Методичні рекомендації для студентів для підготовки І проведення практичного заняття

2) для виявлення невідомих антигенів по відомим стандартним сироваткам, що 
міститять антитіла певної специфічності (для серологічної ідентифікації збудників). 
Наприклад, якщо сироватка хворого реагує з конкретним мікробним антигеном - 
значить в сироватці хворого є антитіла проти даного мікроорганізма. 
Серологічна діагностика
- беруть стандартний антиген (диагностикум), що 
представляє собою інактивовані або живі бактерії, віруси або ж їх антигени (компоненти) у 
фізіологічному розчині. 
Серологічна ідентифікація
- використовують стандартні імунні сироватки, які 
отримують від імунізованих тварин (в крові тварин в результаті багаторазової імунізації 
збудником з'являється велика кількість антитіл). 
Аглютинація. 
Аглютинація
- склеювання і випадання в осад з однорідної суспензії бактерій, 
еритроцитів і ін. Клітин, які мають антигени, під дією специфічних антитіл - аглютиніни. 
Аглютинація
– серологічна реакція між антитілами (агглютинінами) і антигенами 
(агглютініногенами), розміщеними на поверхні бактеріальної клітини, а в результаті 
утворюється комплекс антиген-антитіло (агглютінати). 
Механізм аглютинації - під впливом іонів електроліту зменшується негативний 
поверхневий заряд бактеріальної клітини і отже вони можуть зблизитися на таку відстань 
при якому виникає склеювання бактерій. 
Макро- і мікроскопічний вигляд аглютинації: 
1) О-аглютинація (соматична) - дрібнозернистий, при мікроскопії - бактерії склеюються 
полюсами клітин, утворюючи мережу. 
2) Vi-аглютинація (капсульна) - дрібнозернистий, при мікроскопії - склеювання бактерій 
відбувається всією поверхнею клітини. 
3) Н-аглютинація (жгутикових) - аглютиніни взаємодіють з джгутиками призводячи до 
знерухомлення бактерій, при мікроскопії - крупнозерниста, склеювання бактеріальних клітин 
в області джгутиків.
Рис.6 (Із:Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии - А.А 
Воробьев, А.С Быков - 2003 год - 236 с.)
 
Реакція аглютинації використовується для визначення антитіл в сироватці крові 
хворих, наприклад, при бруцельозі (реакції Райта, Хеддельсона), черевний тиф і паратиф 
(реакція Відаля) інших інфекційних хворобах, а також при визначенні збудника, виділеного 
від хворого. Цю ж реакцію застосовують для визначення груп крові з використанням 
моноклональних антитіл проти аллоантигенів еритроцитів.Застосовуються різні варіанти 
реакції аглютинації: розгорнута, орієнтовна, непряма і ін. 
Для визначення у хворого антитіл ставлять розгорнуту реакцію аглютинації: до 
розведень сироватки крові хворого додають суспензію вбитих мікробів (диагностикум) і 
через кілька годин інкубації при 37 ° С відзначають найбільше розведення (титр) сироватки, 
при якому сталася аглютинація, тобто утворився осад. Характер і швидкість аглютинації 
залежать від виду антигену і антитіл. 
Якщо необхідно визначити збудника, виділеного від хворого, ставлять орієнтовну 
реакцію аглютинації, застосовуючи діагностичні антитіла, тобто проводять типування 
збудника. Орієнтовну реакцію проводять на предметному склі. До 1 краплі діагностичної 
імунної сироватки в розведенні 1:10 або 1:20 додають чисту культуру збудника, виділеного 
від хворого. Якщо з'являється пластівчастий осад, то реакцію проводять в пробірках зі 

збільшуючим разведенням діагностичної сироватки, додавав в кожну дозу сироватки 2-З 
краплі суспензії збудника. Реакцію вважають позитивною, якщо аглютинація відзначається в 
розведенні, близькому до титру діагностичної сироватки. В контролях (сироватка, розведена 
фізіологічним розчином хлориду натрію, або суспензія мікробів в тому ж розчині) осад у 
вигляді пластівців повинен бути відсутнім. 
Різні родинні бактерії можуть агглютинуватися однією і тією ж діагностичною 
сироваткою, що ускладнює їх ідентифікацію. Тому користуються адсорбованими 
аглютинативними сироватками, з яких видалені перехресно-реагуючі антитіла шляхом 
адсорбції їх родинними бактеріями. У таких сироватках зберігаються антитіла, специфічні 
тільки до даної бактерії. Отримання таким способом монорецепторних діагностичних 
агглютинуючих сироваток було запропоновано А. Кастелляні (1902). 

жүктеу/скачать 0,52 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: