332
V. МЕТОДЫ ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОГО
АНАЛИЗА
Нативные (влажные) препараты крови (без окрашивания).
Эту
очень простую методику (каплю крови
помещают под покровное
стекло) можно использовать для выявления: трипаносом, личинок
микрофилярий.
Окрашенные мазки крови.
При подозрении на наличие парази-
тов, из крови всегда следует одновременно
готовить тонкий и тол-
стый (или толстую каплю) мазки крови. Способы обнаружения пара-
зитов, а в крови и определение их видовой принадлежности основано
на дифференцированном окрашивании мембран органоидов и мета-
болитов паразита. Учитывая морфологию и метаболизм паразитов,
применяются кислые и щелочные растворы ядерных красителей.
Универсальным среди них является краситель Романовского или
азур-2-эозин. При этом ядра паразитических простейших окрашивают-
ся в красный цвет, а цитоплазма в голубой или синий цвет.
В мазках крови могут быть выявлены следующие паразиты:
возбудители малярии, трипаносомы;
возбудитель висцерального
лейшманиоза, личинки филярий.
Толстая капля крови.
Использование толстых капель крови поз-
воляет сконцентрировать паразитов в исследуемом материале.
Толстую каплю в отличие от мазка крови не фиксируют. Под
влиянием водного раствора краски нефиксированные эритроциты
гемолизируются, препарат становится прозрачным. Это ускоряет
и облегчает нахождение паразитов, так как в одном поле зрения можно
исследовать гораздо больший объем крови, чем в мазке.
Если же тол-
стая капля будет зафиксирована, то гемолиза эритроцитов не произой-
дет, они будут наслаиваться друг на друга и препарат окажется
непригодным для микроскопии.
Слой крови в толстой капле не должен быть очень толстым,
иначе после высушивания она трескается и может отпасть. Нормальной
333
считается
толстая капля, через которую после высушивания слабо
просвечивает крупный печатный текст, а при микроскопии в одном
поле зрения насчитывается в среднем 10–15 ядер лейкоцитов. Хорошие
препараты
крови можно приготовить, только используя обезжирен-
ные предметные стекла.
Окраска толстой капли крови.
Чем выше температура в помеще-
нии, тем быстрее окрашивается препарат, и наоборот. В среднем мазок
окрашивается в течение 45–50 мин, толстая капля – 15–30 мин.
Если
толстые капли сохранялись более недели неокрашенными, что само
по себе действует как слабая фиксация, особенно в условиях жаркого
климата, то препараты после окраски могут получиться недостаточно
прозрачными из-за неполного гемолиза эритроцитов. В таких случаях
предварительно следует налить на
препарат несколько капель
дистиллированной воды. Через 10–15 мин гемоглобин эритроцитов
переходит в воду, придавая ей буроватый оттенок, а толстая капля
становится белесоватой.
Воду сливают, каплю осторожно прополас-
кивают дистиллированной водой и затем наливают краску.
Правильно окрашенная толстая капля имеет фиолетовый цвет,
перекрашенная – темно-фиолетовый цвет, а недокрашенная – светло-
голубой цвет. Длительно хранившаяся при высокой температуре или
зафиксированная толстая капля приобретает почти черный цвет.
С целью обнаружения мелких паразитов в крови микроскопи-
руют с иммерсионным маслом под
большим увеличением мазок
и толстую каплю крови.
Достарыңызбен бөлісу: