Проба на редуктазу. Является косвенным методом определения общей микробной обсемененности молока, основанном на изменении биохимических показателей. Преимущество этого метода - простота и быстрота проведения анализа по сравнению с бактериологическим исследованием.
Суть этого метода заключается в том, что микроорганизмы, попавшие в молоко, в процессе жизнедеятельности выделяют в окружающую среду, наряду с другими окислительно-восстановительными ферментами, анаэробные дегидразы, которые по старой классификации называются редуктазами. Существует зависимость между общим количеством бактерий в молоке и содержанием в нем редуктазы, что позволяет использовать редуктазную пробу, как косвенный показатель бактериальной обсемененности сырого молока. Фермент редуктаза обладает способностью восстанавливать метиленовую синь, которая при этом обесцвечивается.
Методика: в пробирки наливают 20 мл исследуемого молока и 1 мл рабочего раствора метиленовой сини, закрывают резиновой пробкой, смешивают путем трехкратного переворачивания пробирки (молоко при этом окрашивается в синий цвет). Пробирки помещают в водяную баню при 37 °С.
Наблюдение за изменением окраски ведут через 20 мин, через 2 ч и через 5 ч 30 мин после начала анализа. В чистом свежем молоке фермента редуктазы содержится очень мало, поэтому оно обесцвечивается долго.
В зависимости от времени обесцвечивания метиленовой сини молоко относится к одному из четырех классов в соответствии с ГОСТ. Показатели классификации молока по редуктазе представлены в табл. 2.
Таблица 2
Классификация молока по редуктазе (по Колычеву Н.М., 2010)
Класс
|
Оценка качества молока
|
Продолжительность обесцвечивания
|
Количество бактерий в 1 мл молока
|
1-й
|
Хорошее
|
Свыше 5ч 30 мин
|
Менее 500 тыс
|
2-й
|
Удовлетворительное
|
Свыше 2 ч до 5ч 30 мин
|
От 500 тыс. до 4 млн
|
3-й
|
Плохое
|
Свыше 20мин до2 ч
|
От 4 млн до 20 млн
|
4-й
|
Очень плохое
|
20 мин и менее
|
20 млн и более
|
Достарыңызбен бөлісу: |