Лекция 1 Тема: Понятие о программируемой гибели клеток. Новый взгляд на классификацию пкг



Pdf көрінісі
бет41/84
Дата09.10.2022
өлшемі3,24 Mb.
#152321
түріЛекция
1   ...   37   38   39   40   41   42   43   44   ...   84
Байланысты:
Апоптоз Абрамова магистры лекции

Белок р53 
Р53 - раковый супрессорный ген. Он получил свое название по молекулярной массе 
белкового продукта. Ген наследуется как аутосомная доминанта при синдроме Ли-
Фраумени - редкой форме наследственного рака. У больных этим синдромом развивается 
рак различных органов, что связано с мутациями в гене р53. Изучение этих мутаций 
открыло новые свойства р53 и объяснило его связь с возникновением рака.P53 - ядерный 
фосфопротеин, который открыли в SV40 трансформированных клетках, в которых он 
связан с Т-антигеном. Повышенная экспрессия р53 была обнаружена во многих раковых 
клеточных линиях. В ранних экспериментах вставка клонированного р53 была найдена в 
иммортализованных клетках, в связи с чем его назвали онкогеном с обычной 
доминантной функцией. Но все трансформирующие формы р53 выключались в 
мутантных формах белка. И тогда они попали в категорию доминантных негативных 
мутантов, которые функционируют через подавление функции в диком типе. Наиболее 
общее формой доминантного негативного мутанта является та, которая формирует 
гетеродимерный белок, объединяющий субъединицу мутировавшего и дикого типа, в 
котором субъединица дикого типа не функционирует. Вероятно, р53 существует как 
тетрамер.Трансформированный фенотип образуется либо делецией обоих аллелей или 
точечной мутацией в одном из аллелей, которая продуцирует доминантный негативный 
фенотип . Обе ситуации найдены в раковых опухолях человека. Мутации р53 
накапливаются во многих во многих типах рака человека, вероятно из за того, что потеря 
р53 стимулирует рост клетки, а для остановки роста нужен дикий тип р53. Многообразие 
видов рака дает основания предполагать, что р53 не тканеспецифичен, то есть он вовлечен 
в общий контроль пролиферации и потеря этого контроля может быть вторичным 
событием, которое стимулирует рост многих опухолей. Такая интерпретация 
предполагает, что нормальные клетки растут в сдержанной манере, которая обычно 
ингибируется р53.
Какова функция р53 на молекулярном уровне? 
р53 был открыт как белок, 
связывающийся с большим Т-антигеном вируса SV40. В отличие от дикого типа, 
мутантные формы белка не способны связывать Т- антиген. Связывание дикого типа р53 с 
Т-антигеном коррелирует с его способностью стимулировать репликацию вируса. Одна 
возможность - р53 дикого типа связывается с клеточными аналогами Т-антигена, при этом 
ингибируется активность последнего. У мутантных форм такая способность теряется. 
Белок р53 является ДНК связывающим белком, узнающим специфичный мотив из 10 п.о. 
в активном промоторе, который содержит этот мотив. Для некотоых генов р53 может 
быть супрессором. р53 также регулирует экспрессию генов, контролирующих клеточный 
цикл. Этот белок связывается с последовательностью ДНК PuPuPuC(A/T)(T/A)GpyPyPy, 


которая содержится в некоторых промоторах. Сам белок р53, состоящий из 392 
аминокислот, состоит из шести доменов:
1.
N-концевой домен
(1-50 амк.) вовлечен в транскрипционную активацию генов-
мишеней (р21- ингибитор Cdk и другие гены, участвующие в остановке клеточного цикла, 
GADD45, 14-3-3-d, Bax). Он же ответственен за взаимодействие с Mdm2 - ингибитором 
р53. В этом участке находятся 7 остатков серина и треонина, являющиеся мишенями для 
киназ. 
2.
Дополнительный транскрипционный домен (43-73 амк
.) для активации генов-
мишеней.
3. Гибкий пролин-богатый домен (73-97амк.), в котором выявлены элементы РххР, 
важен для полного проявления супрессорной активности. Участвует в запуске апоптоза. 
Мишени - TBP, TFIID, SpII, HIF-1, STAT-5, Bcl-2, MDR-1, рецептор тироидного гормона.
4. 
Центральный 
домен 
(100-300 
амк.), 
который 
узнает 
специфические 
последовательности ДНК. Именно в этом районе обнаружено большинство мутаций в 
раковых опухолях.
5. Участок, отвечающий за ядерную локализацию р53 (305-323амк.).альфа-спираль - 
участок, отвечающий за тетрамеризацию (323-356амк.). 
Основный домен (363-392амк.) является мишенью для модифицирующих ферментов 
(киназ, ацетилаз, гликозилаз). В немодифицированной форме он препятствует 
образованию комплекса с ДНК. Кроме того, С-конец может может неспецифически 
связываться с одноцепочечной ДНК, непарными основаниями и концама ДНК, что 
указывает на его участие в узнавании повреждений ДНК и запуске репарации.Р53 
называют "стражем генома". Он активируется в ответ на различные виды стресса и 
останавливает пролиферацию, а вслучае более серьезных повреждений запускает 
программу апоптоза - гибели клетки. Около 50% опухолей человека имеют дефектный 
р53. Большинство мутаций р53 возникает в позициях, где аминокислоты 
высококонсервативны. Это предполагает, что эти мутации связаны с консервативными 
функциями. Охарактеризованные мутации р53 вызывают эффекты, связанные с 
изменениями свойств белка, включая его время полужизни от 20 минут до нескольких 
часов, изменения его конформации, изменения его клеточной локализации от ядерной 
к цитоплазматической, изменения способности связываться с ДНК или Т-антигеном. 
Такая плейотропность делает затруднительным определить, какой из них связан с 
супрессией рака. Кроме Rb и р53 существует множество других генов супрессоров 
опухолей. В частности, к ним относятся р21, p16 и р27 - ингибиторы Cdk, которые 
будут рассмотренные в следующей главе, WT1 - супрессор транскрипции некоторых 
факторов роста и онкогенов bcl-2 и c-myc, NF1 - подавляет активность ras за счет 
активации ГТФаз. 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   37   38   39   40   41   42   43   44   ...   84




©engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет