С. В. Кожанова Жалпы иммунология
ФАГОЦИТТІК БЕЛСЕНДІЛІКТІ АНЫҚТАУ
жүктеу/скачать 19,87 Mb. Pdf көрінісі
|
Жалпы иммунология оқулық
- Бұл бет үшін навигация:
- Серпілістің койылуы.
| ФАГОЦИТТІК БЕЛСЕНДІЛІКТІ АНЫҚТАУ
Фагоциттік жүйені бағалауға арналған ен информативті фагоциттік индекс, фагоциттік сан (нейтрофилдердін жұту кабілетін көрсетеді) және бактерицидтік индекс (нейтрофилдердін корыту кабілетін көрсетеді) болып табылады. Фагоциттік индекс (ФИ) — жалпы санынан фагоцитозға ұшыраған жасушалар салыстырмалы саны. Фагоциттік сан (ФС) — бір нейтрофилмен жұтылған бактериялар- дың немесе латекстін орташа саны. Сонымен қатар, спонтанды жэне белсендірілген фагоцитоз сынама- лары латекстін бөлшегін колдану аркылы жүргізіледі. Латекс пен фа- гоцитоз нейтрофилдердін латекс бөлшегін жұтуға негізделген (адгезия, ұстап алу және толык жұту). Серпілісті жүргізу кезінде, шеткі каннан алынған лейкоциттерді латекс бөлшегінін суспензиясымен араластырады; калыптастырылған фагоцитоз серпілісін жүргізу кезінде алынған коспаға пирогенал ерітіндісін косады. 30 мин бойы 37 °С инкубацияланғаннан кейін жағынды дайындап, бекітілген және Романовский-Гимза бояуы- мен боялған жағындыда латексті жұткан нейтрофилдердін пайызын есептейді. Нитрокөк тетразолийдің қалпын ауыстыру сынамасы — НКТ-сына- масы оттегінің белсенді түрінін көмегімен кан лейкоциттері аркылы нитрокөк тетразолиін диформазанға қалыптастыруға негізделген. Бұл кезде фагоциттерде киллинг бактерияны ортактастыратын, нитрокөк тетразолиінің алғашындағы сары түсінің көк-күлгін түске (ядроішілік косындылар — диформазан түстері) өзгертетін ферменттердің кабілетін колданады. Серпілістің койылуы. Майсыз заттык әйнекке 0,02 мл 0,9% натрий хлорид ерітіндісін, 0,02 мл нейтрофилді және 0,02 мл 0,75% НКТ (нитрокөк тетразолиі) ерітіндісін жағады. Күштеме ретінде 1:10 ерітіндіде граммтеріс бактериясының Е. соіі коммерциялык липополисахаридін немесе пирогенал (липополисаха- рид 5. турһі) ерітіндісін колданады. Баска майсыз әйнекке 0,02 мл Л ПС, 0,02 мл нейтрофилдік коспасын және 0,02 мл 0,75% НКТ ерітіндісін жағады. 30 мин ылғалды камераға орналастырады. Жағынды дайын- дап, кұрғатып, бекітеді. 0,1% нейтралды кызыл ерітіндісімен бояйды. Калпы ауыскан НКТ (көк түсті диформазанға) грануласымен лейко- циттер пайызын есептеу аркылы нейтрофилді аныктайды. 23-Тарау. Иммундық диагностика принциптері мен әдістері 529 жүктеу/скачать 19,87 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|