Инсулин. Рекомбинатты инсулинді алу Орындаған: Айтқожа Анар Тексерген: Сауранбаева Гульжан

жүктеу/скачать 7,15 Mb.

бет	5/6
Дата	15.01.2023
өлшемі	7,15 Mb.
	#165572

1 2 3 4 5 6

Байланысты:
Айткожа Анар. Инсулин

Рекомбинантты инсулин алу технологиясы келесі сатылардан өтеді

Рекомбинантты ДНҚ

Рекомбинантты ДНҚ-Организмнен тыс рекомбинация әдісі, әр түрдің ДНҚ-ларын (табиғи немесе жасанды) бөліп алып, оларды бір-бірімен қосуды, содан кейін осы рекомбинантты ДНҚ-ны тірі клеткаға енгізіп, жаңа белгінің пайда болуын мысалы, ерекше белок синтезін жүргізуді көздейді
Рестриктазалар – дезоксирибонуклеазалардың ДНҚ молекуласын қысқа немесе ұзын болшектерге тіпті жеке нуклеотидтерге дейін кесетін ферменттердің бір түрі.
Лигаза – ДНҚ-ның бос ұштарын бір-біріне жалғайтын фермент.
Қазір 500-ден аса рестриктаза түрі белгілі және олар ДНҚ-ны бір-бірінен өзгеше 120 жерінен үзе алады. Яғни рестриктазаны тандай отырып ДНҚ-дан қалаған ферментті немесе генді бүлдірмей бүтін күйінде кесіп алады
ДНҚ молекуласының біраз бүлінген жерлерін қалпына келтіруге қатысады.
Қажетті
ген
Донорлық ДНҚ
вк
Клондаушы вектор
Рестриктазамен өндеу
Лигазамен өндеу
Рекомбинантты ДНҚ

Рекомбинантты инсулин алу технологиясы келесі сатылардан өтеді:

- А және В тізбектерді кодтайтын ДНҚ-ның химиялық синтезі;
- осындай нуклеотидтер қатары E.coli-діңбета-галактозидаза ферментінің жарты молекуласын кодтайтын lacZ геніне ендіріледі, lacZ ген pBR322 плазмида құрамында кездеседі;
- әр бір lacZ геномы және А (немесе В) тізбегі бар плазмиданы E. сoli бөлек штамдарына ендіреді;
- өндіруші штамдарды екі бөлек биореакторларда дақылдандырады – трансформацияланған E. coli ковалентті байланысқан рекомбинантты нәруыздар молекуласын (А немесе В-тізбектері) түзетін химерлі нәруыздар мен эшерихийлердің өзіндік нәруыздары;
- бөліп алынған химерлі нәруыздарды метионин қалдығы бойынша нәруыздарды ажырататын бромцианмен өндейді. Әрі қарай А және В тізбектері бета-галактозидаза фермент нәруызынан ажыратылады да тазартылады;
- тазартылған А және В тізбектерін дисульфидті байланыспен қосады, инсулиннің екі тізбекті биологиялық активті мономері алынады.

Бұл препарат клапандар мен насостар жүйесінен құралған, нақты белгілі бағдарлама бойынша реакциялық қоспаға нуклеотидтер мен реагенттерді енгізеді, нәтижесінде өсіп бара жатқан нуклеотидтер тізбегіне қажетті мономерлі бірліктерді қосуын қамтамасыз етеді. Биологиялыққа қарағанда ДНҚ-ның химиялық синтезі барысында тізбектің 5-штрих гидроксильді соңына әрбір жаңа нуклеотидті біріктіруге (қосуға) болады. Осындай барлық реакциялар компьютерлік бағдарламалармен жабдықталған бір реакциялық колонкада бір ізділікпен өтеді.

жүктеу/скачать 7,15 Mb.

Достарыңызбен бөлісу:

1 2 3 4 5 6