Лекция №4 Биофармацевтическая оценка качества мягких лекарственных форм. Методы " in vitro "
жүктеу/скачать 277 Kb.
|
Lekciya 8
|
Лекция № 4 «Биофармацевтическая оценка качества мягких лекарственных форм. Методы “in vitro” для определения биологической доступности. Факторы, влияющие на высвобождение АФИ из мазей и суппозиториев». Цели лекции: 1. Обучающая - сформировать знания по основополагающим понятиям биофармации, как науки по теоретической основе разработки и стандартизации лекарственных препаратов; 2. Развивающая - расширить кругозор обучающихся на основе интеграции знаний, развивать логическое мышление; 3. Воспитательная - содействовать формированию у обучающихся устойчивого интереса к изучению вариативной дисциплины «Биофармация». 1. Факторы, влияющие на высвобождение лекарственных веществ из мазей и суппозиториев. Основными факторами для суппозиториев и мазей являются: - свойства лекарственного вещества (размер частиц); - природа формообразующего вещества и вспомогательных компонентов; - способ введения лекарственного вещества в основу; Среди факторов, влияющих на высвобождение лекарственных веществ в мазях, наибольшее внимание уделяют основе. Такие, обычно применяющиеся вспомогательные вещества, как желатин, крахмалы, полиэтиленоксиды, производные целлюлозы, неионоактивные ПАВ способны вступать в реакции взаимодействия (комплексообразование) с лекарственными веществами самой различной природы, образуя соединения, характеризующиеся иными, чем исходные вещества, свойствами. Влияние типа основы различно в зависимости от способа введения лекарственного вещества. Установлено, например, что кислота борная не оказывает бактериостатического действия при использовании жировых основ (тип – суспензия), но эффективна при изготовлении мазей на гидрофильных основах, в которых содержится большое количество воды (тип - раствор). По-видимому, терапевтическое действие проявляет образующийся раствор кислоты борной. Йод, напротив, малоактивен в основах, содержащих большое количество воды. Введение в состав мазевых и суппозиторных основ эмульгаторов, ПАВ и др. активаторов всасывания является одним из важных факторов, оказывающих влияние на активность лекарственных веществ. Натрия лаурилсульфат способствует увеличению резорбции микрокристаллического сульфапиридазина из гидрофильной основы. Показана, способность диметилсульфоксида легко проникать через неповрежденную кожу, транспортировать, депонировать и пролонгировать при этом поступление лекарственных веществ в организм. Перспективным вспомогательным веществом в технологии мазей, суппозиториев, растворов является коллаген. Предполагается, что лекарственное вещество, попадая в «петли» молекул коллагена, образует соединение – включение типа клатратов, обеспечивая тем самым пролонгированное действие. Вспомогательные вещества должны отвечать основному требованию – раскрыть всю гамму фармакологических свойств препарата, обеспечить оптимальное действие лекарственного вещества. Правильный выбор вспомогательных веществ позволяет снизить концентрацию лекарственного вещества при сохранении терапевтического эффекта. Пути проникновения ЛВ через кожу. Всасывание ЛВ происходит через эпидермис, сальные и потовые железы и волосяные луковицы (рис. 2). Количество всасываемого вещества зависит от площади нанесения мази и толщины кожи. Всасывание может быть усилено интенсивным втиранием мази и зависит от состояния кожи, наличия заболевания и величины рН. У здоровых людей значение рН составляет от 5,5 до 6,5 – 7,0. При воспалительных процессах рН кожи снижается. Количество всасываемого ЛВ увеличивается с повышением рН. Качество мази определяется многими показателями, в том числе способностью мазевых основ высвобождать ЛВ и скоростью всасывания ЛВ. Процесс всасывания складывается из следующих стадий: - растворение ЛВ в основе; - диффузия ЛВ в границах нанесения слоя мази; - проникновение ЛВ в кожу. Рассчитать количество всосавшегося ЛВ можно по формуле: (2) где Q – количество всосавшегося вещества за определенное время t; D – константа диффузии; А – концентрация вещества; С – растворимость ЛВ в основе (определяется in vitro и in vivo). Зная строение кожи человека, пути и этапы проникновения ЛВ через неё, можно: - облегчить определение рациональных дозировок ЛВ для использования их в лечебной практике (с помощью экспериментальных данных, полученных методами invitro и invivo); - ускорить направленный поиск новых препаратов с желаемыми закономерностями распределения в организме, а в некоторых случаях и с более высокой или более широкой активностью; - обосновать применение фармацевтических факторов в производстве лекарств. 2. Методы in vitro для определения БД в мягких лекарственных формах. Определение степени высвобождения лекарственных веществ. Определение биодоступности in vitro и in vivo позволяет выявить ЛС ненадлежащего качества. Для этого используются фармако - технологические тесты, которые так или иначе способны оценить ЛП как средство доставки некоего лекарственного начала к рецептору или мишени в организме. Среди многообразия фармацевтических тестов in vitro, стоит отметить, как наиболее информативные двух - и трехкамерные мембранные модели для определения биодоступности ЛВ в мягких и ректальных ЛФ. Методы «in vitro» позволяют судить о биологической доступности лекарственного вещества по его конкретному количеству, высвободившемуся из той или иной лекарственной формы. Техническое выполнение экспериментов in vitro может быть различно и определяется главным образом свойствами включенных ЛС. Прямая диффузия. В этом случае проба мази должна находиться в непосредственном контакте со средой, в которую диффундирует ЛВ. Диффузия через мембрану. Суть метода заключается в том, что исследуемая мазь отделена от водной среды полупроницаемой мембраной. Это целлофан или липоидные мембраны животного происхождения, например яичная оболочка, отрезок кишки, кожа животного. Среды для диализа тс же, что и в первом случае, т. с. водные растворы или вода. Аппаратурное оформление этих исследований может быть различным. В последние годы появилось много установок, максимально приближающих условия опыта к условиям живого организма. Чаще всего это двухкамерные установки, разделенные мембранами или мембранными системами. В одной из камер находится мазь, в другой - среда для диализа. Несмотря на конструктивные различия, установки подчинены одному принципу и отражают одинаковые зависимости. М – доля равновесного диализа через полупроницаемую мембрану в модельную среду можно изучить влияние: - природы мазевой основы; - концентрации ЛВ в мази; - степени дисперсности ЛВ. Исследование влияния фармацевтических факторов на высвобождение ЛВ из суспензионных мазей проводят на мазях-моделях, приготовленных на различных основах (вазелин; вазелин 9 частей, ланолин 1 часть, свиной жир; абсорбционная основа ХНИХФИ; эмульсионная основа В/М и М/В и др.) с сульфаниламидными препаратами (стрептоцид, норсульфазол, сульфацил-Na) в различной концентрации (1, 5, 10 %). ЛВ должны быть в двух формах извлечения: - размер частиц 1 – 10 мкм; - размер частиц не более 100 – 120 мкм. Диализная среда подбирается с учетом физико-химических свойств лекарственных препаратов: - для сульфацила Na – вода; - для стрептоцида – 0,1 н. HCl 2,0 г. мази (точная навеска) наносят на целлофановую пленку, которую затем неподвижно укрепляют на конце диализной трубки резинкой-обхваткой. Рис. 1. Схема устройства для определения скорости высвобождения лекарственного вещества путем диализа через пленку: 1 – трубка для диализа, 2 – целлофановая пленка, 3 – пипетка, 4 - термометр Опыт проводят в трехкратном повторении на трех навесках мази одного образца. Определение содержания сульфаниламидных препаратов в диализате. Для количественного определения лекарственного вещества в диализате используют метод ультрафиолетовой спектрофотометрии. Определение содержания ЛВ в диализате проводится после проведения соответствующих разведений. 5 ml диализата вносят в мерную колбу вместимостью 25 или 50 мл и доводят соответствующей диализной средой до метки, перемешивают. Параллельно проводят «слепой опыт» по измерению оптической плотности мазевых основ в УФ-области спектра, где наблюдается максимальное поглощение. 0,5 г. (точная навеска) мазевой основы в бюксе, осторожно расплавляют на водяной бане и извлекают соответствующим растворителем в мерную колбу вместимостью 100 мл (раствор А). 2 мл. раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл. и вновь разводят соответствующим растворителем (раствор Б). 5 мл раствора Б переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и измеряют оптическую плотность полученного раствора Д0 при длинах волн от 225 – 290 нм. В кювете с толщиной слоя равным 10 мм., применяя в качестве стандартного нулевого раствора соответствующий растворитель. Количество высвободившегося лекарственного препарата и обнаруженного в диализате в процентах (С) рассчитывают по формуле: , (3) где D – оптическая плотность диализата; А – разведение отобранной пробы, V – объем (общий) диализной среды, мл; Еср – удельный показатель поглощения; q – объем диализата, взятый д/анализа, мл; р – количество лекарственного препарата в навеске мази, мг Методы in vivo В отличие от методов in vitro эти методы позволяют дать оценку сразу двум процессам: способности мазевой основы освобождать активные компоненты и степень резорбции последних через кожу. Методы in vivo могут быть классифицированы следующим образом. 1. Определение резорбированного количества препаратов по разнице между нанесенной пробой и не всосавшейся частью. Подобная оценка допустима на коже, как животного, так и человека. Определенное количество мази наносят и равномерно растирают на строго ограниченном участке кожи, используя шаблон. На этот участок с помощью манжеты оказывают давление 100 мм рт. ст. Пробу повторяют до тех пор, пока наложенные на испытуемую область диски фильтровальной бумаги перестанут воспринимать мазь. В них определяют количество не резорбированного препарата. Количество препарата, проникшего в кожу, устанавливают по разнице. 2. Гистологические исследования позволяют определить с помощью микроскопа, какого слоя кожи достиг препарат. Мазь наносят на депилированный участок кожи животного, затем после его забоя делают гистологические срезы. Они могут быть продольными (для определения глубины проникновения) или поперечными (для оценки области распространения мази). 3. Определение после локального нанесения препаратов, разорбировавшихся в крови, органах и тканях, выделениях или выдыхаемом воздухе. 4. Регистрация биологических или токсических реакций, вызываемых данным препаратом (реакция зрачка, изменение болевых ощущений, сердечного ритма, наступление судорог или летального исхода и т. д.). 5. Радиоизотопный метод с применением меченых препаратов. Как методы in vitro, так и методы in vivo дают относительные результаты. Если к первым нужно подходить критически на основании того, что они не учитывают физиологических функций кожи, то и вторые дают лишь приближенные результаты. Кожа человека, как по проявлению функций, так и по структуре существенно отличается от кожи животных. Окончательную оценку действия мази можно получить лишь в условиях клиники. Метод растворения суппозиториев В связи с установлением в большинстве случаев корреляции между скоростью растворения и скоростью всасывания лекарственных веществ метод определения скорости растворения может рассматриваться как основной метод определения эффективности высвобождения растворимых лекарственных веществ из лекарственных форм. Высвобождение лекарственного вещества базируется также на процессе диффузии. Методы определения эффективности высвобождения лекарственных веществ применимы для всех пероральных и формированных ректальных лекарственных форм. С целью использования этого метода в настоящее время предложено много приборов различной конструкции. В основе всех методов растворения лежат принцип дезинтеграции лекарственной формы (механическое разрушение) и диффузия включенного в нее лекарственного вещества в растворяющую среду. Растворяющей средой может быть вода или жидкость, имитирующая ту или иную биологическую жидкую среду (желудочный сок, кишечный сок и т. д.). В ряде конструкций приборов растворяющая среда не удаляется из емкости прибора на протяжении всего времени определения; в других конструкциях