Частная дерматология
жүктеу/скачать 2,86 Mb.
|
Dermatoven ch-2 Doc1
- Бұл бет үшін навигация:
- Микроскопическое исследование
| Диагностика. Поскольку изменения ногтя при онихомикозах хотя и типичны, но не специфичны, при проведении дифференциальной диагностики заболеваний ногтя необходимо прежде всего исключить следующие заболевания: псориаз, экзему, гнездную алопецию, красный плоский лишай, ониходистрофии неясного генеза. Клинический диагноз грибковой инфекции должен подтверждаться микробиологически. Для этого проводят микроскопию и обнаружение гриба или грибковых элементов в пораженных тканях, а затем выделяют возбудителя из ткани ногтя. Для идентификации возбудителя необходим посев на специальные питательные среды (чаще всего на агаре Сабуро).
Диагноз онихомикоза устанавливается на основании клинических проявлений, обнаружения гриба при микроскопическом исследовании патологического материала и выделения культуры гриба на питательных средах. Для успешного исследования необходим правильный сбор патологического материала из очагов поражения. Пораженные участки ногтя следует брать из очагов, которые не подвергались местному лечению. Однако при уже проводимом ранее лечении очаги поражения следует вымыть с мылом или очистить спирто-эфирной смесью и произвести забор материала через 2-3 дня. Перед взятием материала ногти протираются 70о этиловым спиртом. Для взятия материала из пораженных ногтей применяют маникюрные ножницы, препаровальные иглы, скальпели, пинцеты. При часто встречающейся дистальной подногтевой форме онихомикоза грибы располагаются под ногтевой пластинкой. При поверхностной форме онихомикоза соскобы проводят с поверхности ногтевой пластинки. Материалом для исследования должен быть обрезок ногтевой пластинки, соскобы ногтевого ложа и из-под пластинки. Необходимо захватывать и область неизмененного ногтя, так как на границе между пораженным и непораженным участками ногтя располагаются самые активные грибы. При паронихиях производят соскоб из проксимального валика и соприкасающейся поверхности ногтевой пластинки, а при наличии гноя проводят его забор из-под ногтевых валиков. Микроскопическое исследование патологического материала на грибы производят в нативных и окрашенных препаратах. Материал обрабатывают 10-30%-ным раствором КОН (или NaOH), чтобы растворить кератин. На размельченные при помощи скальпеля ногтевые чешуйки наносят 1-2 капли раствора щелочи и осторожно подогревают под пламенем спиртовки до появления нежного белого ободка из кристаллов щелочи по периферии капли, не доводя до кипения. После подогревания каплю накрывают покровным стеклом и оставляют на 30-40 мин для мацерации и просветления. Приготовленные препараты исследуют под световым микроскопом в течение 2 часов с момента приготовления. Чтобы лучше были видны части мицелия плесневых грибов, иногда к раствору КОН добавляют чернила. При микроскопии обнаруживают нитевидные гифы грибов или почкующиеся клетки. При онихомикозе, вызванном красным трихофитоном, под световым микроскопом отмечают многочисленные полиморфные микроконидии, расположенные по обеим сторонам гифы, реже гроздьями; некоторые микроконидии напоминают форму карандаша. Онихомикоз, обусловленный Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale, характеризуется микроскопически следующей картиной: мицелий образует завитки, может иметь форму бамбука; микроконидии грушевидной и овальной формы, макроконидии тупоконечные, септированные. При онихомикозе, вызванном Epidermophyton floccosum, микроскопически видны многочисленные тонко- и гладкостенные, тупоконечные макроконидии с 2-6 перегородками, расположенные в виде гроздьев бананов; микроконидии отсутствуют; ветвящийся мицелий находят не всегда. В ногтевых пластинках, пораженных Candida albicans, при микроскопии видны круглые или овальные почкующиеся дрожжеподобные клетки; наряду с ними постоянно встречаются удлиненные элементы псевдомицелия. При наличии плесневых грибов Scopulariopsis brevicaulis микроскопически выявляются единичные гифы, многочисленные толстостенные споры, имеющие форму лимона. Гифы двух грибов Hendersonula toruloidea и Scуtalidium hуalinum неотличимы друг от друга, но отличаются от гиф дерматофитов большей вариабельностью ширины и гладкой извилистой поверхностью; они имеют двойной контур вследствие отражения цитоплазмы от клеточной стенки гиф. Однако с помощью микроскопии не всегда удается идентифицировать различные микроорганизмы, поэтому наиболее точная идентификация достигается культуральным методом диагностики. Культуральный метод диагностики позволяет иногда выявить возбудителя при отрицательных данных микроскопии. При культивировании материала можно определить род и вид возбудителя, что особенно важно для целенаправленной этиотропной терапии и профилактики заболевания. Исследование ногтевых чешуек проводится стерильной микологической лопаточкой, увлажненной в конденсате среды, чешуйки переносят в пробирку на скошенный сусло-агар в 2-3 точки, прижимая их к поверхности среды. Обычно посев делают в 2-3 пробирки с последующей инкубацией при температуре 28о-37оС до 5 дней. Некоторые плесневые грибы, а также дерматофиты, в культуре вырастают медленно, за 2-3 недели. При описании колоний отмечают такие признаки, как время ее появления, размеры, цвет поверхности и обратной стороны, характер поверхности, форму и край колонии, ее консистенцию и наличие врастания в субстрат. При характеристике колонии указывают ее отличие от типичных штаммов, что важно для оценки полиморфизма данного вида гриба, а также для выявления атипичных штаммов. Культуры гриба Trichophyton rubrum развиваются на 8-10-й день; колонии быстро растут, бархатистые (иногда мучнистые или складчатые); поверхность белая или розовая, обратная сторона пурпурная; пигмент не диффундирует в среду. Культуры гриба Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale (пушистый) развиваются на 5-7-й день; колонии плоские, бархатисто-пушистые, с возрастом – мучнистые, поверхность белая, обратная сторона желто-коричневая. Культуры гриба Epidermophyton floccosum развиваются на 4-5-й день; колонии складчатые, куполообразные, мучнистые, цвет желтый с зеленоватым оттенком, обратная сторона – от желтой до коричневой. Выделение плесневых грибов диагностически значимо только в тех случаях, когда эти грибы получены отдельно, а не вместе с дерматофитами, если они выделены в 5 из 20 культур и если в патологическом материале обнаруживается мицелий этих грибов [M. Englich, 1976]. Довольно часто могут встречаться смешанные инфекции, вызванные дерматофитами вместе с другими грибами. При культивировании материала инфицированных ногтей рост грибов зачастую отсутствует. До 30% ногтевого материала, заведомо инфицированного дерматофитами, могут давать отрицательный результат при культуральном исследовании. При отрицательном микроскопическом и культуральном исследованиях на грибы следует рассмотреть возможность о наличии других заболеваний, протекающих под маской онихомикоза. жүктеу/скачать 2,86 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|