|
№ 9-10 зертханалық – тәжірибелік сабақ
Тақырыбы: Каллус ҧлпасын пассаждау
Қажетті
құрал-жабдықтар:Петри
табақшасындағы
каллус,
залалсыздандырылған
қҧралдар
(скальпель,
пинцет),
залалсыздандырылған қағаз, фольга, МС қоректік ортасы бар Петри
табақшалары (3 дана), аналитикалық таразы, фарфорлы стаканда спирт,
спирт шам, сіріңке.
Тапсырма: Каллустың ӛсуін бақылау. Каллусты жаңа қоректік ортаға
кӛшіру.
Тапсырманың қысқаша мазмұны: Каллустың ӛсу мерзімі 4 апта, кейін
жаңа қоректік ортаға ауыстырылады.Каллусты жаңа қоректік ортаға
кӛшіру 4-6 аптада жҥргізіледі. Осы 4 апта ішінде әр 7 кҥн сайын 4 рет
ӛлшенеді де (тәжірибе 4 қайталамада жҥреді) каллустың ӛсу қисық
сызығы жасалады. Барлығы 100 ӛлшем керек, 100-150мг-нан.
Салмағымен қоса каллустың тҥсін, консистенциясын сипаттау қажет.
Ҧлпа консистенциясына каллустың тығыздығы мен борпылдақтығы
жатады. Каллус суспензиясын алу ҥшін борпылдақ каллус тиімді. Ал
тығыз каллус морфогенез ҥшін пайдаланылады.
Жұмыстың барысы:Каллус ҧлпасы ӛсіп тҧрған Петри табақшасын
ашамыз. Каллус ҧлпасын қысқышпен алып петри табақшасына салып
бірнеше бӛлікке бӛлеміз (бӛліктер шамамен 100-150 мг-нан болу керек)
Аналитикалық таразыны спиртпен сҥртіп каллус бӛліктерін фольга
қағазға салып ӛлшейміз, кейін жаңа қоректік ортаға орналастырамыз.
Табақшаны парафилммен орап жарық бӛлмеге орналастырады. 4
аптадан кейін залалсыз жағдайда ӛлшейді. Каллустың ӛсу жылдамдығын
(интенсивтілігін) келесі формулаға (1) салып есептейді.
55
Шикі масса 2 – шикі масса 1
ӚЖ = -------------------------------------------- * 100 (1)
шикі масса 1
шикі масса 1– пассажға дейінгі каллустың салмағы; шикі масса 2 –
пассаждан кейінгі каллустың салмағы.
№ 11-12 зертханалық – тәжірибелік сабақ
Тақырыбы: Вирусты антигенді бӛліп алу және тазалау.
Қажетті
құрал-жабдықтар:ӛсімдік
жадығаты,буферленген
физиологиялық ертінді, хлороформ, тӛменжылдамдықтағы және
жоғарғы жылдамдықтағы центрифуга, полиэтиленгликоль 4000,
тоңазытқыш.
Тапсырманың қысқаша мазмұны:Вирусты антигенді бӛліп алу
және тазалау болашақта негізгі вирусқа спецификалы антидене
шығаруға мҥмкіндік болып табылады.
Жұмыстың әдістемесі және орындалу барысы: Тест-ӛсімдікті
инокуляциялағаннан кейін 20-25 тәулік ӛткеннен кейін 2 г жапырақ
таңдап алады оны тоңазытқышта ҧстап (-70
0
С, 30 мин) 2 мл 0,5 М ЗФР-
да, 1% меркаптоэтанолда және ЭДТА гомогендейді. 2 мл хлороформ
қосады және 10 минут бӛлме температурасына қояды. 15 минут 5 000
жылд/мин центрифугалайды. Бӛлінген сӛлін алып тең мӛлшерде 4%
полиэтиленгликоль
қосып
тоңазытқышқа
2
сағат
қояды.
Центрифугалау12000 жылд/мин ӛтеді.
56
№ 13- 15 зертханалық – тәжірибелік сабақ
Достарыңызбен бөлісу: | 
