Метод Циля-Нельсона
Цель применения
|
Для дифференцирования кислотоустойчивых бактерий от некислотоустойчивых, к которым относятся подавляющее число микроорганизмов.
|
Реактивы:
Красящие растворы
|
1. Карболовый фуксон
2. Метиленовый синий
|
Протрава
|
Подогревание препарата с краской
|
Дифференцирующее вещество
|
5% H2SO4
|
Способ фиксации, состав фиксатора
|
В пламени горелки
|
Этапы окраски
|
Окрасить мазок карболовым фуксином при подогревании (три раза до появления паров – примерно 3 минуты)
Промыть водой
Обесцветить препарат 5% H2SO4
Промыть водой
Докрасить мазок контрастной краской – метиленовым синим (5 минут)
Промыть водой. Высушить.
|
Сущность метода
|
Кислотоустойчивость зависит от наличия в клеточной стенке липидов, воска и особенно миколовой кислоты. Кислотоустойчивые бактерии требуют интенсивной окраски (конц. фуксином Циля при нагревании), они прочно удерживают краситель, не обесцвечиваются серной кислотой и остаются рубиново-красными. Некислотоустойчивые при дифференцировке серной кислотой обесцвечиваются и докрашиваются метиленовым синим.
|
Результат: описание микроскопической картины
|
В поле зрения видны небольшие палочки рубиново-красного цвета (Mycobacteriumtuberculosis) и окрасившиеся в дополнительный синий цвет некислотоустойчивые стафилококки.
|
