Бержанова Р. Ж., Игнатова Л. В., Мұқашева Т. Д., Сыдықбекова Р. К
Агарлы ортаға антибиотиктерді диффузилау әдістері
жүктеу/скачать 0,93 Mb. Pdf көрінісі
|
пособиефизиологияМО
| Агарлы ортаға антибиотиктерді диффузилау әдістері
Диффузияның классикалық әдісі. 20 минут бойы 37 о С температурада кептірілген, жаңа дайындалған ортаға жаңадан өскен дақылдарды егеді. Олар ортаға сіңгеннен соң ойғыш көмегімен ойық шұңқыр (лунка) жасап, ішіне 0,1 мл зерттелетін антимикробтық препарат ерітіндісін құяды. Табақшаларды төңкермеген куйде мұқият термостатқа қояды. 18 сағаттан кейін тест- микробтың өсу аймағының диаметрінің тежелуі бойынша антибиоиктердің белсенділігін анықтайды. Дискілі-диффузиялық әдіс. Петри табақшасындағы агар бетіне белгілі бір тығыздықтағы бактериалды суспензияны (әдетте McFarland бойынша лайланудың эквивалентті стандарты бойынша 0,5) тегістеп жаяды. Дайындалған суспензияның тығыздығы 1-2·10 8 КОЕ/мл Escherichia coli концентрациясына сәйкес болуы тиіс. Бұл концентрация МакФарленд бойынша 0,5 оптикалық тығыздығына сәйкес келеді. Мұндай тығыздықты Л.А. Тарасевич атындағы ГИСК бойынша оптикалық тығыздығы стандартты 5 бірл. болатын бактериалды суспензияны 2 есе сұйылту арқылы алады. Суспензияны дайындап алғаннан кейін 15 минут ішінде газон алу үшін агар бетіне егеді. Осы мақсатта ұстағышта залалсыздандырылған мақта тампондарын қолданады. Тампондарды бір рет бактериалды суспензияға батырып алады да, пробирка ішіндегі сұйықтыққа ақырын қысып тамызады. Кейін тампонды агардың бетіне штрих әдісімен үш реттен жүргізіп егіп шығады, әр кез табақшаны 60 о С бұрып отыру қажет. Соңында сол тампонмен табақшаның қабырғасы бойымен жүргізе отырып, агардың бетіне айналыдра егу жүргізеді. Табақшаларды бөлме температурасында15-20 минут ұстағаннан кейін, залалсыздандырылған анатомиялық қысқышпен ортаның бетіне табақшаның шетінен 2,0-2,5 см қашықтықта 5-6 индикатор дисктерін орналастырады. Диск пен орта арасында ауа қалмас үшін, орнатылған диск қысқыштың басымен ақырын жаншылады. Табақшаларды 30 минуттай бқлме температурасында ұстайды, кейін төңкерілген күйде 18- 24 сағатқа термостатқа қояды. Нәтижелерді сараптау. Дақылдардың сезімталдығы залалсыздандырылған аймақтардың диаметрі мм-мен өлшенгеннен кейін 10 кесте бойынша бағаланады. 10 кесте. Дискілі және реттік сұйылту әдістерімен микроорганизмдердің антибиотиктерге сезімталдығын анықтау нәтижелерін бағалау Антибиотик Дискілер әдісі: өсудің тежелу аймағының диаметрі Сериялық сұйылту әдісі: минимальды ингибирлейтін концентрация мкг/мл Төзімділер Умеренно устойчивые Сезімталдар Устойчивые Чувстви- тельные Бензилпенициллин ≤ 20 21-28 ≥ 29 - ≤ 0.1 Ампициллин ≤ 20 21-28 ≥ 29 - ≤ 0.2 Карбенициллин ≤ 14 15-18 ≥ 19 ≥ 32 ≤ 16 Метициллин ≤ 13 14-18 ≥ 19 - ≤ 3 Оксациллин ≤ 15 16-19 ≥ 20 - ≤ 3 Цефалексин - - - ≥ 32 ≤ 10 Цефалотин ≤ 14 15-18 ≥ 19 ≥ 32 ≤ 10 Стрептомицин ≤ 16 17-19 ≥ 20 ≥ 15 ≤ 6 Неомицин ≤ 12 13-16 ≥ 17 - ≤ 10 Канамицин ≤ 14 15-18 ≥ 19 ≥ 25 ≤ 6 Мономицин ≤ 13 14-17 ≥ 18 - ≤ 10 Гентамицин ≤15 ≥ 16 ≥ 6 ≤ 4 Тетрациклин ≤ 16 17-20 ≥ 22 ≥ 12 ≤ 2 Эритромицин ≤ 17 18-21 ≥ 22 ≥ 8 ≤ 2 Линкомицин ≤ 19 20-23 ≥ 24 ≥ 8 ≤ 2 Левомицетин ≤ 15 16-18 ≥ 19 ≥ 16 ≤ 8 Рифампицин ≤ 12 13-15 ≥ 16 ≥ 8 ≤ 2 Полимиксин ≤ 11 12-14 ≥ 15 ≥ 50 Ед/мл - Ристомицин ≤ 9 10-11 ≥ 12 - ≤ 5 10 кестені пайдалана отырып алынған нәтижелер мен мәліметтерді бағалап, 11 кестеге енгізу керек. 11 кесте. Зерттелген дақылдардың анибиотикке сезімталдығын бағалау № п/п Антибиотик атауы Өсудің тежелу диаметрі (мм) Төзімділері Умеренно устойчивые Сезімталдары 1 2 жүктеу/скачать 0,93 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|