БАКТЕРИОЛОГИЯЛЫҚЗЕРТТЕУӘДІСІНІҢКЕЗЕҢДЕРІ. МИКРОБИОЛОГИЯ Бактерия дақылыныңқасиеттерінзерттеупринципіпрокариоттыжасушалардызерттеудімақсатетіпқойғанмикробиологтарүшінде, міндетібактериялардыңпатогенділігіннемесепатогендіеместігінанықтау, содан кейін науқасқадиагнозқоюболыптабылатынлаборанттарүшіндепайдалыболуымүмкін.
АЛҒАШҚЫ ҚАДАМ Үлгіні немесе жағынды ортаның бос бетінен немесе пациенттен алынады. Осылайша, біз бактериялардың көптеген түрлерінің «коктейлін» аламыз, оны қоректік ортаға себу керек. Кейде ағзадағы таралу ошақтарын біле отырып, қажетті бактерияларды бірден бөліп алуға болады. Екі-үш күннен кейін қажетті колониялар таңдалады және стерильді цикл арқылы Петри ыдыстарының қатты ортасына жабылады. Көптеген зертханалар қатты немесе сұйық қоректік орталарды қамтитын пробиркалармен жұмыс істейді. Микробиологиядағы бактериологиялық зерттеу әдісі осылай жүзеге асырылады. ЕКІНШІ КЕЗЕҢ Бактериялардың жеке колонияларын алғаннан кейін тікелей макро- және микроанализ жүргізіледі. Колониялардың барлық параметрлері өлшенеді, олардың әрқайсысының түсі мен формасы анықталады. Колониялар көбінесе Петри табақшасында, содан кейін бастапқы материалда саналады. Бұл патогендік бактерияларды талдау кезінде маңызды, олардың саны аурудың дәрежесін анықтайды. Екінші кезең микроорганизмдердің жеке колонияларын зерттеу болып табылатын бактериологиялық зерттеу әдісін бактерияларды талдаудың биологиялық әдісімен байланыстыруға болады. Осы кезеңдегі жұмыстың тағы бір мақсаты - бастапқы материалдың көлемін арттыру. Мұны қоректік ортада жасауға болады немесе табиғи жағдайда экспериментті тірі организмдерге жүргізуге болады. Патогендік бактериялар көбейеді, нәтижесінде қан миллиондаған прокариоттық жасушалардан тұрады. Алынған қаннан бактериялардың қажетті жұмыс материалын дайындау оңай.
ҮШІНШІ КЕЗЕҢ Зерттеудің маңызды бөлігі бактериялар дақылының морфологиялық, биохимиялық, токсигендік және антигендік қасиеттерін анықтау болып табылады. Жұмыс қоректік ортада бұрын «тазартылған» дақылдармен, сондай-ақ микроскоппен (көбінесе боялған) препараттармен жүзеге асырылады. Патогендік немесе шартты түрде патогендік бактериялардың белгілі бір жүйелі топқа жатуын анықтауға, сондай-ақ олардың дәрілік заттарға төзімділігін анықтауға бактериологиялық зерттеу әдісі мүмкіндік береді. 3 кезең - антибиотиктер, яғни қоршаған ортадағы дәрілік заттардың жағдайындағы бактерия жасушаларының әрекетін талдау. Мәдениеттің антибиотиктерге төзімділігін зерттеу белгілі бір науқасқа қажетті, ең бастысы тиімді дәрілерді тағайындау қажет болған кезде үлкен практикалық маңызы бар. Бұл жерде бактериологиялық зерттеу әдісі көмектесе алады.
МӘДЕНИ ОРТА ДЕГЕНІМІЗ НЕ? Бактериялардың дамуы мен көбеюі үшін алдын-ала дайындалған қоректік орталарда болу керек. Олар консистенциясы бойынша сұйық немесе қатты, ал шығу тегі бойынша өсімдік немесе жануар болуы мүмкін. Мәдениет құралдарына қойылатын негізгі талаптар: 1. Стерильділік. 2. Максималды ашықтық. 3. Қышқылдықтың, осмостық қысымның, су белсенділігінің және басқа биологиялық құндылықтардың оңтайлы көрсеткіштері.
