64 радиационный контроль объектов ветеринарного надзора республики татарстан
жүктеу/скачать 414,88 Kb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Материалы и методы.
| Ключевые слова:
чувствительность к антибиотикам, in vitro, осетровые, псевдомоноз, возбудитель болезни, УЗВ. Key words: sensitivity to antibiotics, in vitro, sturgeon, pseudomonosis, infecting agent, IСWS. Существующий стереотип, что рыбы, выращиваемые в установках замкнутого водоснабжения (УЗВ), не подвержены к болезням, не соответствует действительности. И даже в таких конролируемых условиях, как УЗВ, регистрируются заболевания различного характера, в том числе инфекционного. Среди широко распрастраненных патологии осетровых в условиях УЗВ является псевдомоноз, наносящий значительный ущерб рыбоводческим хозяйствам [2, 3]. На сегодняшний день основным сдер- живающим фактором развития данной пато- логии является антибиотикотерапия [1]. Представленный на фармацевтическом рынке широкий ассортимент антибиотиков еще не обеспечивает успешного лечения бак- териальных инфекций без определения чувст- вительности возбудителя к антибиотикам in vitro , поэтому возрастает ее роль при выборе наиболее эффективного антимикробного пре- парата (АМП) [5, 7]. В связи с этим проведение сравнитель- ного анализа чувствительности возбудителя псевдомоноза к различным антибиотикам in vitro явилось основной целью наших исследо- ваний. Для достижения данной цели были по- 65 ставлены следующие задачи: – выявить возбудитель инфекционной патологии; – определить их чувствительность к ан- тибиотикам in vitro . Материалы и методы. Практический и производственный опыт производился на базе центра аквакультуры и НИИ биотехнологии и природопользования Западно-Казахстанского аграрно-технического университета имени Жангир хана. Материалом исследований послужили смывы из области поражения больных инфекционной патологией сибирских осетров (Acipenser baerii). Исследованию по оценке антибиотико- чувствительности подлежат чистые культуры микроорганизмов после первичного посева образца клинического материала, в послед- нем случае параллельно необходимо провес- ти идентификацию культуры [6]. Бактериологические исследования про- изведены по общепринятым методам. Исход- ный материал высевалась на среду МПА для последующего выделения чистой культуры возбудителя. Посевы культивируют в термо- стате в течение 24 часов при температуре 37 о С. Изучение морфологических, и тинкто- риальных признаков микроба проводилось путем микроскопии фиксированных и окра- шенных по Граму препаратов, а также живых неокрашенных микроорганизмов в раздавлен- ной капле [4]. Далее проведен посев на МПБ, чтобы приготовить бактериальную суспензию для инокуляции. Продолжительность инкуба- ции 18 часов при 37 о С. Чувствительность бактерий к антибио- тикам in vitro определяли диско- диффузионным методом, при котором в каче- стве носителя АМП используют бумажный диск. Стандартный инокулюм наносят пи- петкой на поверхность чашки Петри со сре- дой АГВ в объеме 1 мл, равномерно распре- деляют по поверхности покачиванием, после чего удалили избыток инокулюма пипеткой. Непосредственно после аппликации дисков чашки Петри помещают в термостат кверху дном и инкубируют при температуре 37°С в течение 24 ч. Увеличение интервала времени между нанесением дисков на по- верхность среды и началом инкубации при- водит к «преддиффузии» АМП в агар и к увеличению диаметра зоны подавления рос- та, что приведет к искаженному результату. Результат учитывают путем измерения диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах. Чашку Петри помещают кверху дном на тем- ную матовую поверхность, так чтобы свет падал на нее под углом 45° (учет в отражен- ном свете). Диаметр зон задержки роста из- меряют с точностью до 1 мм. Интерпретация результатов исследова- ний. Наличие зон диаметром до 10 мм или полное отсутствие зон задержки роста микро- бов вокруг диска указывают на то, что испы- туемая культура устойчива к данной концен- трации антибиотика. Наличие зон диаметром от 10 до 14 мм свидетельствует о малой чувствительности культуры к данной концентрации антибиоти- ка. Диаметр зоны от 15 до 25 мм – испы- туемая культура чувствительна к данной кон- центрации антибиотика. Если диаметр зоны подавления роста от 25 мм и более, то бактерий высокочувстви- тельны к действию антибиотиков. жүктеу/скачать 414,88 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|