Казакстан республикасының білім және ғылым министрлігі
Гибридомаларды алу және моноклоналды антиденелерді бөліп алу кестесі
жүктеу/скачать 0,72 Mb.
|
stud.kz-74553
- Бұл бет үшін навигация:
- 1 сүрет. Гибридомаларды алу және моноклоналды антиденелерді бөліп алу кестесі
| Гибридомаларды алу және моноклоналды антиденелерді бөліп алу кестесі:
Антиген еңгізу. Көк бауырдың жасұшаларын алу (108). Миеломды жасұшаларды алу (107). ПЭГ 4000 ортасында жасұшаларды қосу. ГАТ ортасында гибридомаларды іріктеу. Клондарды бөліп алу. Дақылды суйықтықты антиденелер болуына тексеру. Пассаждарда реклондау. Дақылды суйықтықтан моноклоналды антиденелерді бөліп алу. Клонды -70 градуста сақтау. Асциттік ісік алу. № 1 сүрет. Гибридомаларды алу және моноклоналды антиденелерді бөліп алу кестесі Тышқандардың ішіне бір неше рет көп уақыт минерал майларымен әсер етіп, олардың ағзаларында миелома тұдырып, жұмысқа жарамды миеломды жасұшаларды алады. Осы жасұшаларды әдейленген зертханаларда да алады. Клондау жұмыстарын жалғастыру үшін ГАТ ортасына қоректік жасұшалар ретінде 500 мл ортаға 108 көкбауыр жасұшаларын және 106 перитонеалды жасұшаларды салады. Суспензияны 1 мл-ден 96-ұялы панельге құйып көмірқышқыл инкубаторда 37 градуста ұстайды. Әр бір үш тәүліктен кейін ортаны ауыстырып отырып, жасұшалардын өмірге жарамдығын тексереді. Дақылды суйықтықта секреттейтін клон болса моноклоналды антиденелер жаратылады. Іріктеліп алынған гибридоманың клонын келесі микродақылдарда реклондайды. Дақылды суйықтықтың құрамында моноклоналды антиденелер болса, оларды эксперименттерде, иммунодиагностикумдарды дайындау үшін биотехнологиялық үдірістерде қолданады. Жұмыстарды ұйымдастыру және қолданылатын құрал-жабдықтар. Гибридомаларды алу жұмыстарын бөлек бөлмеде өткізеді. Келесі құрал-жабдықтар болу керек: Ламинарлы бокс. Бір белгілі мөлшерде ылғалды, температураны, көмірқышқыл газды ұстап тұратын инкубатор. Центрифуга. Микроскоптар. +4 және -200 градус ұстайтын холодильник. +37 және +560 градуста жұмыс істейтін су моншасы. Осыдан басқа бөлек бөлмеде жасұшалар сақтау үшін -700 градусты тоңазытқыш және суйық азоты бар Дьюар ыдысы болу керек. Гибридомаларды алу үшін жасұшалардың дақылдарына арналған әдейленген пластикалы ыдыстарды дайындап қою керек. Олар: түбі тегіз 96-ұялы планшеталар, 24-ұялы планшеталар, көлемі 25, 75 см2 пластикалы ыдыстар, культивирлеуге арналған орталар, керекті реактивтер. Экспериментке жануарды таңдау. Иммунизацияға тышкандармен және егеу құйрықтылармен қолданады. Осы жануарлардың ағзаларында миеломды жасұшалар жақсы өседі. Басқа жануарлармен қолданбайды. жүктеу/скачать 0,72 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|