Монография под редакцией А. Л. Хохлова, Н. В. Пятигорской Отделение медицинских наук ббк 2. П86

держание в плазме будет незначительным. Поэтому количественное опре-
деление данных соединений проводят в крови. У некоторых ЛП, например, 
лерканидипина, исследование проводят в сыворотке крови [355]. 
Оценка опубликованных значений фармакокинетических параметров не-
обходима для выбора временных точек забора образцов, а также продолжи-
тельности отмывочного периода. В фазе абсорбции действующего вещества 
отбор проб проводят в не менее 3 точках. Вблизи предполагаемого времени 
достижения максимальной концентрации следует выполнять как можно бо-
лее частый отбор биологических жидкостей. В терминальной части фарма-
кокинетической кривой должно быть не менее 3–1 точек с ненулевыми кон-
центрациями определяемого соединения для расчёта константы элиминации 
(K
el
), связанных с ней фармакокинетических констант: площади под кривой 
«концентрация – время» с момента приема лекарственного препарата до бес-
конечности (AUC
0–
∝
), период полувыведения (Т
1/2
), среднее резистентное вре-
мя (MRT). Продолжительность пробоотбора для препаратов с немедленным 
высвобождением, как правило, не превышает 72 часов. Соотношение пара-
метров AUC
0–t
/AUC0
0–
∝
при этом должно быть не менее 80%. Следует преду-
смотреть, чтобы длительность отмывочного периода превышала 5–6 пери-
одов полувыведения. Это предотвратит появление действующего вещества 
или его метаболитов в нулевой пробе последующих периода (эффект перено-
са), и исключение результатов данного добровольца из расчётов [213]. 
После анализа данных литературы и выбора нужного дизайна составля-
ется протокол исследования БЭ. Перед проведением КИ протокол необходи-
мо передать в Министерство здравоохранения для разрешения. Там прово-
дится экспертиза данного документа, а также этическая экспертиза. 
Планирование биоаналитической части исследования начинается с вы-
бора аналитического диапазона методики: нижний предел количественно-
го определения устанавливается на уровне не менее 5% от наименьшего 
опубликованного значения C
max
лекарственного препарата. Также при изу-
чении данных литературы следует обращать внимание на наличие у анали-
та нестабильных функциональных групп, а также метаболитов, способных 
переходить в процессе хранения или выполнения анализа в исходное со-
единение (глюкурониды и другие коньюгаты, N-оксиды, сложные эфиры, 
лактоны) [210–212, 370, 401]. 
В настоящее время основным методом количественного определения ЛВ 
и их метаболитов в биологических матрицах является высокоэффективная 
жидкостная хроматография с тандемным масс-спектрометрическим детек-
тированием (ВЭЖХ-МС/МС) [212, 213]. На начальном этапе разработки 
биоаналитической методики производят оптимизацию условий масс-спек-
трометрического детектирования изучаемых веществ. Затем выбирают па-
раметры хроматографического разделения аналита и внутреннего стандар-
та (ВС): хроматографическую колонку, состав подвижной фазы, программу 
элюирования. При применении ВС, меченных стабильными изотопами, 
дополнительная коррекция условий сепарации не требуется, так как их 
структура сходна с определяемым веществом. Далее переходят к подбору 
метода подготовки проб. При биоаналитических исследованиях для обра-
198

жүктеу/скачать 3,82 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: