутствие в исследованной сыворотке антител к строго определённым антигенам ВИЧ. жүктеу/скачать 328 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|