1. Оптимальные условия действия амилазы - фермента, расщепляющего крахмал: рН 6,8; t = 37°С. Как изменится активность фермента в каждом из следующих случаев ( - уменьшится; - увеличится)? Укажите причину изменения активности.
1. рН инкубационной среды равен 5.
2. Температура инкубации 70°С.
3. В инкубационную среду добавлен раствор CuSO4 (PbSO4).
4. В присутствии CuSO4 (PbSO4) в среде увеличена концентрация крахмала.
2.Препарат, содержащий 2,0 мг аргиназы, за 10 мин при t=38°C и рН 9,0 катализировал образование 30 мкмоль мочевины. Рассчитайте удельную активность аргиназы. Объясните, как и почему изменится ( - уменьшится или - увеличится) активность фермента, если:
а) инкубационную среду подкислить до рН 5,0;
б) в среду добавить гликоциамин
(NH2 -С-NH-CН 2 -СООН);
NH
в) в присутствии гликоциамина увеличить в среде концентрацию аргинина.
3. Холинэстераза при оптимальных условиях (рН= 8,4 и t =370С) в течение 15 мин катализирует гидролиз ацетилхолина с образованием 100 ммоль холина и уксусной кисдоты. Рассчитайте активность фермента. Объясните, как и почему изменится ( или ) активность фермента, если:
1) температуру инкубационной среды изменить от 5 до 40°С;
2) в инкубационную среду добавить прозерин;
3) в присутствии прозерина повышать концентрацию ацетилхолина.
4. Фермент тромбин, образующийся из протромбина плазмы крови, гидролизует пептиды, амиды и сложные эфиры L-орнитина. Напишите структурную формулу этилового эфира L -орнитина и уравнение реакции его гидролиза.
5. Выберите и запишите последовательность событий (например: 324...), происходящих при аллостерическом ингибировании активности фермента.
1. Уменьшается скорость ферментативной реакции.
2. Изменяется конформация фермента.
3. Эффектор присоединяется в активном центре.
4. Изменяется конформация аллостерического центра.
5. Нарушается комплементарность активного центра субстрату.
6. Эффектор присоединяется в аллостерическом центре.
7. Изменяется конформация активного центра.
6. Рассмотрите схему метаболического пути, в котором предшественник с помощью ряда реакций превращается в продукт F, причем каждая стадия процесса катализируется специфическим ферментом (E1, E2 и т. д.):
E1 E2 E 3 E4 A B C D F
↓
АДФ + Фн → АТФ
Значение этого процесса - синтез макроэргического соединения АТФ - универсального поставщика энергии в клетке. Однако, если АТФ не расходуется для энергетических нужд клетки, соединение С не образуется даже при наличии предшественников.
A. Что является причиной этого явления?
Б. Предположите, какой фермент является регуляторным.
B. Укажите основные особенности строения и функционирования ферментов, которые регулируются этим способом.
7. А. Выберите основные особенности строения и функционирования аллостерических ферментов.
1. Являются ключевыми ферментами метаболических путей.
2. Имеют пространственно разделенные активный и peгуляторный центры.
3. Как правило, являются олигомерными белками.
4. Не проявляют регуляторные свойства при диссоциации молекулы на протомеры.
5.При взаимодействии с лигандами происходит кооперативное изменение субъединиц.
Б. Какие из выбранных особенностей строения и функционирования аллостерических ферментов подтверждают следующие данные?
Обнаружено, что кратковременное выдерживание болыпинства аллостерических ферментов при температуре выше комнатной (50-60°С) приводит к потере чувствительности к действию аллостерических эффектов при сохранении ферментативной активности. Например: аспартаткарбамоилтрансфераза (молекула состоит из 12
протомеров) после выдерживания в течение 4 мин при 60°С теряла чувствительность к ингибитору (ЦТФ) при сохранении ферментативной активности. При этом происходила диссоциация фермента на отдельные протомеры.
8. Фермент ацетилхолинэстераза катализирует гидролиз ацетилхолина - нейромедиатора выделяющегося в синапсах холинэргических нервов. Продукты его распада - ацетат и холин - неспособны действовать как нейромедиаторы.
Фосфоорганические соединения типа диизопропилфторфосфата ингибируют фермент, взаимодействуя с ОН-группой серина в активном центре фермента. Большинство этих веществ является сильными
ядами. Некоторые, например фосфакол, применяют в качестве лекарственных средств.
Фосфакол: