Основные принципы систематики прокариот
Применение культур клеток в диагностике вирусных инфекций
жүктеу/скачать 457,65 Kb.
|
ответы к экзамену
| 123.Применение культур клеток в диагностике вирусных инфекций.
В тканевых культурах. Тканевые культуры или клеточные культуры – клетки, выращенные вне организма на искусственных питательных средах. Для их приготовления используют чаще всего эмбриональные и опухолевые ткани. Метод тканевых культур разработан Дж. Эндерсом в 50-е годы. Большинство вирусов способно размножаться в культурах клеток. Для каждого вируса можно подобрать наиболее чувствительную культуру клеток. Для индикации вирусов в инфекционном материале могут быть использованы следующие методы и критерии: Микроскопический: обнаружение вирусных включений в препаратах, окрашенных но Муромцеву, Морозову, Романовскому, Пигаревскому, Павловскому, обработанные флюорохромами. Вирусологическое выделение вирусов в культурах клеток, в развивающихся куриных эмбрионах, на лабораторных животных (состояние, симптомы). В культуре тканей: реакция гемаглютинации (РГА), реакция гемадсорбции (РГадс), цитопатогенное действие (ЦПД), цветная проба, метод бляшек. Идентификация вирусов осуществляется с помощью серологических (иммунологических) методов: реакция торможения гемагглютинации (РТГА), реакция торможения гемадсорбции (РТГадс), реакция связывания комплемента (РСК), реакция нейтрализации цитопатогенного действия (РН), реакция иммунофлюоресценции прямая и непрямая (РИФ, РНИФ), реакция преципитации в геле (РП), реакция нейтрализации цветной пробы цитопатическое действие (ЦПД). В результате размножения вирусов в клетках происходят морфологические изменения клеток (вакуолизация цитоплазмы, деструкция митохондрий, округление клеток). Часть клеток погибает и отслаивается от стекла. Вместо сплошного монослоя остаются отдельные клеточные островки. ЦПД обнаруживают под микроскопом (8). По ЦПД можно не только обнаружить, но и идентифицировать вирусы. Например, вирус полиомиелита вызывает мелкозернистую деструкцию клеток; аденовирусы вызывают образование скоплений клеток в виде виноградных гроздьев; вирус кори вызывает образование симпластов – многоядерных клеток. жүктеу/скачать 457,65 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|