ОҚШАУЛАНҒАН КОЛОНИЯЛАРДЫ АЛУ 1. Дригальский әдісі. Бұл бактериялардың ілмегіне микроорганизмдердің әртүрлі түрлерімен жағынды жағуынан тұрады. Бұл цикл қоректік ортасы бар алғашқы Петри табақшасынан өтеді. Бұдан әрі, циклды өзгертпестен, қалдық материал әдісі екінші және үшінші Петри ыдыстарында жүзеге асырылады. Сонымен, колонияның соңғы үлгілерінде бактериялар өте тығыз егілмейді, осылайша жұмыс үшін қажетті бактерияларды табу мүмкіндігі жеңілдейді. 2. Кох әдісі. Мұнда балқытылған қоректік ортасы бар түтіктер қолданылады. Онда бактериялардың жағындысы бар цикл немесе пипетка орналастырылады, содан кейін пробиркадағы заттар арнайы табаққа құйылады. Агар (немесе желатин) біраз уақыттан кейін қатаяды, ал оның қалыңдығында қажетті жасуша колонияларын табу оңай. Жұмысқа кіріспес бұрын пробиркалардағы бактериялардың қоспасын сұйылту өте маңызды, сондықтан микроорганизмдердің концентрациясы өте жоғары болмайды.
Бактериологиялық зерттеу әдісі, оның кезеңдері бактериялардың қажетті мәдениетін оқшаулауға негізделген, оқшауланған колонияларды табудың осы екі әдісінсіз жасай алмайды.
АНТИБИОТИКОГРАММА Көрнекі түрде бактериялардың есірткіге реакциясын екі практикалық жолмен көруге болады: 1. Қағаз дискілер әдісі. 2. Сұйық ортада бактериялар мен антибиотиктің сұйылтуы. Қағаз диск әдісі қатты қоректік орталарда өсірілген микроорганизмдердің дақылын қажет етеді. Мұндай ортаға антибиотиктерге малынған дөңгелек пішінді бірнеше қағаз салыңыз. Егер препарат бактериялық жасушаларды бейтараптандырумен сәтті күресетін болса, мұндай емдеуден кейін колониялардан айырылған аймақ қалады. Егер антибиотикке реакция теріс болса, бактериялар тірі қалады. Сұйық қоректік ортаны қолданған жағдайда алдымен әр түрлі сұйылтылған бактериялар дақылымен бірнеше пробирканы дайындаңыз. Бұл пробиркаларға антибиотиктер қосылып, зат пен микроорганизмдердің өзара әрекеттесу процесі күн ішінде байқалады. Соңында жоғары сапалы антибиотикограмма алынады, оның көмегімен белгілі бір дақылға арналған препараттың тиімділігі туралы айтуға болады.
ТАЛДАУДЫҢ НЕГІЗГІ МІНДЕТТЕРІ Зерттеудің бактериологиялық әдісінің мақсаттары мен кезеңдері осында, нүкте бойынша келтірілген. 1. Бактерия колонияларын оқшаулау үшін қолданылатын бастапқы затты алыңыз. Бұл кез-келген заттың, шырышты қабықтың немесе адам мүшесінің қуысының жағындысы, қан анализі болуы мүмкін. 2. Қатты қоректік ортада өсіру мәдениеті. 24-48 сағаттан кейін Петри табақшасында әртүрлі типтегі бактериялардың колонияларын табуға болады. Біз қажеттісін морфологиялық және / немесе биохимиялық критерийлерге сәйкес таңдаймыз және онымен әрі қарай жұмыс жасаймыз. 3. Алынған мәдениеттің көбеюі. Бактериологиялық зерттеу әдісі бактериялар өсіру санын көбейтудің механикалық немесе биологиялық әдісіне негізделуі мүмкін. Бірінші жағдайда бактериялар термостатта көбейіп, жаңа колониялар түзетін қатты немесе сұйық қоректік орталармен жұмыс жүргізіледі. Биологиялық әдіс бактериялар санының көбеюі үшін табиғи жағдайларды қажет етеді, сондықтан мұнда тәжірибелік жануар микроорганизмдермен ауырады. Бірнеше күннен кейін көптеген прокариоттарды қан үлгісінен немесе жағындыдан табуға болады. 4. Тазартылған мәдениетпен жұмыс жасау. Бактериялардың жүйелі орнын, сондай-ақ олардың қоздырғыштарға жатуын анықтау үшін жасушаларға морфологиялық және биохимиялық сипаттамалары бойынша мұқият талдау жүргізу қажет. Микроорганизмдердің патогендік топтарын зерттеу кезінде антибиотиктердің әрекеті қаншалықты тиімді екенін білу маңызды. Бұл бактериологиялық зерттеу әдісінің жалпы сипаттамасы болды.