Орындаған: bg-04К (генетика 4-топ) Қабылдаған: Алтыбаева Н



бет2/8
Дата03.12.2022
өлшемі0,99 Mb.
#161036
1   2   3   4   5   6   7   8
Байланысты:
Презентация биохим (копия) (копия) (копия) (копия) (копия) (копия)

Ол үшін олар Southern blotting немесе Southern transfer деп аталатын процедураны қолданады, оны ойлап тапқан ғалымның атымен аталады (Эдвин Саутерн). Бастапқыда электрофорез көмегімен ДНҚ фрагменттерінің қоспасы бөлінеді. Гельдің үстіне нитроцеллюлоза немесе нейлон парағы қойылады, ал бөлінген ДНҚ фрагменттері оны тазарту арқылы беріледі: гель капилляр арқылы гель мен нитроцеллюлоза арқылы өтетін сілті ерітіндісі бар ваннадағы губканың үстінде жатыр. үстіне бүктелген қағаз сүлгілердің әсері. Ағып кету кезінде сілті ДНҚ денатурациясын тудырады және қазірдің өзінде бір тізбекті фрагменттер нитроцеллюлоза пластинкасының бетіне ауысады және сонда бекітіледі. Нитроцеллюлоза парағы гельден мұқият жойылады және қажетті ДНҚ тізбегіне тән радиоактивті таңбаланған ДНҚ зондымен өңделеді. Нитроцеллюлозаның парағында тек нитроцеллюлозадағы ДНҚ-мен будандасатын үлгі молекулалары ғана қалуы үшін мұқият жуылады. Авторадиографиядан кейін зонд будандастырылған ДНҚ фотопластинада жолақтар түрінде көрінеді.

  • Ол үшін олар Southern blotting немесе Southern transfer деп аталатын процедураны қолданады, оны ойлап тапқан ғалымның атымен аталады (Эдвин Саутерн). Бастапқыда электрофорез көмегімен ДНҚ фрагменттерінің қоспасы бөлінеді. Гельдің үстіне нитроцеллюлоза немесе нейлон парағы қойылады, ал бөлінген ДНҚ фрагменттері оны тазарту арқылы беріледі: гель капилляр арқылы гель мен нитроцеллюлоза арқылы өтетін сілті ерітіндісі бар ваннадағы губканың үстінде жатыр. үстіне бүктелген қағаз сүлгілердің әсері. Ағып кету кезінде сілті ДНҚ денатурациясын тудырады және қазірдің өзінде бір тізбекті фрагменттер нитроцеллюлоза пластинкасының бетіне ауысады және сонда бекітіледі. Нитроцеллюлоза парағы гельден мұқият жойылады және қажетті ДНҚ тізбегіне тән радиоактивті таңбаланған ДНҚ зондымен өңделеді. Нитроцеллюлозаның парағында тек нитроцеллюлозадағы ДНҚ-мен будандасатын үлгі молекулалары ғана қалуы үшін мұқият жуылады. Авторадиографиядан кейін зонд будандастырылған ДНҚ фотопластинада жолақтар түрінде көрінеді.

Арнайы РНҚ тізбегін анықтау үшін осы әдістеменің бейімделуі Southern Blotting, Northern Blotting (Northern Blotting: Southern ағылшын тілінде «оңтүстік» дегенді білдіреді, солтүстік «солтүстік» дегенді білдіреді) айырмашылығы деп аталады. Бұл жағдайда электрофорез мРНҚ молекулалары бар гельде жүргізіледі және зонд ретінде бір тізбекті ДНҚ немесе РНҚ молекуласы таңдалады.


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7   8




©engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет