Омарова аккенже бердихановна
СТ НАО 990240005606-001-2019
жүктеу/скачать 8,57 Mb. Pdf көрінісі
|
Диссертация
| СТ НАО 990240005606-001-2019
Для проверки на патогенность смывы из чашек засевают на МПБ, МППБ и среду Сабуро по 2 пробирки в соответствии с требованиями ГОСТ 28085 . Суточную культуру из МППБ вводят двум кроликам по 4 мл подкожно; 4 морским свинкам, двум по 2 мл подкожно, а двум по 1,0 мл внутримышечно в обе задние лапки; а также 5 белым мышкам по 0,5 мл подкожно. Культуру из МПБ и среды Сабуро вводят белым мышам подкожно (по 5 мышек на каждую среду). Наблюдение за животными ведут в течение 10 дней. Все животные должны остаться живыми. При получении отрицательных результатов серию препарата проверяют на удвоенном количестве образцов и животных. При повторении отрицательных результатов серию бракуют. При микроскопии взвеси препарата и в мазках, окрашенных по Грамму, должны содержаться клетки, характерные для культуры бактерий Lactobacillus helveticus 5-2M и Lactobacillus brevis 8-6 М 6.7 Определение безвредности 6.7.1 Аппаратура, материалы, реактивы иглы инъекционные с наплавленной оливой 1 – 1,5 мм – ГОСТ 25377; шприц медицинский - ГОСТ 22967; спирт этиловый – ГОСТ 5962; вата медицинская – ГОСТ 5556; мыши белые массой 18-20 г. 6.7.2 Подготовка к испытаниям Навеску препарата предварительно растворяют стерильным 0,9% раствором хлорида натрия из расчета 2,0 мл растворителя на один грамм препарата, взбалтывают. 6.7.3 Проведение испытания Для проведения испытания отбирают пять белых мышей массой 18-20 г и вводят однократно через рот по 0,5 смі приготовленной взвеси препарата. Препарат считают безвредным, если все мыши остаются живыми и клинически здоровыми в течение 10 сут. В случае гибели хотя бы одной мыши испытания повторяют на удвоенном их количестве. В случае гибели животных при повторном испытании, серию препарата бракуют. 6.8 Определение антагонистической активности препарата 6.8.1 Аппаратура и материалы по 6.4.1; 6.4.2 6.8.2 Подготовка к испытанию Флаконы открывают в стерильных условиях и сухую микробную массу растворяют 0,9 % раствором хлорида натрия из расчета 10 мл на 1 дозу препарата. После растворения 0,1 мл микробной взвеси переносят в пробирку со средой МРС-1 и инкубируют двое суток при температуре 37 єС. Двухсуточную культуру высевают штрихом по диаметру чашки Петри со средой МРС-5 петлей диаметром 3-4 мм. После 4-суточного инкубирования при 37 0 С на чашки подсевают индикаторные культуры, предварительно выращенные в течение 6 часов на мясо-пептонном бульоне (рН 7,2-7,4), Посев проводят петлей (диаметром 1,5 -2,0 мм) штрихом в направлении от зоны роста исследуемой культуры, не касаясь ее и перпендикулярно ей. 6.8.3. Обработка результатов Учет результатов проводят через сутки инкубирования при 37 °С по величине зоны отсутствия роста индикаторной культуры на 2,0 см и более характеризует высокую антагонистическую активность. Контролем роста тест-культуры служит их параллельный посев на чашки с той же средой (МРС-5) без испытуемой культуры. Годным считают серии препарата, которые со всеми тест-штаммами дают зону |