Әбілқас Сағынов атындағы Қарағанды техникалық университеті
Химия және химиялық технологиялар кафедрасы
Escherichia coli конъюгациясы – бұл генетикалық материалдың бактерия жасушалары арасында тікелей жасушадан жасушаға байланысы немесе екі жасуша арасындағы көпір арқылы тасымалдануы. Бұл пилус арқылы болады. Бұл бактериялардың парасексуалды көбею жолы. Бұл трансформация және трансдукция сияқты көлденең генді тасымалдау механизмі.
E.coli бактериялық конъюгациясы көбінесе жыныстық көбеюдің немесе жұптаудың бактериялық баламасы ретінде қарастырылады, өйткені ол генетикалық материал алмасуды қамтиды.
Конъюгация схемасы
Донорлық жасуша пилус шығарады.
Пилус қабылдаушы жасушаға бекітіліп, екі жасушаны біріктіреді.
Мобильді плазмид кесіліп, ДНҚ-ның бір жіпі реципиент жасушасына жіберіледі.
Екі жасуша екі қатарлы дөңгелек плазмид алу үшін қосымша жіп синтездейді, сонымен қатар араларды көбейтеді.
Гендердің жасушадан жасушаға бағытталуы
Ата-аналық штаммдардың бірі стрептомициноустикалық болған кросс-тәжірибелер генетикалық материал тек бір бағытта беріледі деген қорытынды жасауға мүмкіндік берді. Егер жасушалар кесіп өткеннен кейін стрептомицин бар ортаға егілсе, онда рекомбинанттар штаммдардың бірі (штамм-реципиент) стрептомициноустоичті болған және тірі қалған жағдайларда ғана пайда болды. Басқа ата-аналық штамм өзін қалай ұстағаны маңызды емес еді; ол стрептомицинге сезімтал болуы мүмкін және осы ортада өліп кетуі мүмкін, ол генетикалық материалдың доноры ретінде өз қызметін атқара алады.
F факторы және HFR күйі
Бактерияларды кесіп өту процесін зерттеу кезінде жасушаның донор болу қабілеті конъюгация кезінде бір жасушадан екінші жасушаға - F жыныстық факторына (fertility - құнарлылықтан) берілетін ерекше фактордың болуымен байланысты екендігі анықталды. F факторы жоқ жасушалар (f~ жасушалары) тек алушы ретінде жұмыс істей алады. Конъюгация кезінде, яғни жасушалар арасындағы тікелей байланыс кезінде F факторының берілу жиілігі 100% - ға жақын. Осылайша, реципиент-жасушалар конъюгация нәтижесінде потенциалды донорларға айналады; хромосомалық белгілері әлі берілмейді.
Генетикалық карта
Донор жасушасынан гендердің ауысуының уақыттық реттілігін анықтауға мүмкіндік беретін жоғарыда сипатталған үзілген конъюгация әдісін қолдану нәтижесінде бактериялардың хромосомасында гендердің орналасу картасын жасауға болады (7-сурет).
7 – Сурет - Escherichia coli хромосомасының генетикалық картасы
F факторы - салмағы 45 106 Да болатын дөңгелек екі тізбекті ДНҚ молекуласы. ДНҚ-ның экстрахромосомалық автономды репликацияланатын элементі ретінде оны плазмидаға жатқызу керек. Бұл молекулада конъюгация процесіне жауап беретін гендер, соның ішінде коньюгацияға қажет жыныстық түктер немесе F-пили сияқты жасушалардың беткі құрылымдарын анықтайтын гендер бар. Ықтималдығы бойынша, олар донорлық жасуша мен реципиент-жасуша арасындағы байланыста өзара тануға қызмет етеді және конъюгация көпірінің пайда болуына мүмкіндік береді.
E. coli (Escherichia coli) - бұл әдетте адамдар мен жануарлардың ішектерінде өмір сүретін бактерия. Молекулалық генетика бойынша қазіргі зерттеулерде ол бірінші орындардың бірін алады. Бұл ұзындығы шамамен 2 мкм және қалыңдығы 0,8-1 мкм өзек тәрізді организм. Сыртта, E. coli жасушасы қатты қабықпен жабылған, ол қандай да бір себептерге байланысты оның мазмұны жоғалса да, пішінін сақтайды. Жасуша мембранасының астында серпімді жұқа цитоплазмалық мембрана орналасқан. Егер сіз ферменттің әсерінен жасуша қабығын алып тастасаңыз, онда жасуша оның құрамымен бірге протопласт немесе сферопласт деп аталатын доп түрінде болады. Бакгерия жасушасының құрамы цитоплазмадан және оған қосылған ДНҚ молекулаларынан тұратын протоплазмамен ұсынылған. Клетка гаплоидна және құрамында бір хромосому білдіретін ұзақ айналма жіп ДНК. Оның ұзындығы шамамен 1 300 мкм, яғни бактериялық жасушаның өзінен 600 есе ұзын. Алайда, жасушада ДНҚ бірнеше рет оралып, тығыз "оралған". Кем дегенде, бір нүктеде хромосома цитоплазмалық мембранадан жасуша тереңдігіне өтетін және мезосомалар деп аталатын түзілімдерге бекітілген.