2.Качественные реакции на желчные пигменты в моче (реакция Гмелина). Принцип метода: Желчные пигменты окисляются концентрированной нитратной кислотой с образованием окрашенных в разные цвета продуктов окисления: биливердина (зеленого цвета), билицианина (синего цвета), холелетина (желтого цвета) и др.
Пробу Гмелина можно проводить в пробирке или на фильтровальной бумаге. Высокая чувствительность реакции дает возможность проявить билирубин в разведении 1:80 000.
Ход работы: В пробирку наливают 1-2 мл концентрированной нитратной кислоты, которая содержит следы нитритной. Осторожно по стенке наслаивают равный объем исследуемой мочи. При наличии в моче желчных пигментов на границе жидкостей появляются цветные кольца. Характерное появление зеленого, синего, фиолетового, красного и желтого колец в указанной последовательности отвечает разным степеням окисления пигмента.
Результат: Выводы:
3 . Определение уробилина в моче по реакции Богомолова. Принцип метода: Уробилин при взаимодействии с купрум (ІІ) сульфатом образует соединение розово-красного цвета.
Ход работы: Перед проведением пробы к моче прибавляется 1-2 капли раствора йода для окисления уробилиногеновых тел в уробилиновые.
К 10 мл мочи прибавляют 2 мл насыщенного раствора CuSO4. Если появляется помутнение вследствие образования Cu(OH)2, прибавляют 1-2 капли хлоридной кислоты до получения прозрачного раствора. Через 5 минут доливают 2-3 мл хлороформа. Пробу взбалтывают и дают отстояться. При наличии уробилиновых тел слой хлороформа окрашивается в розово-красный цвет.
Результат:
Выводы:
Клинико-диагностическое значение: К пигментам, которые образуются в кишечнике из билирубина, относятся уробилиноген и стеркобилиноген (уробилиногеновые тела) и их окисленные формы: уробилин и стеркобилин соответственно (уробилиновые тела).
Повышенное выделение уробилиногеновых (уробилиновых) тел с мочой называется уробилинурией.
Уробилинурия (с обнаружением, главным образом, уробилиногена) встречается при гепатоцеллюлярных заболеваниях печени (гепатит, цирроз, отравления и др.), сердечнососудистой патологии, которая сопровождается застойным повреждением печени. Уробилиноген, который возвращается из кишечника по портальной вене, не претерпевает обычных для него преобразований из-за функциональной недостаточности печени и выводится с мочой.
4.2 САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА НА ЗАНЯТИИ
(выполняется по индивидуальным задачам для каждого студента).