по мере высвобождения (растворения) вещество периодически удаляется из емкости прибора. В приборах первого типа необходимый для 'Процесса растворения и диффузии переход концентрации достигается путем естественной или принудительной (большей частью перемешиванием) конвекции растворяющей среды. В настоящее время в научных и практических (контрольно-аналитическая служба) биофармацевтических исследованиях наибольшее распространение нашли методы и приборы, позволяющие осуществить периодическое удаление высвободившегося лекарственного вещества. Приборы подобного рода сложны по конструкции и работают на основе адсорбционного, разделительного и диализного методов. Адсорбционный метод основан на поглощении растворяющегося препарата адсорбентами (активированный уголь, бентониты и т. д.) при последующем определении препарата в отфильтрованном адсорбенте. При разделительном методе используется способность полного перехода высвобождающегося в водной фазе препарата в органический растворитель с другой плотностью (например, хлороформом). Диализный метод является наиболее простым, широко распространенным и в аппаратурном оформлении самым разнообразным. Метод пригоден для любых лекарственных форм с водорастворимыми препаратами. Обычно в качестве диализной мембраны используют пленки из натуральных или полимерных материалов различной природы (переживающая кожа животных, стенка желудка и кишки, яичная оболочка, целлофан, поливинилхлорид, пленки из ацетата целлюлозы, полиамида и т. д.). В качестве среды, в которую диализируют лекарственное вещество, можно применять воду: изотонический раствор хлорида натрия, раствор Рингера и т. д. Процесс обычно ведется в термостате при 37 °С. Аппаратурное оформление может быть различным. Очень простая конструкция прибора для диффузионного высвобождения лекарственных веществ была предложена Мюллеманом и Нойеншвандером. Прибор (рис. 114) представляет собой стеклянную трубку длиной 15 см, сечением 10 см2, на один конец которой крепят целлофановую мембрану. Диализную трубку с мембраной опускают на глубину 2-3 мм в термостатированный сосуд (химический стакан емкостью 250 мм) с 30 мл дистиллированной воды (или другой среды). После достижения температуры 37±0,5°С на целлофановую мембрану опускают или равномерно наносят исследуемую лекарственную форму. Отбор проб диализа в каждом случае производят с помощью пипетки через равные интервалы времени с момента начала диализа, немедленно возвращая взятое количество чистого растворителя в диализатор. Объем каждой пробы равен 5 мл. Взятые пробы анализируют химическими или физико-химическими методами. В настоящее время определение скорости растворения (высвобождения) препаратов в качестве практически первого этапа определения биологической доступности введено в Фармакопею США (USP XVIII, с. 934) и Национальный формуляр (NF XIII, с. 802). В указанные кодексы уже включено 12 статей, касающихся препаратов, для которых определение скорости растворения является обязательным. Прибор для определения скорости растворения (рис. 115) представляет собой трехгорлый сосуд из пластмассы емкостью 1 л. В один' нз тубусов (1) вводят термометр, в другой (2) - стеклянную трубку для взятия проб и их комплексирования, а в третий (3) - основную деталь прибора - цилиндрическую корзинку (4) высотой 3,6 см и диаметром 2,5 см, сделанную из нержавеющей стали в виде сетки с отверстиями диаметром 40 меш (около 0,351 мм). Корзинка насажена на ось мотора (5). В сосуд наливают растворяющую среду (750-900 мл), в качестве которой в зависимости от природы препарата используют дистиллированную воду, раствор хлористоводородной кислоты различной концентрации, буферные растворы и т. д. Исследуемую лекарственную форму помещают в цилиндрическую корзинку, которую устанавливают на расстоянии 2 см от дна сосуда. Температуру растворяющей среды во время опыта поддерживают постоянной (37±0,5°С). Скорость вращения корзинки в среде регулируют с точностью ±5%, она составляет от 25 до 200 об/мин в зависимости от свойств препаратов. Через установленные интервалы времени отбирают для анализа пробы по 2- 3 мл для определения содержания лекарственного вещества. Взятый объем растворителя тотчас же восполняют новым. Исследуемая лекарственная форма соответствует требованиям на скорость высвобождения в том случае, если за установленные интервалы времени из нее перешло в раствор требуемое количество лекарственного препарата. Около 2,5 (точная навеска) мелкоизмельченных суппозиториев помещают в коническую колбу емкостью 100 мл, добавляют 25 мл воды, нагревают на кипящей водяной бане до полного расплавления основы и нагревают еще в течение 3-4 мин. Далее смесь охлаждают до 15-20°С, фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу, доводят объем до метки. Затем раствор анализируют. При анализе суппозиториев, приготовленных на водорастворимых основах, количественное определение проводят и в контрольном опыте, т. е. в основе без вещества. На основании данных количественного определения вычисляют процент высвобождения вещества из лекарственной формы путем деления количества вещества в растворе в г. на количество вещества в лекарственной форме в г. и умножения на 100%. Разделительный метод для суппозиториев и мазей с веществами, способными растворяться в гидрофобной фазе. По этому методу используется способность полного перехода высвобождающегося в водной фазе вещества в органический растворитель, образующий один слой в приборе (вода, раствор хлористоводородной кислоты, физиологический раствор и т. д. образует другой слой). Пробу лекарственной формы помещают в водной фазе. Переход вещества в гидрофобную фазу может осуществляться как естественной конвекцией, так и при периодическом взбалтывании. Через заданный промежуток времени (30-120 мин.) воду сливают, а в органическом растворителе определяют содержание вещества. Процент высвобождения вещества из лекарственной формы вычисляют путем деления количества вещества в растворе в г. на количество вещества в лекарственной форме в г. и, умножения на 100%. Метод диализа для суппозиториев и мазей с водорастворимыми веществами. Обычно в качестве диализной мембраны используют пленки из натуральных или полимерных материалов различной природы (стенка желудка или кишки животного, яичная оболочка (пленка), целлофан не лакированный, поливинилхлорид, пленки из ацетата целлюлозы, полиамида и т.д.). В качестве среды, в которую диализирует лекарственное вещество, можно использовать воду, изотонический раствор натрия хлорида, раствор Рингера и т. д. Процесс ведется в термостате при 37°С. Аппаратурное оформление может быть различным. В упрощенном случае прибор представляет собой стеклянную трубку длиной 15 см, сечением 10 см2, на один конец которой крепят целлофановую мембрану. Диализную трубку с мембраной опускают на глубину 2-3 мм в термостатированный сосуд (химический стакан емкостью 250 мл), содержащий 30 мл дистиллированной воды (или другой среды). После достижения температуры 37±0,5°С на целлофановую мембрану опускают или равномерно наносят исследуемую лекарственную форму. Отбор проб диализата в каждом случае производят с помощью пипетки через равные интервалы времени с момента начала диализа, с немедленным возвращением взятого количества чистого растворителя в диализатор. Объем каждой пробы равен 5 мл. Взятые пробы анализируются химическими или физико-химическими методами. Данные определения вносят в соответствующие таблицы. Строят график, затем подсчитывают общее содержание вещества в объеме диализата. На основании полученных данных делают выводы о зависимости скорости высвобождения вещества от изучаемых факторов. Скорость высвобождения вещества определяют путем деления количества вещества в растворе на количество вещества в лекарственной форме и умножения на 100%. Диффузия в гель или «Метод колодцев» для мазей и суппозиториев 2% агаровый или желатиновый гель готовят на стандартном растворителе (натрия хлорида 8,9 г, калия хлорида - 0.3 г, кальция хлорида - 0,33 г, дистиллированной воды до 1000 мл.). Приготовленный раствор в количестве 15-20 мл разливают в чашки Петри. В сформировавшемся геле через 24 часа металлическим цилиндром с диаметром примерно 8 мм вырезают диски, в образовавшиеся лунки вносят испытуемые образцы. Степень высвобождения вещества из лекарственной формы фиксируется по радиусу окрашенной зоны, которая образуется при взаимодействии препарата со специально подобранным индикатором. Индикатор вводится либо в процессе приготовления геля, либо разбрызгиванием на поверхность чашки через определенное время контакта геля с лекарственной формой. Можно также вырезать определенную зону геля и после растворения провести количественное определение. В случае флуоресцирующих веществ зону их освобождения отмечают при просмотре в УФ свете. Возможно также использование авто радиограмм и микробиологических тестов. На основании результатов измерений зон высвобождения вещества, или результатов количественного определения выявляют оптимальные технологические варианты. «Метод окрашенных комплексов» предназначен для выбора оптимальной основы с водо- и жиро растворимыми веществами на эмульсионных основах. 100 г каждой из выбираемых основ тщательно гомогенизируют с 5—10 кап. 2% раствора метиленового синего или 5—10 кап. 5% масляного раствора cудана III. Затем выявляют наиболее интенсивную окраску, сравнивая с эталонами. Эталонные растворы готовят методом стандартных серий. Исходными растворами для серии разведений служат 0,02% раствор метиленового синего в воде и 0,02% раствор судана III в вазелиновом масле. Эталонные растворы помещают в одинаковые стеклянные сосуды с непрозрачной задней стенкой. Сравнение производят в отраженном свете. Рекомендации по выбору эмульсионных основ базируются на том, что для водо- растворимых веществ целесообразно использование основ с более высоким индексом шкалы эталонов по метиленовому синему, для жирорастворимых основ - по судану III. Метод микроскопии - предназначен для рационального выбора диспергирующих сред и основ для мазей — суспензий на гидрофобных основах. Метод позволяет 1. сделать обоснованный выбор основообразующих и вспомогательных компонентов, а также их сочетаний. Кроме того, 2. метод позволяет дать качественную оценку готовым мазевым системам по доступности нерастворимой фазы внешней гидрофильной среде. Пробы мазей в количестве 5—10 г готовят с содержанием твердой фазы 5%. Первый этап приготовления проб заключается в нанесении на поверхность частиц первичного контактирующего слоя. В качестве контактирующего слоя используют как сами основы, так и изучаемый ассортимент вспомогательных компонентов. Нанесение контактирующих слоев проводят при растирании навески лек. вещества в их среде. Затем в ступку вводится рассчитанное количество расплавленной основы и смесь гомогенизируется до охлаждения. К приготовленной таким образом пробе добавляют равное количество внешней гидрофильной среды — 0,1% водного раствора, метиленового синего. Проводят тщательное смешение, затем отбирают микропробы. Для достоверности отбирают 6 микропроб по 3мг каждая. После переноса их на предметное стекло и покрытия покровным путем слабого давления, чтобы не нарушать систему, получают слои для просмотра. Просмотр ведется при увеличении 15x40 в 2-3 точках микропробы. Возможно образование 4-х типов микроскопических полей: I - частицы окрашены и имеют голубую гидрофильную оболочку; II - частицы окрашены, но, не имея гидрофильной оболочки, распределены в гидрофобной основе; III- частицы не окрашены, но имеют гидрофильную оболочку; IV- частицы не имеют окраски гидрофильной оболочки и распределены в основе. На основе типов микроскопических полей, полученных в эксперименте, делают вывод о рациональном выборе вспомогательных и основообразующих компонентов для каждого конкретного сочетания. Наибольшего эффекта следует ожидать от систем I, II, III, в которых водная фаза имеет доступ к частицам вещества. Образование типа IV свидетельствует, что использованное сочетание вспомогательного и основообразующего компонента не обеспечивает доступности данного препарата. Методы in vitro позволяют судить о биологической доступности лекарственного вещества по его конкретному количеству, высвободившемуся из той или иной лекарственной формы. В связи с установлением в большинстве случаев корреляции между скоростью растворения и скоростью всасывания лекарственных веществ метод определения скорости растворения может рассматриваться как основной метод определения эффективности высвобождения растворимых лекарственных веществ из лекарственных форм. Высвобождение лекарственного вещества базируется также на процессе диффузии. Методы определения эффективности высвобождения лекарственных веществ применимы для всех пероральных и формированных ректальных лекарственных форм. С целью использования этого метода в настоящее время предложено много приборов различной конструкции. В основе всех методов растворения лежат принцип дезинтеграции лекарственной формы (механическое разрушение) и диффузия включенного в нее лекарственного вещества в растворяющую среду. Растворяющей средой может быть вода или жидкость, имитирующая ту или иную биологическую жидкую среду (желудочный сок, кишечный сок и т. д.). В ряде конструкций приборов растворяющая среда не удаляется из емкости прибора на протяжении всего времени определения; в других конструкциях по мере высвобождения (растворения) вещество периодически удаляется из емкости прибора. В приборах первого типа необходимый для процесса растворения и диффузии переход концентрации достигается путем естественной или принудительной (большей частью перемешиванием) конвекции растворяющей среды. В настоящее время в научных и практических (контрольно-аналитическая служба) биофармацевтических исследованиях наибольшее распространение нашли методы и приборы, позволяющие осуществить периодическое удаление высвободившегося лекарственного вещества. Приборы подобного рода сложны по конструкции и работают на основе адсорбционного, разделительного и диализного методов. Адсорбционный метод основан на поглощении растворяющегося препарата адсорбентами (активированный уголь, бентониты и т. д.) при последующем определении препарата в отфильтрованном адсорбенте. При разделительном методе используется способность полного перехода высвобождающегося в водной фазе препарата в органический растворитель с другой плотностью (например, хлороформом). Диализный метод является наиболее простым, широко распространенным и в аппаратурном оформлении самым разнообразным. Метод пригоден для любых лекарственных форм с водорастворимыми препаратами. Обычно в качестве диализной мембраны используют пленки из натуральных или полимерных материалов различной природы (переживающая кожа животных, стенка желудка и кишки, яичная оболочка, целлофан, поливинилхлорид, пленки из ацетата целлюлозы, полиамида и т. д.). В качестве среды, в которую диализируют лекарственное вещество, можно применять воду: изотонический раствор хлорида натрия, раствор Рингера и т. д. Процесс обычно ведется в термостате при 37 °С. Аппаратурное оформление может быть различным. Прибор представляет собой стеклянную трубку длиной 15 см, сечением 10 см2, на один конец которой крепят целлофановую мембрану. Диализную трубку с мембраной опускают на глубину 2-3 мм в термостатированный сосуд (химический стакан емкостью 250 мм) с 30 мл дистиллированной воды (или другой среды). После достижения температуры 37±0,5°С на целлофановую мембрану опускают или равномерно наносят исследуемую лекарственную форму. Отбор проб диализа в каждом случае производят с помощью пипетки через равные интервалы времени с момента начала диализа, немедленно возвращая взятое количество чистого растворителя в диализатор. Объем каждой пробы равен 5 мл. Взятые пробы анализируют химическими или физико-химическими методами. В настоящее время определение скорости растворения (высвобождения) препаратов в качестве практически первого этапа определения биологической доступности введено в Фармакопею США (USP XVIII, с. 934) и Национальный формуляр (NF XIII, с. 802). В указанные кодексы уже включено 12 статей, касающихся препаратов, для которых определение скорости растворения является обязательным. Прибор для определения скорости растворения представляет собой трехгорлый сосуд из пластмассы емкостью 1 л. В один нз тубусов (/) вводят термометр, в другой (2)-стеклянную трубку для взятия проб и их комплексирования, а в третий (3) - основную деталь прибора - цилиндрическую корзинку {4) высотой 