Өсімдік қорғаудағы биотехнология


№ 9-10 зертханалық – тәжірибелік сабақ  Тақырыбы: Каллус ҧлпасын пассаждау



Pdf көрінісі
бет20/31
Дата13.05.2020
өлшемі1,75 Mb.
#67568
1   ...   16   17   18   19   20   21   22   23   ...   31
Байланысты:
өс қорғаудағы биотехнология

 

№ 9-10 зертханалық – тәжірибелік сабақ 

Тақырыбы: Каллус ҧлпасын пассаждау 

 

Қажетті 

құрал-жабдықтар:Петри 

табақшасындағы 

каллус, 

залалсыздандырылған 

қҧралдар 

(скальпель, 

пинцет), 

залалсыздандырылған  қағаз,  фольга,  МС  қоректік  ортасы  бар  Петри 

табақшалары (3 дана), аналитикалық таразы, фарфорлы стаканда спирт, 

спирт  шам, сіріңке. 



 

Тапсырма: Каллустың ӛсуін бақылау. Каллусты жаңа қоректік ортаға 

кӛшіру. 

Тапсырманың қысқаша мазмұны: Каллустың ӛсу мерзімі 4 апта, кейін 

жаңа  қоректік  ортаға  ауыстырылады.Каллусты  жаңа  қоректік  ортаға 

кӛшіру 4-6 аптада жҥргізіледі. Осы 4 апта ішінде әр 7 кҥн сайын 4 рет 

ӛлшенеді  де  (тәжірибе  4  қайталамада  жҥреді)  каллустың  ӛсу  қисық 

сызығы  жасалады.    Барлығы  100  ӛлшем  керек,  100-150мг-нан. 

Салмағымен  қоса  каллустың  тҥсін,  консистенциясын  сипаттау  қажет. 

Ҧлпа  консистенциясына  каллустың  тығыздығы  мен  борпылдақтығы 

жатады.  Каллус  суспензиясын  алу  ҥшін  борпылдақ  каллус  тиімді.  Ал 

тығыз каллус морфогенез ҥшін пайдаланылады. 

Жұмыстың  барысы:Каллус  ҧлпасы  ӛсіп  тҧрған  Петри  табақшасын 

ашамыз.  Каллус  ҧлпасын  қысқышпен  алып  петри  табақшасына  салып 

бірнеше бӛлікке бӛлеміз (бӛліктер шамамен 100-150 мг-нан болу керек) 

Аналитикалық  таразыны  спиртпен  сҥртіп  каллус  бӛліктерін  фольга 

қағазға  салып  ӛлшейміз,  кейін  жаңа  қоректік  ортаға  орналастырамыз. 

Табақшаны  парафилммен  орап  жарық  бӛлмеге  орналастырады.  4 

аптадан кейін залалсыз жағдайда ӛлшейді. Каллустың ӛсу жылдамдығын 

(интенсивтілігін) келесі формулаға (1) салып есептейді.  




55 

 

 



Шикі масса  2 – шикі масса 1 

ӚЖ = --------------------------------------------  * 100  (1) 

шикі масса 1 

 

шикі  масса  1–  пассажға  дейінгі  каллустың  салмағы;  шикі  масса  2  – 



пассаждан кейінгі каллустың салмағы. 

 

 

№ 11-12 зертханалық – тәжірибелік сабақ 

Тақырыбы: Вирусты антигенді бӛліп алу және тазалау. 

 

Қажетті 



құрал-жабдықтар:ӛсімдік 

жадығаты,буферленген 

физиологиялық  ертінді,  хлороформ,  тӛменжылдамдықтағы  және 

жоғарғы  жылдамдықтағы  центрифуга,  полиэтиленгликоль  4000, 

тоңазытқыш. 

Тапсырманың  қысқаша  мазмұны:Вирусты  антигенді  бӛліп  алу 

және  тазалау  болашақта  негізгі  вирусқа  спецификалы  антидене 

шығаруға мҥмкіндік болып табылады.  

Жұмыстың  әдістемесі  және  орындалу  барысы:  Тест-ӛсімдікті 

инокуляциялағаннан  кейін  20-25  тәулік  ӛткеннен  кейін    2  г  жапырақ 

таңдап алады оны тоңазытқышта ҧстап (-70

0

С, 30 мин) 2 мл 0,5 М ЗФР-



да,  1%  меркаптоэтанолда  және  ЭДТА  гомогендейді.  2  мл  хлороформ 

қосады  және  10  минут  бӛлме  температурасына  қояды.  15  минут  5 000 

жылд/мин  центрифугалайды.  Бӛлінген  сӛлін  алып  тең  мӛлшерде  4% 

полиэтиленгликоль 

қосып 

тоңазытқышқа 



сағат 


қояды. 

Центрифугалау12000 жылд/мин ӛтеді. 

 

 

 



 

 

 



 

 

 



 

 

 



 

 

 



 


56 

 

 



№ 13- 15 зертханалық – тәжірибелік сабақ 



Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   16   17   18   19   20   21   22   23   ...   31




©engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет