ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
Р а б о т а №1
Цель:
Провести цитоскопическое исследование на стафилококковое бактерионоси-
тельство.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Каждый студент обследует самого себя. Сухим стерильным тампоном снимают со
слизистой оболочки переднего отдела носа клетки слущенного эпителия и наносят на
предметное стекло. Слизистая оболочка должна быть свободна от секрета и по ней следу-
ет тщательно провести тампоном, вращая его вдоль оси. Микропрепарат готовят путем
«перекатывания» тампона по поверхности предметного стекла. Затем препарат фиксируют
в этиловом спирте 3-4 минуты и окрашивают синькой Мансона в течение 1-2 секунд, по-
сле чего промывают водой и высушивают. Под иммерсией проводят подсчет 10-30 эпите-
лиоцитов на обнаружение в них микроколоний стафилококка. Микроколонией называется
скопление конгломерата из 4-х и более кокков внутри клетки. Обследуемый является бак-
терионосителем при обнаружении 20% и более эпителиоцитов с микроколониями стафи-
лококка.
ПРОТОКОЛ
Цель:
№№ эпителиоцитов
% клеток с микро-
колониями
1 2 3 4 5 6 7 ...
28
29
30
Наличие
микроколоний ста-
филококка
Вывод:
(
Ответить на вопросы: Является ли обследуемый стафилококковым бак-
терионосителем? Почему?)
Р а б о т а №2
Цель:
Освоить бактериологический метод диагностики стафилококковых инфекций.
Задача.
Больная М., 25 лет. Клинический диагноз: «Лактационный мастит». По го-
товым демонстрациям описать ход исследования грудного молока с учетом количества
возбудителя, оформить протокол. Сделать вывод.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Полуколичественный способ секторного посевова по Голду позволяет приблизи-
тельно определить число микробных клеток в 1 мл жидкого патологического материала –
грудное молоко, сперма, моча, т.е. степень обсемененности.
Рис. 1 Метод секторных посевов Голда
12
Для посева используют бактериологическую петлю, диаметром 2 мм, емкостью
0,005 мл, производят посев материала (30-40 штрихов) на сектор I чашки с кровяным ага-
ром. После этого петлю прожигают и производят 4 штриховых посева из сектора I в сек-
тор II и аналогичным образом – из сектора II во III и из III в IV (рис. 1). После инкубиро-
вания подсчитывают число выросших колоний в разных секторах на агаре и в соответст-
вии с таблицей рассчитывают степень обсемененности на 1 мл исследуемого материала.
Метод секторных посевов позволяет не только определить степень обсемененности, но и
выделить возбудителя заболевания в чистой культуре. В случае наличия в 1 мл 250 КОЕ и
более микробов обсемененность характеризуется как массивная, в случае менее 250 КОЕ
– как не массивная.
Таблица
Определение степени обсемененности по количеству выделенных колоний
I
Количество колоний в секторах
Количество бактерий в 1
мл мочи
II
III
IV
1-6
-
-
-
менее 1000
8-20
-
-
-
3000
20-30
-
-
-
5000
30-60
-
-
-
10000
70-80
-
-
-
50000
100-150
5-10
-
-
100000
не сосчитать
20-30
-
-
500000
-//-
40-60
-
-
1 млн.
//-
100-140
10-20
-
5 млн.
-//-
не сосчитать
30-40
-
10 млн.
-//-
-//-
60-80
1-3
100 млн.
Интерпретация результатов при посеве грудного молока:
Женщина не может быть донором, ей нельзя кормить, если она переболела любой
формой мастита, а также различными воспалительными заболеваниями молочной железы
или вне ее при обнаружении в молоке массивного роста золотистого стафилококка, при
повторном выделении даже единичных колоний представителей энтеробактерий и псев-
домонад.
Интерпретация результатов при посеве мочи:
если СБУ
10 КОЕ/мл – отсутствие воспалительного процесса (контаминации мо-
чи);
если СБУ = 10 КОЕ/мл – сомнительный результат и исследование следует повто-
рить;
если СБУ
10 КОЕ/мл – наличие воспалительного процесса.
ПРОТОКОЛ
Цель:
Исследуемый материал
Среды для посева и условия культивирования
(рис., описание роста)
Микроскопия чистой
«Биохимический ряд»
Антибиотикограмма
(dзоны, R,S,I)
13
культуры (рис., способ
окраски)
Пла
зм
ок
оа
гул
аза
Ферментативная
активность
1
2
3
4
5
аэробные
условия
анаэробные
условия
гл
ю
коз
а
ма
ннит
гл
ю
коз
а
м
ан
ни
т
Вывод:
(Ответить на вопросы: 1. Подтвердился ли клинический диагноз? Почему?
2. Какое количество возбудителя обнаружено при исследовании грудного молока (в
КОЕ/мл)? 3. Какой антибиотик необходимо назначить для рациональной антибиотико-
терапии? Почему? 4. Можно ли больной кормить своего ребенка грудью? 5. Какие среды
и почему используют для посева исследуемого материала?)
Достарыңызбен бөлісу: |