42
Содержание пластидных пигментов определяли по оптической плотности
ацетоновой вытяжки на спектрофотометре LKB Ultrospec – II при 662 нм, 644
нм и 440 нм., а расчеты проводились по уравнению Хольма-Веттштейна [102].
Полученные экспериментальные данные статистически обработаны [39].
2.3.1. Схема проведения опытов
Опыт 1
.
Отработка режимов стерилизации. В исследовании использованы
такие химические компоненты, как диацид,
хлорамин, гипохлорид Са, спирт
этиловый,
вода в различных концентрациях, последовательности и
длительности действия, а также антибиотики стрептомицин и нистатин.
Опыт 2.
Подбор питательных сред и регуляторов роста для введения
эксплантов
граната и инжира в культуру
in vitro
. В качестве базовой среды
использовали широко распространенную среду Мурасиге-Скуга с добавлением
витаминов В
1
; В
6
; В
12;
РР; С, а также мезоинозита. В качестве фитогормонов
использовали нафтилуксусную кислоту (НУК);
индолилмасляную кислоту
(ИМК); индолилуксусную кислоту (ИУК); кинетин (К); 6-бензиламинопурин
(6-БАП), дополнительно добавляли и сахарозу. Для каждого варианта
использовали свою концентрацию.
Опыт 3.
Изучение влияния срока изоляции эксплантов на их
морфогенную активность. Апикальные и пазушные
почки вычленялись в
течение года (январь-декабрь) с последующим введением в культуру
in vitro
.
Опыт 4.
Подбор оптимальных композиций ростовых веществ для
укоренения эксплантов. В
исследованиях, в качестве индукторов ризогенеза
были использованы нафтилуксусная кислота (НУК), β-индолилмасляная
кислота (ИМК) и кинетин (К), как по отдельности, так и в сочетании.
Опыт 5.
Подбор оптимальных компонентов и
сочетаний субстратов для
адаптации регенерантов в нестерильных условиях. После развития корневой
системы пробирочные растения пересаживали в горшочки с различными
типами субстрата
для адаптации к условиям
in vivo
.
