Пцр. Полимеразды тізбекті реакция. Днқ клондау әдісі. Днқ секвенирлеу әдісі. Электрофоретикалық әдіс
жүктеу/скачать 22,55 Mb.
|
Мейрманова А Биология ПЦР
- Бұл бет үшін навигация:
- Электрофоретикалық әдіс Рестриктеуші ферменттер
- Әртүрлі ДНҚ фрагменттерімен манипуляциялау кезінде
- Гельдегі ДНҚ
- ДНҚ жіптерін бір-бірінен бөлуге
| Фрагмент митохондриальн ой ДНК
Анна Мэнехен Ц Ц Т Т Ц Т Карл Маучер (племянник Мэнехен) Ц Ц Т Т Ц Т герцог Эдинбургский (племянник Александры) Т Т Ц Ц Т Ц Сондықтан митохондриялық ДНҚ-ның қысқа фрагментінің тізбегі туралы алынған молекулалық-генетикалық деректерге сүйене отырып, Анна Манеханның Анастасия ханшайымы емес екенін анық айтуға болады. Осылайша, соңғы жылдары жоғарыда талқыланған гендік саусақ ізін алу және ДНҚ нуклеотидтер тізбегін секвенирлеудің әзірленген технологиялары мен әдістері кеңінен қол жетімді болды және тек молекулалық генетикада және басқа да биологиялық ғылымдарда ғана емес, сонымен қатар сот сараптамасы сияқты практикалық салаларда да сәтті қолданылуда. медицина, санитарлық эпидемиология. Электрофоретикалық әдіс Рестриктеуші ферменттер жиынтығының көмегімен зерттеушілер кез келген түрден дерлік әртүрлі көлемдегі ДНҚ фрагменттерін алуды үйренді. Әртүрлі ДНҚ фрагменттерімен манипуляциялау кезінде көбінесе мөлшерін анықтау немесе қоспадан белгілі бір ДНҚ фрагментін бөліп алу қажет. ДНҚ фрагменттері агарозды гель электрофорезі арқылы оңай бөлінеді екен. Бір немесе бірнеше рестрикциялық ферменттермен өңделген ДНҚ электрофорезге арналған арнайы камераға орналастырылған мұздатылған агароздық гель ұңғымаларына орналастырылады. Камерада электр өрісі пайда болады, оның әсерінен ДНҚ фрагменттері кеуекті, мармелад тәрізді гельде қозғала бастайды. Агарозды гельдегі ДНҚ электрофорезіне арналған камераның схемалық көрінісі. Оң жақта этидий бромидімен боялған және УК сәулесінің астында орналастырылған ДНҚ фрагменттерінің электроферограммасы. (М – маркерлер, 1,2,3 – бір ДНҚ үлгілері, әртүрлі рестритазалармен кесілген). Гельдегі ДНҚ фрагменттерінің қозғалу жылдамдығы олардың ұзындығына байланысты. Қысқа фрагменттер ұзынға қарағанда жылдамырақ қозғалады. Бұл әртүрлі ұзындықтағы ДНҚ жіптерін бір-бірінен бөлуге мүмкіндік береді. Бұл жағдайда ДНҚ фрагменттері зақымданбайды және оларды гельден ешқандай зақымсыз және биологиялық қасиеттерін жоғалтпай бөліп алуға болады. Егер электрофорезден кейін гельді ДНҚ-мен байланыстыратын арнайы этидиум бромид бояуымен бояса және гель ультракүлгін сәуленің астына қойылса, онда бір-бірінен әртүрлі қашықтықта орналасқан, қызыл түске боялған жарқыраған ДНҚ фракциялары анық көрінеді. Әрбір осындай фракция бір ДНҚ фрагментіне сәйкес келеді. Әртүрлі рестритазалар бір ДНҚ-ның әртүрлі бөліну заңдылықтарын береді. Осылайша, агарозды гель электрофорезі кез келген шектеуші ДНҚ фрагменттерін кейіннен пайдалану үшін таза түрде оңай бөліп алуға және одан кейін оңай экстракциялауға мүмкіндік береді. Агарозды гельді электрофорез әдісі жүктеу/скачать 22,55 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|