Руководство Инфекционные болезни Главные редакторы акад. Ран н. Д. Ющук, акад. Раен ю. Я. Венгеров



Pdf көрінісі
бет55/664
Дата26.12.2023
өлшемі31,6 Mb.
#199567
түріРуководство
1   ...   51   52   53   54   55   56   57   58   ...   664
Байланысты:
ющук

реакции иммобилизации,
которые используют для идентификации воз­
будителей, обладающих подвижностью. Этот лабораторный прием применяют 
в диагностике сифилиса (реакция иммобилизации трепонем), а также холеры 
(иммобилизация холерного вибриона).
Еще один вариант — нейтрализация антителами сыворотки крови больного 
гемолитической активности стрептококкового стрептолизина-0 (
АСЛО
). Этот 
тест используется для диагностики инфекций, ассоциированных с гемолитическим 
стрептококком группы А.
Аллергигеская проба.
Для ее постановки человеку чаще всего внутрикожно 
вводится раствор микробных антигенов. Антигены взаимодействуют с эпители­
альными клетками в месте введения, что способствует выделению хемокинов и 
привлечению к месту введения аллергена различных клеток иммунного ответа и 
прежде всего Т-лимфоцитов. Т-лимфоциты, которые под воздействием микроб­
ных антигенов выделяют провоспалительные цитокины. Все это в совокупности в 
течение 48 ч дает основные проявления положительной аллергической реакции — 
лимфоидно-макрофагального инфильтрата в месте введения аллергена.
7 0
М ЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ


Аллергические пробы, хотя и носят лишь ориентировочный характер, очень 
удобны при массовых обследованиях на наличие таких инфекционных заболе­
ваний как туберкулез, бруцеллез, токсопламоз. В этих случаях положительная 
аллергическая проба указывает на инфицированность организма и необходимость 
более точной диагностики инфекционного процесса.
К числу современных методов диагностики инфекционных заболеваний отно­
сятся 
мет оды им м уноанализа.
Это особая группа методов, основанная на 
использовании меченых моноклональных антител. 
М оноклональны е ант ит ела
получают с использованием так называемых гибридомных технологий, они высо­
ко специфичны, поскольку способны к взаимодействию только с одной наиболее 
характерной антигенной детерминантой среди всего набора видовых микробных 
антигенов. Моноклональные антитела обычно метятся с помощью красителей- 
флюорохромов. Такие антитела, присоединяясь к специфичному для них объ­
екту — искомому микроорганизму в составе биологического материала, вызы­
вают его свечение в ультрафиолетовом свете, что может быть зарегистрировано
например, с помощью люминесцентного микроскопа. Этот способ обнаружения 
микробных возбудителей получил названия 
прямого иммуноф луоресцент ного
анализа (РИФ).
Этот способ используется не только для обнаружения возбудителей в составе мате­
риала от больного, но и для выявления антител к возбудителю в сыворотке крови 
(серодиагностика). В последнем случае убитую культуру возбудителя обрабатывают 
сывороткой больного с последующим добавлением в систему меченных флюорохро­
мом антител к IgG человека. Наблюдаемое в последующем свечение микроорганизма 
говорит о возникновении сложного иммунного комплекса — микроб + антитела из 
сыворотки больного класса IgG + люминесцирующие анти-IgG МКАТ. Такую реак­
цию называют 
реакцией непрямой иммунофлюоресцепнции
(
РНИФ
).
Другой способ иммуноанализа — 
р а д и о и м м у н н ы й анализ.
Он осно­
ван на использовании моноклональных антител, меченных радиоизотопом. 
Присоединение таких антител к специфичному им объекту, придает последнему 
радиоактивность, что может быть определено с помощью специальных приборов.
Наконец, еще один высоко перспективный способ мечения моноклональных 
антител — с помощью фермента. В качестве последнего чаще всего используют рас­
тительный фермент — пероксидазу хрена. Обработка изучаемого объекта такими 
антителами требует последующего нанесения «хромогена» — субстрата для фермен­
та, меняющего цвет при образовании перекиси. В результате объект для специфи­
ческого присоединения меченых антител приобретает окрашивание, которое может 
быть зарегистрировано спектрофотометром, а метод получил название 
ИФА.
ИФА, как и описанный выше иммунофлуоресцентный анализ, можно воспро­
изводить в виде прямого (выявление антигенов возбудителя в биологическом 
материале) и непрямого (выяваление антител в сыворотке больного) методов. 
В конечном итоге с помощью ИФА можно обнаруживать микроорганизмы в мате­
риале от больного, противомикробные антитела и антитела к другим веществам 
антигенной природы.
С введением в клиническую практику методов иммуноанализа и, в первую 
очередь, аппаратного ИФА, диагностические возможности врача-инфекциониста 
значительно возросли. Особенно это касается серодиагностики, поскольку появи­
лась возможность устанавливать не только наличие антител к тому или иному воз­
будителю в сыворотке крови больного, но и определять принадлежность антител 
к тому или иному классу иммуноглобулинов, что повышает качество диагностики 
инфекционного заболевания. Дело в том, что антитела, принадлежащие разным 
классам иммуноглобулинов, выполняют различные функции (рис. 6.12).
Так, например, известно, что первый контакт человека с тем или иным возбу­
дителем приводит к выработки 
IgM-ант ит ел,
которая продолжается в течение 
примерно одного месяца. Эти антитела имеют большую молекулярную массу и не
ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ 
7 1
ГЛ
А
ВА
6


7 2
М ЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   51   52   53   54   55   56   57   58   ...   664




©engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет