39
пограничные участки между пораженной и здоровой тканью.
Проведение
окрашивания (например, по Граму) облегчает распознавание бактериальных
клеток в ткани растения-хозяина.
•
Микробиологический
. Заключается в изоляции возбудителя из пораженных
тканей на искусственные питательные среды. При этом необходимо установить
патогенность изолятов бактерий, то есть их способность вызывать на искусствен-
но инфицированных растениях те же симптомы, какие были на исследуемом рас-
тении при естественном поражении. При этом действуют в соответствии с прави-
лом Роберта Коха, названным триадой Коха. Метод включает три основных этапа:
выделение возбудителя, заражение растения и снова выделение возбудителя.
•
Серологический
. Сущность метода такая же, как при диагностике ви-
русов. Сложность серологической диагностики бактерий состоит в том, что у
бактериальной клетки имеются белки, не только специфичные для вида, но и
общие для рода и семейства бактерий. Поэтому для получения специфичной
антисыворотки используют лишь видоспецифичные белки (антигены).
Наиболее часто применяют
такие серологические методы, как иммунофер-
ментный анализ и реакцию иммунофлуоресценции.
•
Молекулярный
. Среди нескольких диагностических методов, в которых
используется полиморфизм молекулы ДНК бактерий, наиболее распространен
метод амплификации (умножения) видоспецифичных
последовательностей
ДНК при полимеразной цепной реакции (ПЦР). В ходе этой реакции фрагмен-
ты ДНК, характерные только для одного вида бактерии, избирательно синте-
зируются ферментом полимеразой до количества, в
тысячи и миллионы раз
превышающего исходное число копий выбранного фрагмента ДНК. Далее
фрагмент обнаруживают с помощью электрофореза в
агарозном геле или по
флуоресценции исходного раствора. Метод отличается высокой чувствитель-
ностью (теоретически достаточно 1 копии бактериальной ДНК), быстротой (до
2...3 ч), высокой надежностью. К недостаткам метода относят высокую стои-
мость реактивов и оборудования для проведения ПЦР, а также необходимость
предварительного изучения разнообразия ДНК фитопатогенных бактерий.
Достарыңызбен бөлісу: 
