Учебное пособие no ca 2+ Харьков 2015 Джамеев В. Ю



Pdf көрінісі
бет158/271
Дата07.02.2022
өлшемі4,3 Mb.
#90459
түріУчебное пособие
1   ...   154   155   156   157   158   159   160   161   ...   271
Байланысты:
Dzhameiev - Intracellular signaling of plant

2) внутриклеточные
(intracellular) Ca
2+
-независимые фос-
фолипазы А
2
(iPLA
2
).
У животных обнаружены также 
цитозольные
(cytosolic) 
Ca
2+
-зависимые фосфолипазы А
2
(cPLA
2
).
Секреторные фосфолипазы А
2
обладают низкой молекуляр-
ной массой (14 кД) и проявляют оптимальную активность при 
миллимолярных концентрациях Ca
2+
. Из тканей нескольких ви-
дов растений (рис, гвоздика, вяз) были выделены и клонированы 
кДНК, соответствующие генам секреторных фосфолипаз А
2

фосфо
липаза A
2
+
холин
P
COOH
HO
холин
P
фосфатидилхолин
линоленовая
кислота
1-ацил-2-лизо-
фосфатидилхолин
Рис. 36. 
Реакция, катализируемая фосфолипазой A
2


передача Сигнала Внутри клетки
114
Анализ последовательности этих ДНК показал наличие несколь-
ких дисульфидных связей и сигнального пептида, определяю-
щего секреторные свойства молекулы фермента.
Внутриклеточные фосфолипазы А
2
(iPLA
2
) представляют 
группу, включающую мембраносвязанные и цитозольные фер-
менты с молекулярной массой 40–48 кД. Все известные расти-
тельные iPLA
2
предпочтительно отщепляют линолевую и лино-
леновую группы, находящиеся в
 sn
-2 положении фосфатидил-
холина. Эти ферменты стимулируются кальмодулином, в отсут-
ствии которого не реагируют на изменение концентрации Ca
2+
.
Катализ.
Внутриклеточные и секреторные фосфолипазы А
2
имеют разный механизм действия.
Внутриклеточные фосфолипазы A
2
гидролизуют ацилэфир-
ную связь через образование ацил-ферментного посредника. 
Ацил присоединяется к остатку серина, который находится 
в консенсусной последовательности GXSXG. Ионы Ca
2+
не при-
нимают непосредственного участия в катализе, однако Ca
2+
не-
обходим для кальцинирования кальмодулина — активатора 
фермента.
Секреторные фосфолипазы А
2
непосредственно используют 
ионы Ca
2+
в активации. В молекуле фермента есть консерва-
тивные Ca
2+
-связывающие центры (EF-руки). Связывание каль-
ция стабилизирует переходное состояние молекулы, необходи-
мое для проявления активности. Секреторные фосфолипазы А
2
не имеют GXSXG последовательности и не образуют ацил-фер-
ментного посредника. В механизм катализа sPLA
2
вовлека-
ется остаток гистидина и аспартата, которые поляризуют мо-
лекулу воды, а затем поляризованная Н
2
О атакует карбониль-
ную группу.


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   154   155   156   157   158   159   160   161   ...   271




©engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет