Поступило в редакцию
жүктеу/скачать 0,63 Mb. Pdf көрінісі
|
flavonoidy-vostochnoaziatskogo-vida-serratula-manshurica-kitag
| Экспериментальная часть
Для выделения флавоноидов использовали надземную часть (листья, стебли, соцветия) Serratula manshurica , собранной в Приморском крае (Шкотовский район, окрестности поселка Шкотово, 3 км восточ- нее поселка, левый берег реки Шкотовка, 2019 г.). Сушка проводилась при комнатной температуре. Высу- шенные листья, стебли и соцветия Serratula manshurica измельчали до размеров частиц 1–2 мм. Измельченные листья (30 г) и соцветия (100 г) Serratula manshurica экстрагировали 300 мл 70% эти- лового спирта на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 1.5 ч. Полученные экстракты концентрировали на роторном испарителе до водного остатка и последовательно обрабатывали четыреххло- ристым углеродом, этилацетатом, н-бутанолом для удаления липидов и пигментов. Бутанольные фракции упаривали досуха при пониженном давлении. Полученные остатки растворяли на кипящей водяной бане 96% этиловым спиртом в количестве, достаточном для полного растворения остатка. Охлаждали до 2–4 °С для выпадения кристаллов. В результате из бутанольной фракции листьев Serratula manshurica выделили кверцетин-4′-О-β-D-глюкуронопиранозид (1), а из соцветий – апигенин-7-О- β-D-глюкуронопиранозид (2). Идентификацию выделенных соединений проводили методами УФ-, ЯМР-спектроскопии и масс- спектрометрии. УФ-спектры флавоноидов снимали на спектрофотометре Shimadzu UV 1240 mini (Япония). Масс- спектрометрический анализ проводили на приборе Аgilent 6210 TOF LC/MS (США) при ионизации электро- распылением (ESI) с регистрацией отрицательных ионов. Спектры ЯМР получены на спектрометре Bruker (США) c рабочей частотой 400 МГц в d 6 -ДМСО. Кверцетин - 4′ - О - β -D- глюкуронопиранозид . УФ (MeOH) λ max (log ε): 253 (4.0), 365 (3.7) нм; 1 H ЯМР ((CD 3 ) 2 SO, 400 МГц): δ 7.68 (1H, д, J=1.9 Гц, H-2'), 7.54 (1H, дд, J=9.6, 1.9 Гц, H-6'), 7.23 (1H, д, J=9.6 Гц, H- 5'), 6.43 (1H, д, J=1.5 Гц, H-8), 6.19 (1H, д, J=1.5 Гц, H-6), 4.84 (1H, д, J=6.9 Гц, H-1''), 3.57 (1H, м, H-3''), 3.26- 3.46 (3H, м, H-2'',4'',5''); 13 С ЯМР ((CD 3 ) 2 SO, 400 MГц): δ 177.8 (C-4), 173.9 (-COOH), 166.6 (C-7), 162.4 (C-5), 158.1 (C-9), 148.6 (C-2), 148.5 (C-4'), 147.5 (C-3'), 138.2 (C-3), 127.2 (C-1'), 121.1 (C-6'), 118.4 (C-5'), 117.2 (C- 2'), 104.6 (C-10), 103.5 (C-1''), 100.3 (C-6), 95.4 (C-8), 77.7 (C-5''), 76.1 (C-3''), 74.9 (C-2''), 73.9 (C-4''); ESI-MS m/z: 477.0670 [M-H] - . Апигенин -7- О - β -D- глюкуронопиранозид . УФ (MeOH) λ max (log ε): 268 (4.0), 332 (3.8) нм; 1 H ЯМР ((CD 3 ) 2 SO, 400 МГц): δ 7.82 (2H, д, J=9.2 Гц, H-6',2'), 6.87 (2H, д, J=9.1 Гц, H-5',3'), 6.77 (1H, H-8), 6.74 (1H, с, H-3), 6.40 (1H, H-6), 5.12 (1H, д, J=6.9 Гц, H-1''), 3.76 (1H, м, H-3''), 3.29 (3H, м, H-2'',4'',5''); 13 С ЯМР ((CD 3 ) 2 SO, 400 MГц): 183.7 (C-4), 174.1 (-COOH), 166.1 (C-2), 164.6 (C-7), 163.6 (C-4'), 162.8 (C-5), 158.7 (C- Ф ЛАВОНОИДЫ ВОСТОЧНОАЗИАТСКОГО ВИДА S ERRATULA MANSHURICA K ITAG . 169 9), 130.2 (C-6',2'), 122.3 (C-1'), 117.8 (C-5',3'), 107.1 (C-10), 104.5 (C-3), 101.3 (C-1''), 101.1 (C-6), 96.4 (C-8), 78.0 (C-5''), 76.0 (C-3''), 74.8 (C-2''), 73.6 (C-4''); ESI-MS m/z: 445.0770 [M-H] - . Выделение флавоноидов из Serratula manshurica для ВЭЖХ анализа . Навески по 5.00 г надземной части (листья, стебли, соцветия) Serratula manshurica экстрагировали 150 мл 70% (об./об.) этилового спирта на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 1.5 ч; экстракцию повторяли дважды в анало- гичных условиях. Объединенные водно-спиртовые экстракты фильтровали через бумажные фильтры (синяя лента), измеряли объемы и анализировали методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ ВЭЖХ). ОФ ВЭЖХ-анализ проводили на жидкостном хроматографе Agilent Technologies Series 1200, детектор – диодная матрица, рабочая длина волны – 360 нм. Колонка Supelco «Discovery» C18 (4.6×250 мм, 5 мкм), тем- пература термостата колонки – 30 °С. Разделение флавоноидов проводили в режиме градиентного элюирова- ния: 0–10 мин 80% А + 20% В; 10–56 мин 20% А + 80% В; 56–60 мин 80% А + 20% В; 60–70 мин 80% А + 20% В (А – 1% СН 3 COOH; В – СН 3 OH). Скорость потока элюента – 0.8 мл/мин. Объем вводимой пробы – 5 мкл. Расчеты доверительного интервала проводили в программе Microsoft Excel, при n=5 и P=0.95. жүктеу/скачать 0,63 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|