Методичні рекомендації для студентів для підготовки І проведення практичного заняття
Реакція непрямої (пасивної) гемаглютинації (РНГА)
жүктеу/скачать 0,52 Mb. Pdf көрінісі
|
Мікроба 8
- Бұл бет үшін навигация:
- Реакція гальмування гемаглютинації (РГГА)
- Реакція коаглютинації
- Преципітація. Преципітація
| Реакція непрямої (пасивної) гемаглютинації (РНГА)
заснована на використанні еритроцитів (або латексу) з адсорбованими на їх поверхні антигенами або антитілами, взаємодія яких з відповідними антитілами або антигенами сироватки крові хворих викликає склеювання і випадання еритроцитів на дно пробірки або осередки у вигляді фестончатого осаду . РНГА застосовують для діагностики інфекційних хвороб, визначення гонадотропного гормону в сечі при встановленні вагітності, для виявлення підвищеної чутливості до лікарських препаратів і гормонів і в деяких інших випадках. Реакція гальмування гемаглютинації (РГГА) заснована на блокаді, придушенні вірусів антитілами імунної сироватки, в результаті чого віруси втрачають властивість агглютинувати еритроцити. РГГА застосовують для діагностики багатьох вірусних хвороб, збудники яких (віруси грипу, кору, краснухи, кліщового енцефаліту та ін.) можуть агглютинувати еритроцити різних тварин. Реакція коаглютинації - різновид РА: клітини збудника визначають за допомогою стафілококів, попередньо оброблених імунною діагностичною сироваткою. Стафілококи, що містять білок А, що має спорідненість до імуноглобулінів, неспецифічно адсорбують антимікробні антитіла, які потім взаємодіють активними центрами з відповідними мікробами, виділеними від хворих. В результаті коаглютинації утворюються пластівці, що складаються з стафілококів, антитіл діагностичної сироватки і мікроба. Преципітація. Преципітація ( лат. praecipitatio — «стрімке падіння») – в основі механізму лежить утворення і випадання в осад комплексів антиген-антитіло.Характер антигену - молекулярні, в розчинній вигляді.Антигенами можуть бути екстракти мікроорганізмів, тканин, органів, тканин, хімічні речовини.Феномен преципітації полягає в реакції між антитілами (преципітини) і антигенами (преципітиногени) з утворенням осаду (преципітату) або помутнінням розчину.Реакція преципітації набагато більш чутлива, ніж реакція аглютинації, її можна проводити в рідкій і щільному середовищі, проте обов'язковою умовою є прозорість вихідних компонентів. Рис. 7 (Із:Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии - А.А Воробьев, А.С Быков - 2003 год - 236 с.) Реакцію проводять в пробірках, нашаровуючи розчинний антиген на імунну сироватку. При оптимальному співвідношенні антигену і антитіл на кордоні розділу двох розчинів утворюється непрозоре кільце преципітату (реакція кольцепреципітаціі). Надлишок антигену не впливає на результат кольцепреципітаціі внаслідок поступової дифузії реагентів до кордону рідини. Якщо в якості антигенів в реакції кольцепреципітаціі використовують прокип'ячені і профільтровані водні екстракти органів і тканин, то така реакція називається реакцією термопреципітації (реакцією Асколі). Реакції преципітації в напіврідкому гелі агару: подвійна імунодифузія по Оухтерлони, радіальна імунодифузія, імуноелектрофорез. Подвійна імунодифузія по Оухтерлони розтоплений агаровий гель тонким шаром виливають на скляну пластинку і після затвердіння в ньому вирізають лунки. В лунки окремо поміщають антигени та імунні сироватки, які дифундуючи в агар, утворюють в місці зустрічі преципітат у вигляді білої смуги. При постановці реакції радіальної імунодифузії імунну сироватку вносять в агарових гель. В лунки гелю поміщають розчин антигену, який дифундуючи в гель, утворює кільцеві зони преципітації навколо лунок. Діаметр кільця преципітації пропорційний концентрації антигену. Реакцію використовують для визначення змісту в крові імуноглобулінів різних класів, компонентів системи комплементу та ін. Іммуноелектрофорез– поєднання методу електрофорезу і имунопреципітації: суміш антигенів розділяється на гелі за допомогою електрофорезу, потім паралельно зонам електрофорезу вносять імунну сироватку, антитіла якої дифундують в гель і утворюють в місці «зустрічі» з антигеном лінії преципітації. Реакція флоккуляції (по Рамону ) – поява опалесценції або пухкої маси при реакції токсин-антитоксин або анатоксин-антитоксин. Її застосовують для визначення активності анатоксину або антитоксичної сироватки жүктеу/скачать 0,52 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|