ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ
8 1
К
м ет одам генетигеского анализа
относятся ПЦР, рестрикционный анализ,
молекулярная гибридизация, риботипирование, опосредованная транскрипцией
амплификация рибосомальной рибонуклеиновой кислоты (РНК), высокопроиз
водительное секвенирование.
Наиболее широко в инфекционной практике применяется
ПЦР.
Основной
принцип этого метода представлен на рис. 6.14.
Суть ПЦР заключается в обнаружении в биологическом материале участков
дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), специфичных для представителей того
или иного вида микроорганизмов. ПЦР обладает очень высокой чувствитель
ностью и позволяет обнаружить даже минимальные количества генетического
материала, поскольку в содержание метода входит его селективная репликация до
такого объема, когда он может быть зарегистрирован специальными приемами.
Эта реакция не только чувствительна, но и высоко специфична. Первоначально
использовался качественный вариант. В последующем был разработан количе
ственный метод ПЦР (ПЦР в режиме реального времени), которая позволяет в
условных единицах (число копий искомого гена в 1 мл исследуемого материала
или ME) определять количество микроорганизма (микробную нагрузку). Этот
количественный тест оказался очень полезным во врачебной практике при
мониторинге больных хроническими вирусными инфекциями — хроническими
вирусными гепатитами, ВИЧ-инфекцией и др. ПЦР в настоящее время является
основным методом индикации возбудителей в организме инфекционного больно
го независимо от природы этих возбудителей — простейших, грибов, бактерий и
бактериеподобных микроорганизмов, вирусов. Для исследования используются в
зависимости от преимущественной локализации возбудителя кровь, СМЖ, моча,
кал, экссудаты и т.д.
Достарыңызбен бөлісу: