1. Медицинская микробиология, ее цели и задачи, отношение к другим медицинским наукам. Роль медицинской микробиологии в создании профилактического направления в здравоохранении. Микробиология —
Изменения проницаемости клеточной стенки
жүктеу/скачать 0,95 Mb.
|
Otvety po mikrobiologii-1
- Бұл бет үшін навигация:
- Изменения электронного транспорта
- Прочие факторы.
- Диффузный метод
- Метод дисков
- Исходный метод. Чашки Петри
| Изменения проницаемости клеточной стенки.Способность к проникновению лекарственных препаратов детерминирована самой природой клеточной стенки. Например, большинство антибиотиков легко попадает внутрь грам-положительных бактерий, в то время как оболочка грамотрицательных служит барьером для многих из них, в особенности для тех, чьи мишени расположены в цитоплазме, и препараты проявляют выраженную гидрофильность (тетрациклины, аминогликозиды, макролиды и др.).
3. Изменения электронного транспорта: проникновение аминогликозидов прямо зависит от переноса электрона к атому кислорода. Такие препараты неэффективны против анаэробов и факультативных бактерий, пребывающих в анаэробных условиях (например, при образовании абсцессов). Ферментирующие бактерии (например, стрептококки) также резистентны к их действию. Прочие факторы. Отмечена способность некоторых бактерий отвечать на фармакологическое воздействие повышением синтеза транспортных белков, выводящих препараты (например, тетрациклины) из клетки. Некоторые микроорганизмы (например, Streptococcus pneumoniae) способны трансформировать бактерицидную активность антибиотиков в бактериостатическую; эффект обусловлен снижением проницаемости клеточной стенки и связыванием препарата муреингидралазами (аутолитический фермент). Существует несколько стандартных тестов, определяющих чувствительность бактерий к химиотерапевтическим препаратам. Выявлена четкая корреляция между данными, полученными in vitro, и действием препарата in,vivo. Установлено, что для проявления удовлетворительного терапевтического эффекта концентрация препарата в сыворотке должна в 2...4 раза превышать его минимальную ингибирующую концентрацию (МИК). Диффузный метод. Этот метод несколько менее чувствителен, чем метод стандартных разведений, но проще. На практике применяют чаще. Следует учитывать, что скорость диффузии в агаре любого препарата зависит от его структуры, молекулярной массы, наличия примесей, состава и рН среды. 1. Метод дисков. Повсеместно применяют модификацию, предложенную Кирби и Бауэром, признанную стандартным тестом. После посева тест-культуры на поверхность агара в чашках размещают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные различными антимикробными препаратами (используют коммерческие образцы, содержащие определенные концентрации). После инкубации при 37 °С в течение времени, необходимого для роста выделенного возбудителя, измеряют диаметр зоны торможения роста и сравнивают с величинами зон задержки роста, указанными в инструкциях, прилагаемых к дискам. На основании сравнения выделенные микроорганизмы относят к чувствительным, умеренно чувствительным или резистентным. Прежде чем предложить к реализации любой антибактериальный препарат, производитель обязан определить спектр его активности по отношению к тысячам штаммов различных микроорганизмов, учитывая, что фармакокинетические свойства соединения должны обеспечивать поддержание концентраций в сыворотке в 2...4 раза превышающие МИК, в течение длительного времени. Учитывая имеющуюся информацию по средним показателям чувствительности, в большинстве лабораторий при выделении конкретных возбудителей используют определенные наборы дисков. 2. Исходный метод. Чашки Петри (желательно со шлифованным дном) заполняют питательной средой (МПА, среда АГВ или любой другой агар, соответствующий питательным потребностям возбудителя, например кровяной) слоем в 4...5 мм. После застывания агар подсушивают в термостате при 37 °С в течение 20 мин. Посев тест-культуры можно осуществлять внесением в смеси с полуостывшим агаром (207 клеток/мл); чаще на агар наслаивают микробную взвесь (105 клеток/мл). После равномерного распределения по поверхности излишки суспензии удаляют, а чашки подсушивают в термостате. В агаре пробивают лунки и в каждую вносят по 0,1 мл раствора исследуемого препарата, после чего инкубируют 18 ч при 37 °С (срок инкубации можно варьировать в зависимости от скорости роста микроорганизмов). Измеряют диаметр зоны подавления роста для каждого препарата. жүктеу/скачать 0,95 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|