Курс лекций по микробиологии пятигорск, 2008 часть общая микробиология Лекция №1

1. Микроскопические методы применяют для обнаружения грибов непосредственно в патологическом материале с помощью нативных и окрашенных мазков.

Нативные препараты (соскобы кожи, кусочки волос, ногтей) после обработки 10-30 %-ными растворами КОН или NaOH помещают в каплю глицерина на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и микроскопиуют, изучают строение гриба.

Для окраски мазков используют методы Грамма, Циля-Нильсена, Романовского-Гимзе, Сабуро, Адамсона и др. Микроскопическая диагностика микозов считается достаточно надёжной. Этот метод является основным в диагностике дерматомикозов.

Для выявления грибковых Аг в гистологических препаратах широко используется РИФ.

2. Микологические методы направлены на выделение чистой культуры гриба и её идентификацию по комплексу признаков. Для культивирования используют плотные и жидкие питательные среды (Сабуро, сусло-агар, Чапека и др.), инкубируют при 22-28-37° до 3-4 недель. Микологические исследования проводят при диагностике кандидозов и глубоких микозов.

3. Серологические методы используют для обнаружения антител в сыворотке больного в РА, РП, РНГА, РСК, РИФ и др. с грибковыми антигенами. Эти методы используют в диагностике глубоких микозов, аспергиллёза и кандидоза.

4. Аллергические пробы в диагностике микозов бывают 2-х типов:

1) in vivo – ставят путём внутрикожного введения соответствующих аллергенов.

2) in vitro: а) выявление ГНТ – гиперчувствительности немедленного типа – по тесту дегрануляции тканевых и сывороточных базофилов; б) выявление ГЗТ – гиперчувствительности замедленного типа – по реакции торможения миграции лейкоцитов, бластной трансформации лимфоцитов.

Аллергические пробы в постановке in vitro обладают преимуществом по сравнению с кожными пробами благодаря их полной безопасности для больного.

Аллергические реакции более выражены при глубоких микозах, слабее – при поверхностных или очаговых поражениях кожи и слизистых .

5. Биопроба основана на заражении животных патологическим материалом или культурами грибов. Метод используют для выделения чистой культуры возбудителя, изучения его патогенности, иммуногенности и эффективности новых антимикотиков.

6. Гистологическое исследование основано на приготовлении гистологических препаратов и поражённых тканей. Метод позволяет изучить морфологию возбудителя и особенности патологического процесса, им вызванного.

7. Метод гибридизации нуклеиновых кислот ( новый метод ) основан на идентификации РНК грибов с помощью одноцепочной молекулы ДНК, меченной флюоресцеином. Метод разработан для определения основных возбудителей системных микозов ( бласто – крипто – кокцидиоидомикозов , а также гистоплазмоза )