Таблица 1.
Подбор режимов стерилизации апикальных меристем образцов картофеля для введения в
культуру
in vitro
Дезинфицирующий
раствор, время
стерилизации
Сорт
картофеля
Апикальные
меристемы,
введенные
in
vitro
, шт.
Регенерация,
%
Средний
процент, %
1 вариант –
Белизна 20%
с Tween,
7 мин.
Валентина
17
100
91,7±5,0
Карасайский
13
92,1
Азиада
23
98,4
Жанайсан
15
87,2
Розара
16
95,6
Ягодный 19
12
91,3
Ушконыр
20
77,4
2 вариант –
Белизна 70%
с Tween,
7 мин.
Валентина
23
80,2
76,0±2,8
Карасайский
12
77,1
Азиада
15
82,1
Розара
16
64,6
3 вариант –
Белизна 100%
с Tween,
7 мин.
Валентина
23
56,1
61,4±3,2
Дуняша
11
66,7
4 вариант –
Белизна 20%
с Tween,
10 мин.
2-10-09
13
98,4
95,7±1,5
15-09-2
24
93,1
21-10-06
12
96,7
6-10-03
21
94,7
26-09-03
12
95,6
5 вариант –
Белизна 70%
с Tween,
10 мин.
4-10-01
23
90,1
79,8±3,4
2-10-06
12
84,3
22-10-11
12
62,4
26-10-07
12
74,8
Биотехнология. Теория и практика. 2013, №4, стр. 42-49
DOI: 10.11134/btp.4.2013.6
5
2-10-12
21
87,3
6 вариант –
Белизна 20%,
10 мин.
Валентина
14
84,1
80,8±4,3
Карасайский
23
69,3
Азиада
10
88,2
Розара
14
81,6
7 вариант –
Белизна 70%,
10 мин.
Валентина
13
74,3
70,4±4,4
Карасайский
25
72,9
Мошняковский
12
64,1
8 вариант –
Белизна 100%,
10 мин.
Валентина
22
59,1
59,1±3,3
Таким образом, 4 и 1 варианты (20% концентрация коммерческого хлорсодержащего раствора
«Белизна» с Tween, время экспозиции 10 минут и 7 минут), 5 и 2 варианты (70% «Белизна» с Tween, время
экспозиции 10 и 7 минут) могут быть использованы для стерилизации апикальных меристем картофеля для
введения в культуру
in vitro
. Для стерилизации без Tween может быть использован шестой вариант (Белизна
20%, время экспозиции 10 мин.).
В настоящее время введено в культуру
in vitro
679 апикальных меристем сортов и форм картофеля для
создания коллекции пробирочных растений и криконсервации.
Оптимизация состава питательной среды для размножения меристемных линий сортов и форм
картофеля
В следующем эксперименте проведено изучения влияния состава питательной среды на рост
меристемных линий образцов картофеля (табл. 2). Калашникова Е.А. с соавторами [11] для клонального
микроразмножения картофеля рекомендует использовать питательную среду Мурасиге и Скуга с
добавлением аскорбиновой кислоты – 20 мг/л; мезоинозита – 100 мг/л; ИУК – 0,5 мг/л; БАП – 1,0 мг/л;
сахарозы – 20000 мг/л; агара – 7000 мг/л.
Таблица 2.
Варианты питательных сред для размножения меристемных линий картофеля (среда Мурасиге и
Скуга)
Вещество
В-1 (мг/л)
В-2 (мг/л)
В-3 (мг/л)
В-4 (мг/л)
Макросоли
50
50
50
50
Микросоли
1,0
1,0
1,0
1,0
Хелат железа
5,0
5,0
5,0
5,0
CaCl
2
*2H
2
O
330
330
330
330
Мезоинозит
100
100
100
100
Пиридоксин
1,0
1,0
1,0
1,0
Тиамин
1,0
1,0
1,0
1,0
Никотинамид
1,0
1,0
1,0
1,0
Аденин
40,0
10,0
1,0
1,0
Гиббереловая кислота
2,0
1,0
-
-
Аскорбиновая кислота
-
-
100,0
-
Пантотенат Ca
-
10,0
-
-
Глицин
-
-
-
3,0
Активированный уголь
-
10000
-
-
Кинетин
1,0
-
1,5
-
ИУК
1,0
1,0
0,5
0,5
Агар
7000
7000
7000
7000
Сахароза
30000
20000
30000
40000
Глюкоза
-
20000
-
-
Для размножения меристемных линий картофеля использовали 4 варианта питательной среды МС с
добавлением различных концентраций витаминов, фитогормонов. При сравнении 4-х вариантов среды не
выявлено влияние кинетина, гиббереловой кислоты на активный рост меристемных линий, в связи с этим
можно использовать питательные среды без добавления этих гормонов. Для формирования корней лучше
использовать ИУК в концентрации 0,5 мг/л в питательной среде МС.
Биотехнология. Теория и практика. 2013, №4, стр. 42-49
DOI: 10.11134/btp.4.2013.6
6
При изучении 4-х вариантов сред по сорту Шортандинский наблюдали наибольший прирост стебля –
10,1 см; количество листьев – 10,2 шт.; корней – 9,7 шт. на варианте питательной среды В4 (табл. 3, рис. 2).
Также по остальным четырем сортам Ушконыр, Дуняша, Латона, Жанайсан на этой же питательной среде
активно росли пробирочные растения с хорошо развитой корневой системой.
Наименьший рост меристемных линий по высоте растений, по формированию листьев наблюдали на
варианте среды В1, корнеобразование отсутствовало. При изучении роста меристемных линий на пяти
сортах картофеля Ушконыр, Дуняша, Шортандинский, Латона, Жанайсан активное корнеобразование было
при использовании вариантов сред В3, В4. Таким образом, для размножения меристемных линий лучше
использовать варианты питательных сред В3, В4.
Достарыңызбен бөлісу: |