Показания к применению: для лабораторной диагностики бруцеллеза сельскохозяйственных животных в серологических исследованиях.
Дозы: на одну пробу в РА – 0,1 см3 ; в РСК/РДСК – 0,005 см3
Постановка реакции агглютинации (РА) Реакцию ставят в объеме 1,0 см3 в чистых стеклянных пробирках в четырех разведениях. При массовых исследованиях сыворотки разливают в две пробирки в дозах 0,02 и 0,01 мл, затем в каждую пробирку добавляют по 0,5 мл антигена, разведенного соответствующим раствором хлорида натрия в соотношении 1: 10. При каждой постановке реакции одновременно с испытуемыми пробами ставят контроли: с негативной сывороткой крови животных в тех же разведениях, как испытуемые; с позитивной бруцеллезной сывороткой в разведениях до ее предельного титра. После добавления единого антигена, штатив помещают в термостат при температуре 37-38 ˚С на 16-20 ч, затем выдерживают при комнатной температуре в течение 20 мин, после чего проводят учет реакции.
Постановка и учет реакции длительного связывания комплемента (РСК/РДСК).
Сыворотки исследуют в разведениях 1:5 и 1:10 с антигеном и 1:5 без антигена, при массовом исследовании реакцию проводят в одной пробирке в разведении сыворотки 1:5 с антигеном. Одновременно разливают сыворотки для титрования гемолитической системы. Необходимые разведения сывороток готовят в порядке, как указано выше. Инактивирование разведенных сывороток крови проводят при 62-64 °С. Комплемент применяют в рабочем разведении 1:25 или 1:30 (при титре в гемсистеме, указанном биопредприятием - 0,19 - 0,22). Оценка результатов реакции проводится по степени задержки гемолиза эритроцитов, выраженной «в крестах». Реакцию считают положительной, если в обеих пробирках с антигеном будет задержка гемолиза эритроцитов не менее (++) в каждой пробирке, или более выраженная (+++ или #). К сомнительным относят такие реакции, когда задержка гемолиза эритроцитов будет менее выражена (например ++ в одной из пробирок и + в другой). Сомнительно реагирующих животных исследуют повторно через три недели. К отрицательным реакциям относят такие реакции, когда во всех пробирках наступает полный гемолиз эритроцитов.
Срок годности: препарат пригоден для применения в течение 12-ти месяцев со дня изготовления, при условии его хранения в сухом, темном месте при температуре +4+8 0С.
Достарыңызбен бөлісу: |