3,6 см и диаметром 2,5 см, сделанную из нержавеющей стали в виде сетки с отверстиями диаметром 40 меш (около 0,351 мм). Корзинка насажена на ось мотора (5). В сосуд наливают растворяющую среду (750-900 мл), в качестве которой в зависимости от природы препарата используют дистиллированную воду, раствор хлористоводородной кислоты различной концентрации, буферные растворы и т. д. Исследуемую лекарственную форму помещают в цилиндрическую корзинку, которую устанавливают на расстоянии 2 см от дна сосуда. Температуру растворяющей среды во время опыта поддерживают постоянной (37±0,5°С). Скорость вращения корзинки в среде регулируют с точностью ±5%, она составляет от 25 до 200 об/мин в зависимости от свойств препаратов. Через установленные интервалы времени отбирают для анализа пробы по 2- 3 мл для определения содержания лекарственного вещества. Взятый объем растворителя тотчас же восполняют новым. Исследуемая лекарственная форма соответствует требованиям на скорость высвобождения в том случае, если за установленные интервалы времени из нее перешло в раствор требуемое количество лекарственного препарата. Оценка высвобождения лекарственных веществ из ректальных лекарственных форм (РЛФ) определяется способностью основы высвобождать лекарственные вещества. Существует инструментальный (in vitro) и биологический (in vivo) подходы для определения высвобождения. Широко применяется метод агаровых пластинок, который отличается от такового для мазей способом нанесения суппозиторной массы после расплавления суппозиториев на агаровый гель. Если действующие вещества обладают антисептическими или бактерицидными свойствами, применяют микробиологический тест. Также применимыми для суппозиториев являются методы прямой диффузии, диффузии через мембрану и хроматографический метод Фармакопея XI издания предлагает метод Крувчинского - метод равновесного диализа через полупроницаемую мембрану из природных или синтетических материалов Испытание на распадаемость позволяет определить, размягчаются или распадаются ректальные или вагинальные суппозитории в течение установленного времени, если они помещены в жидкую среду в экспериментальных условиях. Испытанию подвергаются все суппозитории, капсулы или вагинальные таблетки, кроме предназначенных для модифицированного высвобождения или местного пролонгированного действия, для которых проводиться тест "Растворение". Рис. Прибор для определения распадаемости суппозиториев Прибор состоит из прозрачного стеклянного или пластмассового пустого цилиндра 1, внутри которого с помощью трех зажимов 2 закреплено металлическое приспособление, представляющее собой два перфорированных диска 3 из нержавеющего металла. Испытания проводят, используя три таких приспособления, каждое из которых содержит отдельный образец 5. Каждое приспособление помещают в резервуар 6 с терморегулирующим устройством объемом не менее 4 л и прикрывают стеклянной крышкой 4. Резервуар снабжен свободно вращающейся мешалкой. Испытывают три суппозитория. Препарат выдерживает испытание, если все образцы распались. Наибольшее распространение для определения распадаемости суппозиториев получило аналитическое оборудование фирмы PharmaTest (Германия), модель PTS ЗЕ и PTS WO. Рис. Проточная кювета для липофильных твердых ЛФ Суппозитории испытывают и на растворение. Для этого используют проточный прибор для твердых лекарственных форм, но со специальной кюветой, представленной на рис.8. Она состоит из трех прозрачных частей, которые вставляются друг в друга. Среда растворения проходит через камеру А и поднимается вверх. Движение потока в камере Б направлено вниз к маленькому отверстию, которое ведет вверх к фильтрующему устройству. Средняя часть II кюветы имеет полость, предназначенную для сбора липофильных вспомогательных веществ, которые всплывают в среде растворения. Вещество распространяется через среду растворения в соответствии со своими физико-химическими свойствами. В обоснованных и разрешенных случаях испытанию могут подвергаться представительные части суппозиториев большого размера. жүктеу/скачать 277 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|