4. Бастапқы зат мөлшері (ұзақ ретті тізбекті амплификациялау мүмкін емес)
4. Бастапқы зат мөлшері (ұзақ ретті тізбекті амплификациялау мүмкін емес)
5. Алдын-ала алынған мәлімет(бүйірлік аймақтардың тізбегінің реті алдын-ала білу қажет)
6. Контаминация(реакция үшін сынаманың абсолютті тазалығы қажет)
7. Репликацияның сенімділігі(қателерді түзету жүйесінің болмауы жаңа мутациялардың кездейсоқ пайда болуына әкелуі мүмкін).
ПТР қолданылады:
Молекулалық биологияның заманауи әдісі ретінде полимеразды тізбекті реакцияны қолдану салалары әртүрлі. ПТР негізгі қолдану аясы:
- Клиникалық медицина
- Жұқпалы аурулардың диагностикасы
- Тұқым қуалайтын ауруларды диагностикалау
мутацияны анықтау
- Генотиптеу
- Жасушалық технологиясы
- Генетикалық төлқұжаттарды құру
ПТР тұқым қуалайтын және вирустық ауруларды диагностикалауды едәуір жеделдетуге және жеңілдетуге мүмкіндік береді. Қажетті ген ПТР арқылы тиісті праймерлермен амплификацияланып, мутацияны анықтауға жүйеленген. Вирустық инфекцияны жұққанан кейін, аурудың белгілері пайда болғанға дейін бірнеше апта немесе бірнеше ай бұрын анықтауға болады.
Медицинада ПТР тиімді қолданылады:
- Пульмонологиялық тәжірибеде - пневмонияның, туберкулездің бактериалды және вирустық түрлерін ажырату үшін.
- Гематологияда онковирустар мен цитомегаловирус инфекциясын анықтау үшін.
- Вирустық гепатит, дифтерия, сальмонеллез сияқты жұқпалы ауруларды жедел диагностикалауда.
ПТР анализі үлгілерде қанша вирустың бар екенін анықтауға мүмкіндік береді. Осылайша, вирустық жүктеме деп аталатын вирустық инфекцияның ауырлығы анықталады.
Мұндай жағдайларда, егер ПТР теріс болса, адамның қалаған патологиясы жоқ деп сеніммен айтуға болады
ПТР диагностикасының артықшылығы:
1. Диагностикалық мүмкіндіктердің кеңдігі - ПТР көмегімен вирустық, бактериялық және саңырауқұлақ инфекцияларының барлық түрлерін анықтай аласыз.
2. Қол жетімділік - бүгінгі күні ПТР кез-келген жеке немесе мемлекеттік клиникада жүзеге асырылады.
3. ПТР талдау үшін кез-келген тін немесе биологиялық сұйықтық үлгілерін қолдана алады.
4. ПТР - өте дәл әдіс.
5. ПТР серологиялық әдістерге қарағанда патогенді өзі анықтайды. (Серологиялық әдістер қан сарысуындағы қоздырғышқа антигендер мен антиденелерді анықтауға негізделген. Ол үшін инфекция пациенттің денесінде біраз уақыт болуы керек. ПТР бұл кемшілікке ие емес).
6. ПТР - өте ерекше әдіс. Оның жалған-оң немесе жалған-теріс нәтижелер сияқты кемшіліктері жоқ. Полимеразды тізбектік реакция әдісіндегі қателіктер адам факторына байланысты болады.