Монография под редакцией А. Л. Хохлова, Н. В. Пятигорской Отделение медицинских наук ббк 2. П86

ботки образцов используются осаждение белков, жидкостно-жидкостная 
(ЖЖЭ) и твердофазная экстракция (ТФЭ). Депротеинизация биологической 
жидкости органическим растворителем является наиболее простым и экс-
прессным способом. Если при её применении удаётся достичь требуемого 
уровня чувствительности, селективности и воспроизводимости аналитиче-
ского сигнала (нивелировать эффект матрицы), то более трудоёмкие спосо-
бы апробировать нецелесообразно. 
После выбора условий подготовки проб и хромато-масс-спектрометри-
ческого детектирования переходят к валидации методики. Требования к 
данному этапу строго регламентированы нормативной документацией: Ре-
шением Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 года 
№85 «Об утверждении Правил проведения исследований биоэквивалентно-
сти лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического со-
юза» (Приложение №6) [111], Руководствами ЕМА [321] и FDA [308]. При 
этом оценивают следующие параметры биоаналитических методик: селек-
тивность, линейность, правильность и прецизионность, эффект матрицы, 
эффект разведения образца, перенос аналита и внутреннего стандарта из 
предыдущей пробы, стабильность аналита в образцах биологической жид-
кости и в стандартном растворе. Если разработанная методика отвечает 
всем установленным критериям приемлемости, сотрудники лаборатории 
составляют инструкции по отбору и хранению образцов для клинического 
центра. В них указывается выбранный антикоагулянт, максимальное время 
от забора крови до центрифугирования и заморозки, порядок приготовления 
и добавления раствора стабилизатора (если используется), необходимость в 
специальных условиях освещения, температурный режим хранения. Следу-
ет отметить, что разработка и валидация биоаналитической методики про-
водится заблаговременно до начала клинических исследований [212, 213]. 
Клинический этап исследования биоэквивалентности начинается со 
скрининга добровольцев на соответствие критериям включения/невключе-
ния. Испытуемые проходят ознакомление с информационным листком па-
циента и подписывают информированное согласие. Далее каждому отобран-
ному участнику присваивается рандомизационный номер, определяющий 
последовательность приёма тестируемого и референтного препарата. Для 
проведения каждого этапа исследования добровольцы госпитализируются 
в клинический центр. Там перед приёмом препарата проводится физикаль-
ный осмотр и устанавливается катетер для отбора образцов (как правило, 
в кубитальную вену). После приёма одной дозы лекарственного препарата 
через установленные промежутки времени начинают забор образцов крови 
в пробирки с выбранным заранее антикоагулянтом или активатором свёр-
тывания. Далее данные образцы подвергают обработке согласно предостав-
ленной сотрудниками биоаналитической лаборатории инструкции. Затем 
пробирки с пробами замораживают до температуры не выше минус 20°С 
или ниже. После окончания отбора образцов крови добровольцы проходят 
заключительный осмотр и выписывают домой. Следующий этап начинает-
ся после завершения периода отмывки [213]. 
Для начала биоаналитического этапа пробы в термоконтейнерах в за-
мороженном виде доставляют из клинического центра в лабораторию. 

жүктеу/скачать 3,82 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: