А. Д. Нурахова, Л. Т. Ералиева клиникалық лабараториялық диагностика бойынша ұлттық Әдістеме

Гепатит А вирустық РНҚ (HAV RNA) анықтау - плазмада ПТР арқылы гепатит А вирусының геномын сапалы анықтау. Анықталған фрагмент - гепатит А вирусының құрылымдық ақуызының бірегей ген тізбегі, анықтаудың ерекшелігі - 98%. Өңделетін 5 мкл үлгідегі кемінде 80 вирустық бөлшектерді анықтаудың сезімталдығы (РНҚ оқшаулауы).

Арнайы дайындық қажет емес. Материал веноздық қан болып табылады, ол + 40 ° C кезінде 24 сағаттан артық сақталуы керек. Зерттеу мерзімі - 4 жұмыс күні.
Талдау көрсеткіштері:

1. Вирусты гепатиттің клиникалық белгілері;

2. Холестаз;

3. АлАТ және АсАТ деңгейін жоғарылауы;

4. Вирусты гепатит А науқасымен байланысқа түскендер;

5. Аурудың (балалар тобындағы) А гепатитімен науқаспен байланысқа түскен және ауырғындарды анықтау.

Гепатит А вирусына қарсы IgM антиденелерін анықтау А гепатитінің жедел кезеңіне тән. Бұл аурудың клиникалық белгілері В және С гепатитінің көріністеріне ұқсас. Мұндай жағдайларда HAV-Ig M антивирустық анықтамасы бар серологиялық сынақтар дұрыс диагнозды белгілеуге көмектеседі. Ig M класының антиденелері бірінші клиникалық симптомдар пайда болғанға дейін 5-тен 10 күнге дейін ерекшелене бастайды және әрдайым клиникалық симптомдардың басталуымен анықталады, бір ай ішінде шоғырлану шыңына жетеді, 3 айдан 6 айға дейін қаннан анықталады және анықталмаған деңгейге дейін жыл ішінде төмендейді.

Антиденелер сапалық әдіспен анықталады - фермент иммуноанализі және Axsym аппараты арқылы. Арнайы дайындық қажет емес. Зерттеу материалы - қан сарысуы. Зерттеу мерзімі 1 жұмыс күні.

Талдау көрсеткіштері:

1. Вирусты гепатиттің клиникалық белгілері;

2. Инфекция ошақтарында байланысқан тұлғаларды тексеру және А гепатиті бар адамдарды анықтау.

Оң нәтиже жедел немесе жақында өткерген А гепатитін көрсетеді.
Гепатит А вирусына Ig M және G класының жалпы антиденелері

Гепатит А вирусына IgM және G класының антиденелерін анықтау, осы вируспен берілген немесе ағымды инфекцияны көрсетеді.

Гепатит А вирусына жалпы антиденелерді анықтауға арналған тест А гепатитінің өткір сатысында да оң нәтиже береді. IgG класының антиденелері өмір бойы сақталып, гепатит А вирусына қарсы иммунитетті қамтамасыз етеді. HAV (жалпы) антиденелерінің болуы ауруды басынан өткергенді көрсетеді немесе вирустық гепатит А вирусын жұқтыру, сондай-ақ гепатит А вакцинасиясын.

Антиденелер Axsym аппаратында анықталады - бұл сапалы сынақ. Арнайы дайындық қажет емес. Зерттеу материалы - қан сарысуы. Зерттеу мерзімі 1 жұмыс күні.

Оң нәтиже жедел немесе жақында берілген А гепатитін көрсетеді.
Талдау көрсеткіштері:

1. гепатит А вирусына алдын-ала әсер етуі және иммунитеттің болуы;

2. Эпидемиологиялық зерттеулер;

Оң нәтижелі гепатит А-ға қарсы вакцинаны немесе жалғасып жатқан ауруды немесе бұрын басынан өткергенін көрсетеді.

Вирусты гепатит B - бауырдың қабынуымен жүретін, Hepadnaviridae тобының ДНК вирусы.

В вирустық гепатиттерін берілу жолы - парентералды болып табылады (инфекцияланған қанның құйылуы нәтижесінде ластанған иненің, шприцтерді және басқа да медициналық құралдарды пайдалану), жыныстық түрде, сондай-ақ жұқтырған анасынан балаға (вертикальді) - жүктіліктің ең қауіпті үшінші триместері. В гепатитінің вирусының инфекциялық негізгі көзі науқастың қаны болып табылады.

Инкубация кезеңі патогеннің дозасына байланысты өзгереді, орташа алғанда 70 күн. Жедел гепатит B 10-15% жағдайларда созылмалы болып шығады.

В гепатиті вирусының қабығы мен нуклеокапсид тұрады. Құрамында беттік антиген (HBsAg) бар. Нуклеокапсид ядролық (негізгі) антиген (HBcAg) және антигенді «e» (HBeAg), сонымен қатар вирустық энзимдер мен ДНҚ бар.

В гепатитінің белсенді алдын-алу вакцинация арқылы жүргізіледі.

Гепатит В-вирусы: сапалы ДНҚ-сын (HBV-ДНҚ) анықтау.

ПТР арқылы гепатит В вирусының ДНҚ-ны сапалы анықтау. Анықталған фрагмент - гепатит В вирусының құрылымдық ақуыз генінің бірегей ДНҚ тізбегі, анықтаудың ерекшелігі - 98%. Анықтау сезімталдығы 5 мкл өңделген (ДНҚ оқшауланған) үлгісіндегі 80 вирустық бөлшектерден кем емес.
Зерттеу кезеңі: 1-3 жұмыс күні.

Зерттеуге дайындық: бос асқазанға талдау жүргізу қажет.

Тестілік материал: қан сарысуы.

Талдау көрсеткіштері:

1. Превентивті скринингтік тесттер (вирус ДНҚ - жедел инфекцияға арналған ең алғашқы маркер);

2. HBsAg-теріс инфекциясы бар зерттеулер;

3. Байланыс тұлғаларының сауалнамасы;

4. аралас этиологияның гепатитін диагностикалау - жетекші вирустың идентификациясы;

5. созылмалы жағдайда вирустық белсенді репликация кезеңін анықтау;

6. Терапияны бақылау;

7. Бауыр циррозы;

8. Әлсіздік, шаршау, тәбеттің жоғалуы, жүрек айнуы, бауырдың ұлғаюы және бұлшықеттер мен буындардағы ауырсыну;

9. сарғаю, терінің қышуы, көкбауырдың ұлғаюы, тамырлы өрмекшілер, кейбір жағдайларда алақан мен аяғының қызаруы.

Маркердің болуы гепатит В вирусымен инфекцияланғанын көрсетеді.

ПТР арқылы гепатит В вирусының ДНҚ-ны сандық анықтау. Анықталған фрагмент - гепатит В вирусының құрылымдық ақуыз генінің бірегей ДНҚ тізбегі, анықтаудың ерекшелігі - 98%. Анықтау сезімталдығы 2x105 МЕ / мл 5x103 көшірме / мл сарысудағы вирустық бөлшектерден тұрады.

Вирусты гепатиттің ДНК мазмұны сандық сипаттамасы вирусқа қарсы терапияның тиімділігін бағалау үшін маңызды болып табылады және созылмалы гепатит B анықтау болжамды маңызы бар: Виремия бастапқыда төмен деңгейі (ДНК HBV дегенде 2x105 көшірмелері / мл (2x105 ХБ / мл)) пайыздық созылмалық жедел гепатит B нөлге жақын . ДНК HBV шоғырлануы 2x105 көшірмелерін / мл (2x105 ХБ / мл) түскен 2x106 көшірмелерін / мл (8h105 ХБ / мл) chronization процесі 25 байқалады кезде - науқастардың 30%, бірақ науқастың Виремия жоғары деңгейде (астам 2x106 көшірмелері / мл (бар өткір гепатит 8h105 ХБ / мл)) жиі созылмалыға айналады.
Зерттеу кезеңі: 2-3 жұмыс күні.

Зерттеуге дайындық: бос асқазанға талдау жүргізу қажет.

Зерттелген материал: веноздық қан. Ең ақпараттылық материал - бауыр биопсиясы. Материалды +4 сағаттан + 80С-ге дейін 24 сағаттан артық сақтау керек.

Талдау көрсеткіштері:

1. Қан сарысуындағы гепатит В-вирусының ДНҚ-ның болуының оң сапалық сынағы;

2. Пациенттерді емдеу тактикасын анықтау;

3. Емдеу тиімділігін дәл бағалау.
Вирусты гепатитінің HBs антигені (HBs антигені, гепатит В беткей антигені, «австралиялық» антигені)

В гепатитінің вирусының негізгі маркері.

Бұл аурудың инкубациялық кезеңінде пайда болған В гепатитінің ең алғашқы маркері, қан ферменттерінің деңгейінің жоғарлауы. Вирус жұқтырған жасушадағы ядролық компоненттер мен вирустық конверттің құрылымдарын синтездеу теңгерімсіздікті жалғастыра алады, бұл ретте конверттің белоктарының ұлғаюы мүмкін. Демек, HBsAg-ның инфекцияға ұшыраған науқастардағы қанының мазмұны кеңінен өзгереді және жиі өте жоғары деңгейге жетеді.

HbsAg қанның құрамында бар не жоқтығын тексеру, B гепатитінің диагнозын растау үшін, осы ауруымен ауыратын науқастардың жағдайын бақылау үшін (яғни, созылмалы тасымалдаудың қалпына келуін немесе өтпеуін анықтау үшін), Донорлық қан мен қан өнімдерін зерттеу үшін HbsAg тексеру, реципиентке берілмеу үшін.

Мерзімі: ИФА - 1-3 күн; Aхsym - 1 күн.

Зерттеуге дайындық: бос асқазанға қан алу керек.

Зерттеу материал: қан сарысуы.

Талдау жүргізу көрсеткіштері:

1. АлАТжәне AсAТ деңгейін жоғарылату;

2. Жедел немесе созылмалы вирустық гепатиттің клиникалық белгілері, бауырдың және өт жолдарының созылмалы аурулары;

3. Байланысқан тұлғаларды тексеру - отбасында, командада;

4. Вакцинацияға дайындық;

5. Парентеральді манипуляция жиі қолданылатын пациенттерді тексеру;

6. Госпитализацияға, хирургияға дайындалу;

7. Жүктілік және жүктілікті жоспарлау;

8. Донорларды, тәуекел тобынан келген адамдарды (денсаулық сақтау қызметкерлері, HBsAg тасымалдаушылардың аналарынан) алдын-ала скрининг;

9. қорғалмаған секс, жыныстық серіктестердің жиі өзгеруі;

10. Нашқорлық.
Нәтижелерді интерпретациялау: HBsAg болмаған кезде жауап «теріс». HBsAg сарысуда анықталған кезде иммуноингибирленген және аралас сынақтар HBsAg қайта анықтауды қоса, қосымша растаушы зерттеу жүргізіледі. Негізгі оң нәтиже расталса, HBsAg жауапы «оң», HBsAg (растау) - «оң». Сирек жағдайларда, растау сынағын өткізген кезде, иммуноинципиімді үлгілеу оң нәтиженің ерекшелігін растайды. Мұндай жағдайларда HBsAg жауап береді: «нәтиже қайталама оң, расталмаған».
Оң нәтиже:

1. жедел В гепатиті - инкубация немесе шынайы кезеңдер;

2. В гепатитінің вирусын тасымалдау;

3. Созылмалы гепатит B.

Теріс нәтиже:

1. B гепатиті (В гепатитінің оң анти-HBs маркерлері болмаған жағдайда);

2. anti-HBs-маркері оң болған кезде: жедел В гепатиті алынып тасталмайды (қалпына келтіру кезеңі);

3. Созылмалы гепатиттің төменгі репликация қарқындылығын жою мүмкін еместігі;

4. Сирек: В гепатитінің найзағай тәрізді, қатерлі ағымда; Гепатит B ақаулы (серонегативті) HBs антигені бар.
Гепатиттің вирусының антигеніне IgM және Ig G класының жалпы антиденелері.

В гепатитінің вирусына қарсы қорғаныштық иммунитеттің болуы көрсеткіші.

HBsAg жоғалып кеткеннен кейін ұзақ мерзімді кезеңде жедел В гепатиті бар науқастардың көпшілігінде анти-HBs антиденелері табылған. Бұл айырмашылықтың ұзақтығы әдетте 3-4 айға дейін, иммундық мәртебенің сипаттамасына және науқастың иммундық әрекеттерінің әрекетіне байланысты өзгереді. Пациенттердің аз ғана бөлігі тек HBsAg-мен созылмалы В-вирусты гепатитінде антидененің бұл түрін көрсетеді.
Референсті мәндер: <10 ед / мл.

аnti-HBs-антител деңгейін анықтау инфекциялық процестің бағытын және оның нәтижесін бағалау үшін қолданылады (гепатиттің вирусына қарсы қорғау иммунитетінің даму критерийі ретінде).

аnti-HBs-антител титрі өте сирек және біртіндеп анықталмаған концентрацияға дейін бірте-бірте азаяды, ал кейбір адамдарда анти-HBs антиденелері өмір бойы сақталуы мүмкін. Скринингтік зерттеулерге қарсы антибактериалды антиденелерді анықтау гепатит В-вирусымен өткен инфекцияны растайды.В гепатитімен ауырғаннан кейінгі 10-15% -да және HBs антигендерінің жойылуынан бірнеше жыл өткен соң, анти-HBs антиденелерін анықтау мүмкін емес.
Анықтау әдісі: ферменттік иммундық әдіс, Ахсум.

Мерзімі: ИФА - 1-3 күн; Ахусм - 1 күн.

Зерттеуге дайындық: талап етілмейді.

Тестілік материал: қан сарысуы.

HBs антиденелерінің минималды қорғаныш деңгейі және қайта вакциналауға ұсынылатын уақыт 43-кестеде көрсетілген.
43-кесте
аnti-HBs-антиденелердің минимальді деңгейі және қайта вакцинациялаудың ұсынылған мерзімдері