Программа по дисциплине; Приложение №1 к рабочей программе «Тематический план лекций»


Вопросы для самоконтроля Свойства антигенов



бет7/20
Дата26.06.2018
өлшемі5,04 Mb.
түріПрограмма
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   ...   20

Вопросы для самоконтроля

  1. Свойства антигенов.


  2. Получение и использование антигенов для диагностики и профилактики.

  3. Свойства антител.

  4. Получение и использование сывороток для диагностики и лечения.


Тема: Серодиагностика бактериальных, вирусных, грибковых и протозойных инфекций. Реакции агглютинации.

Цель: Разобрать механизм реакций агглютинации и освоить методики постановки реакций линейной и пассивной агглютинации.

Мотивация: Знание механизмов и методик постановки реакций агглютинации необходимо для серологической диагностики бактериальных, вирусных, грибковых и протозойных инфекций.

Основные понятия, которые должны быть усвоены студентами в процессе изучения темы: иммунные реакции; титр антител; реакции агглютинации;

Основные вопросы, разбираемые на занятии:

  1. Механизм реакций агглютинации.

  2. Виды реакций агглютинации (ориентировочная, линейная, ускоренная).

  3. Реакция пассивной гемагглютинации.

  4. Реакция торможения гемагглютинации.

  5. Реакция агглютинации с флюоресцирующими антителами.

  6. Использование реакций агглютинации.


Диагностические критерии серодиагностики

Диагностический титр - величина титра антител в сыворотке крови к кон­кретному возбудителю, превышение которой расценивается как диагностиче­ский признак.

Нарастание титра антител - не менее чем 4х - кратное увеличение титра анти­тел к данному возбудителю, наблюдающееся при исследовании парных сыворо­ток (сывороток взятых у больного с интервалом 7-10 дней). Более достоверный критерий серодиагностики.

Реакция агглютинации (РА)

Принцип метода:

При взаимодействии антител и корпускулярных антигенов (микробные или другие клетки) в растворе электролита происходит склеивание (агглютинация) антигенов.



Ингредиенты:

1. Антитела - находятся в сыворотке обследуемого человека. Сыворотку разводят физиологическим раствором от 1:40 до 1:1600

2. Антигены - диагностикумы. Добавляют в каждое разведение.


  1. Электролит - 0,9% раствор NaCl.

«+» феномен агглютинации - образование хлопьев.

«-» феномен агглютинации - равномерная муть.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

Принцип метода:

Реакция, в которой происходит склеивание эритроцитов с нагруженными на них антигенами (эритроцитарный диагностикум) или антителами (иммунодиагностикум) в присутствии электролита. Эритроциты в РНГА служат "укрупнителями" для придания молекулярным антигенам корпускулярности.



Инградиенты:

1. Антитела - находятся в сыворотке обследуемого человека. Сыворотку разводят физиологическим раствором от 1:10 до 1:160

2. Антигены – эритроцитарный диагностикум. Добавляют в каждое разведение.

3. Электролит - 0,9% раствор NaCl.


«+» феномен РНГА - "зонтик"

«-» феномен РНГА - "пуговка"



ПРОТОКОЛЫ ЛАБОРАТОРНЫХ РАБОТ

Реакция линейной агглютинации с одним антигеном

Оснащение:

7 пробирок, диагностикум, физраствор, сыворотка больного в разведении 1/100, пипетки



Схема постановки реакции

Разведения

1/100

1/200

1/400

1/800

1/1600

Контроль АТ

КонтрольАГ

Физ.р-р

-

1,0

1,0

1,0

1,0

-

1,0

Сыворотка больного 1/100

1,0

1,0

По 1,0







1,0

-

Диагностикум











-



Выдержать в термостате при 37°С 2 часа, затем при комнатной температуре - 18 часов.

Учет результатов:

++++ полная агглютинация, жидкость прозрачная, большой осадок

+++ большой осадок, жидкость мутная

++ незначительней осадок, жидкость мутная

+ взвесь равномерно мутная, отсутствует осадок.

Результат:



.

Вывод: При постановке реакции линейной агглютинации с___________________________антигеном титр антител в сыворотке больного составил__________________, что свидетельсьвует о ______________________________________________________________.


Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Оснащение:

Пластина для РПГА, эритроцитарный диагностикум, сыворотка больного в разведении 1/10, пипетки, физраствор.



Схема постановки реакции

Разведение

сыворотки



1/10

1/20

1/40

1/80

1/160

Контроль

антигена


Физ.р-р

-











Сыворотка

больного в разведении 1/10







-


Сенсибилизированные эритроциты








Реакция протекает при комнатной температуре. Учет реакции через 30-40 минут:

++++ осадок эритроцитов в виде зонтика

+++ на фоне склеившихся эритроцитов кольцо из осадка

++ выраженная агглютинация и ясно видимый осадок эритроцитов

+ и - оценивается как сомнительный результат

Результат: _____________________________________________________________________________



Вывод: При постановке реакции пассивной гемагглютинации с___________________________антигеном титр антител в сыворотке больного составил______________________________, что свидетельствует о ___________________________________________________________.



I. до начала работы
Механизм противовирусного иммунитета
Общие принципы лабораторной диагностики
Протокол лабораторной работы
Тема: роль микроорганизмов в развитии кариеса
Общая и частная вирусология
Частная бактериология



Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   ...   20


©engime.org 2017
әкімшілігінің қараңыз

енгізу | тіркеу
    Басты бет


материалдарды жүктеу