Учебное пособие no ca 2+ Харьков 2015 Джамеев В. Ю
жүктеу/скачать 4,3 Mb. Pdf көрінісі
|
Dzhameiev - Intracellular signaling of plant
| 2) внутриклеточные
(intracellular) Ca 2+ -независимые фос- фолипазы А 2 (iPLA 2 ). У животных обнаружены также цитозольные (cytosolic) Ca 2+ -зависимые фосфолипазы А 2 (cPLA 2 ). Секреторные фосфолипазы А 2 обладают низкой молекуляр- ной массой (14 кД) и проявляют оптимальную активность при миллимолярных концентрациях Ca 2+ . Из тканей нескольких ви- дов растений (рис, гвоздика, вяз) были выделены и клонированы кДНК, соответствующие генам секреторных фосфолипаз А 2 . фосфо липаза A 2 + холин P COOH HO холин P фосфатидилхолин линоленовая кислота 1-ацил-2-лизо- фосфатидилхолин Рис. 36. Реакция, катализируемая фосфолипазой A 2 передача Сигнала Внутри клетки 114 Анализ последовательности этих ДНК показал наличие несколь- ких дисульфидных связей и сигнального пептида, определяю- щего секреторные свойства молекулы фермента. Внутриклеточные фосфолипазы А 2 (iPLA 2 ) представляют группу, включающую мембраносвязанные и цитозольные фер- менты с молекулярной массой 40–48 кД. Все известные расти- тельные iPLA 2 предпочтительно отщепляют линолевую и лино- леновую группы, находящиеся в sn -2 положении фосфатидил- холина. Эти ферменты стимулируются кальмодулином, в отсут- ствии которого не реагируют на изменение концентрации Ca 2+ . Катализ. Внутриклеточные и секреторные фосфолипазы А 2 имеют разный механизм действия. Внутриклеточные фосфолипазы A 2 гидролизуют ацилэфир- ную связь через образование ацил-ферментного посредника. Ацил присоединяется к остатку серина, который находится в консенсусной последовательности GXSXG. Ионы Ca 2+ не при- нимают непосредственного участия в катализе, однако Ca 2+ не- обходим для кальцинирования кальмодулина — активатора фермента. Секреторные фосфолипазы А 2 непосредственно используют ионы Ca 2+ в активации. В молекуле фермента есть консерва- тивные Ca 2+ -связывающие центры (EF-руки). Связывание каль- ция стабилизирует переходное состояние молекулы, необходи- мое для проявления активности. Секреторные фосфолипазы А 2 не имеют GXSXG последовательности и не образуют ацил-фер- ментного посредника. В механизм катализа sPLA 2 вовлека- ется остаток гистидина и аспартата, которые поляризуют мо- лекулу воды, а затем поляризованная Н 2 О атакует карбониль- ную группу. жүктеу/скачать 4,3 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|