1. Медицинская микробиология, ее цели и задачи, отношение к другим медицинским наукам. Роль медицинской микробиологии в создании профилактического направления в здравоохранении. Микробиология —

Изменения проницаемости клеточной стенки

жүктеу/скачать 0,95 Mb. бет 102/154 Дата 30.03.2023 өлшемі 0,95 Mb. #173351

Бұл бет үшін навигация:

• Изменения электронного транспорта
• Прочие факторы.
• Диффузный метод
• Метод дисков
• Исходный метод. Чашки Петри

Изменения проницаемости клеточной стенки.Способность к проникновению лекарственных препа­ратов детерминирована самой природой клеточной стенки. На­пример, большинство антибиотиков легко попадает внутрь грам-положительных бактерий, в то время как оболочка грамотрица­тельных служит барьером для многих из них, в особенности для тех, чьи мишени расположены в цитоплазме, и препараты прояв­ляют выраженную гидрофильность (тетрациклины, аминоглико­зиды, макролиды и др.). 3. Изменения электронного транспорта: проникновение аминогликозидов прямо зависит от переноса электрона к атому кислорода. Такие препараты неэффективны против анаэробов и факультативных бактерий, пребывающих в анаэробных условиях (например, при образовании абсцессов). Ферментирующие бактерии (например, стрептококки) также резистентны к их действию. Прочие факторы. Отмечена способность некоторых бактерий отвечать на фармакологическое воздействие повышени­ем синтеза транспортных белков, выводящих препараты (напри­мер, тетрациклины) из клетки. Некоторые микроорганизмы (на­пример, Streptococcus pneumoniae) способны трансформировать бактерицидную активность антибиотиков в бактериостатическую; эффект обусловлен снижением проницаемости клеточной стенки и связыванием препарата муреингидралазами (аутолитический фермент). Существует несколько стандартных тестов, определяющих чув­ствительность бактерий к химиотерапевтическим препаратам. Вы­явлена четкая корреляция между данными, полученными in vitro, и действием препарата in,vivo. Установлено, что для проявления удовлетворительного терапевтического эффекта концентрация препарата в сыворотке должна в 2...4 раза превышать его мини­мальную ингибирующую концентрацию (МИК). Диффузный метод. Этот метод несколько менее чувствителен, чем метод стандартных разведений, но проще. На практике при­меняют чаще. Следует учитывать, что скорость диффузии в агаре любого препарата зависит от его структуры, молекулярной массы, наличия примесей, состава и рН среды. 1. Метод дисков. Повсеместно применяют модифика­цию, предложенную Кирби и Бауэром, признанную стандартным тестом. После посева тест-культуры на поверхность агара в чашках размещают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные раз­личными антимикробными препаратами (используют коммерческие образцы, содержащие определенные концентрации). После инкубации при 37 °С в течение времени, необходимого для роста выделенного возбудителя, измеряют диаметр зоны торможения роста и сравнивают с величинами зон задержки роста, указанны­ми в инструкциях, прилагаемых к дискам. На основании сравне­ния выделенные микроорганизмы относят к чувствительным, умеренно чувствительным или резистентным. Прежде чем предложить к реализации любой антибактериаль­ный препарат, производитель обязан определить спектр его ак­тивности по отношению к тысячам штаммов различных микро­организмов, учитывая, что фармакокинетические свойства со­единения должны обеспечивать поддержание концентраций в сыворотке в 2...4 раза превышающие МИК, в течение длительно­го времени. Учитывая имеющуюся информацию по средним по­казателям чувствительности, в большинстве лабораторий при выделении конкретных возбудителей используют определенные наборы дисков. 2. Исходный метод. Чашки Петри (желательно со шли­фованным дном) заполняют питательной средой (МПА, среда АГВ или любой другой агар, соответствующий питательным по­требностям возбудителя, например кровяной) слоем в 4...5 мм. После застывания агар подсушивают в термостате при 37 °С в те­чение 20 мин. Посев тест-культуры можно осуществлять внесени­ем в смеси с полуостывшим агаром (207 клеток/мл); чаще на агар наслаивают микробную взвесь (105 клеток/мл). После равномер­ного распределения по поверхности излишки суспензии удаляют, а чашки подсушивают в термостате. В агаре пробивают лунки и в каждую вносят по 0,1 мл раствора исследуемого препарата, после чего инкубируют 18 ч при 37 °С (срок инкубации можно варьиро­вать в зависимости от скорости роста микроорганизмов). Измеря­ют диаметр зоны подавления роста для каждого препарата. жүктеу/скачать 0,95 Mb. Достарыңызбен бөлісу: