Программа по дисциплине; Приложение №1 к рабочей программе «Тематический план лекций»
Вопросы для самоконтроля Свойства антигенов
жүктеу/скачать 4,1 Mb.
|
Вопросы для самоконтроляСвойства антигенов.Получение и использование антигенов для диагностики и профилактики. Свойства антител. Получение и использование сывороток для диагностики и лечения. Тема: Серодиагностика бактериальных, вирусных, грибковых и протозойных инфекций. Реакции агглютинации. Цель: Разобрать механизм реакций агглютинации и освоить методики постановки реакций линейной и пассивной агглютинации. Мотивация: Знание механизмов и методик постановки реакций агглютинации необходимо для серологической диагностики бактериальных, вирусных, грибковых и протозойных инфекций. Основные понятия, которые должны быть усвоены студентами в процессе изучения темы: иммунные реакции; титр антител; реакции агглютинации; О  сновные вопросы, разбираемые на занятии:
Механизм реакций агглютинации. Виды реакций агглютинации (ориентировочная, линейная, ускоренная). Реакция пассивной гемагглютинации. Реакция торможения гемагглютинации. Реакция агглютинации с флюоресцирующими антителами. Использование реакций агглютинации. Диагностические критерии серодиагностики • Диагностический титр - величина титра антител в сыворотке крови к конкретному возбудителю, превышение которой расценивается как диагностический признак. • Нарастание титра антител - не менее чем 4х - кратное увеличение титра антител к данному возбудителю, наблюдающееся при исследовании парных сывороток (сывороток взятых у больного с интервалом 7-10 дней). Более достоверный критерий серодиагностики.
При взаимодействии антител и корпускулярных антигенов (микробные или другие клетки) в растворе электролита происходит склеивание (агглютинация) антигенов. Ингредиенты: 1. Антитела - находятся в сыворотке обследуемого человека. Сыворотку разводят физиологическим раствором от 1:40 до 1:1600 2. Антигены - диагностикумы. Добавляют в каждое разведение.
Электролит - 0,9% раствор NaCl. «+» феномен агглютинации - образование хлопьев. «-» феномен агглютинации - равномерная муть.
Реакция, в которой происходит склеивание эритроцитов с нагруженными на них антигенами (эритроцитарный диагностикум) или антителами (иммунодиагностикум) в присутствии электролита. Эритроциты в РНГА служат "укрупнителями" для придания молекулярным антигенам корпускулярности. Инградиенты: 1. Антитела - находятся в сыворотке обследуемого человека. Сыворотку разводят физиологическим раствором от 1:10 до 1:160 2. Антигены – эритроцитарный диагностикум. Добавляют в каждое разведение. 3. Электролит - 0,9% раствор NaCl.   «+» феномен РНГА - "зонтик"
«-» феномен РНГА - "пуговка" ПРОТОКОЛЫ ЛАБОРАТОРНЫХ РАБОТ Реакция линейной агглютинации с одним антигеном Оснащение: 7 пробирок, диагностикум, физраствор, сыворотка больного в разведении 1/100, пипетки Схема постановки реакции
Выдержать в термостате при 37°С 2 часа, затем при комнатной температуре - 18 часов. Учет результатов: ++++ полная агглютинация, жидкость прозрачная, большой осадок +++ большой осадок, жидкость мутная ++ незначительней осадок, жидкость мутная + взвесь равномерно мутная, отсутствует осадок. Результат: . Вывод: При постановке реакции линейной агглютинации с___________________________антигеном титр антител в сыворотке больного составил__________________, что свидетельсьвует о ______________________________________________________________. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) Оснащение: Пластина для РПГА, эритроцитарный диагностикум, сыворотка больного в разведении 1/10, пипетки, физраствор. Схема постановки реакции
Реакция протекает при комнатной температуре. Учет реакции через 30-40 минут: ++++ осадок эритроцитов в виде зонтика +++ на фоне склеившихся эритроцитов кольцо из осадка ++ выраженная агглютинация и ясно видимый осадок эритроцитов + и - оценивается как сомнительный результат Результат: _____________________________________________________________________________ Вывод: При постановке реакции пассивной гемагглютинации с___________________________антигеном титр антител в сыворотке больного составил______________________________, что свидетельствует о ___________________________________________________________. жүктеу/скачать 4,1 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|