А. Д. Нурахова, Л. Т. Ералиева клиникалық лабараториялық диагностика бойынша ұлттық Әдістеме

Талдаулар өндірісінің технологиялық процесінің аналитикалық бөлігінің маңызды сәті автооанализаторларды калибрлеу болып табылады. Анализатордың калибрленуінің қаншалықты дұрыс болуына көбінесе сапа, ең алдымен, зерттеу нәтижелерінің дәлдігі байланысты. Бұл технологиялық операцияның сапасына алдыңғы технологиялық операцияға калибраторлар мен реактивтердің дұрыс дайындалуына үлкен әсер етеді.

Калибрлеу-әдетте ең қымбат зертханалық рәсім. Талдаулардың жалпы құнындағы оның үлесі, ең алдымен, осы әдіспен орындалатын зерттеулердің санына, сондай-ақ қолданылатын Реактивтердің тұрақтылығына, калибрлеу материалдарының бағасына және осы әдісті калибрлеу желілік немесе сызықсыз болып табылатынына байланысты. Калибрлеудің технологиялық операциясын жүргізе отырып, біз екі мақсатқа жетуді көздейміз: 1) биопробты зерттеу кезінде алынатын заттардың жоғары және төмен концентрациясының дұрыстығына көз жеткізу; 2) Сынамадағы заттың концентрациясын анықтау, одан жоғары талданатын биоматериалдың аз көлемін немесе оны сұйылтуды қолдану қажет. Әрбір аналитикалық әдіс үшін калибрлеу хаттамасын ресімдейді. Калибрлеу ХАТТАМАСЫ бірлі-жарым калибрлеу стандартпен салыстыруға негізделген әдістерді қолдану кезінде, сондай-ақ калибрлеу стандарттары мен калибрлеу қисығының жекелеген учаскелері үшін факторды есептеу кезінде ресімделеді.

Гематологиялық талдағыштарға қатысты "калибрлеу" термині сәтсіз, себебі шын мәнінде, бұл жасушалар есебінің дұрыстығын тексеру туралы ғана айтылады. Қан жасушаларының дұрыс есептелуін бақылау үшін арнайы консервілеу әдісімен дайындалған тұрақтандырылған қанды жиі қолданады. Клеткаларды дұрыс есептеу үшін гематологиялық анализаторды теңшеу қажет, есептеуіштің тогы оңтайлы болып табылады, ал дискриминация деңгейі электрондық Шу мен импульстердің барлық фондық мәндерін кемсітудің белгіленген шегіне қарағанда аз мөлшердегі бөлшектерден ажыратады.

Калибрлеу үшін ағынды цитофлюориметра пайдаланады калибратор білдіретін суспензияны латекс бөлшектердің, меченных флюоресцеинизоцианатом және фитоэритином. Егер суспензияға зерттеу жүргізілгеннен кейін алынған мәліметтер компьютер жадында сақталатын цитофлюориметрдің жұмыс хаттамасына қойылса, онда калибрлеу қабылданады. Олай болмаған жағдайда калибрлеуді қайталайды және қажет болса, цитофлюориметрдің жұмыс хаттамасын өзгертеді.

Калибрлеу және зерттеу жүргізу кезінде цитофлюориметр өндіруші фирманың реактивтерін пайдалану қажет.

Биохимиялық және иммуноферменттік анализаторларды калибрлеу

Биохимиялық және иммуноферментті автоанализаторлармен жұмыс істеу кезінде калибрлеудің әртүрлі түрлері — сызықтық және сызықты емес қолданылуы мүмкін. Калибрлеу калибрлеу коэффициентінің (калибрлеу факторының) немесе калибратордың көмегімен орындалуы мүмкін. Калибрлеуді биопроб зерттелетін сол әдістермен және жағдайларда жүргізеді. Зерттеудің сапалы нәтижелерін қамтамасыз ету үшін калибрлеудің әрбір түрін қолдану нұсқаулықтарда қатаң айқындалуы тиіс.

Анализаторды калибрлеу кезінде калибратор бойынша сызықтық калибрлеудің екі нұсқасы кездеседі: "бір нүктеден" және "сызықтық регрессия". Егер әдісті пайдалану кезінде нәтижелердің жеткілікті сызығына жету қиын болса, жеткілікті сызықпен калибрлеу қисығының учаскесін таңдауға болады. Сызықты емес калибрлеу қисығы математикалық линеаризациялауды (логарифмдауды) талап етеді. Калибрлеу түрін талдағыш мәзірінен таңдауға болады.

"Бір нүктеден" калибрлеу кезінде калибрлеу коэффициенті калибратордың абсорбциясы және оның белгілі концентрациясы бойынша анализатордың компьютері есептейді. Анализатордың компьютері осы өлшемнің негізінде калибрлеу қисығын жасайды, ол сызықтық болып табылады және "х" және "γ"осьтерінің қиылысу нүктесі арқылы өтеді. Нөлдік мән оптикалық белсенді зат болмаған кезде абсорбция шамасы болып саналады. Калибрлеу қисығы оптикалық белсенді затпен не болып жатқандығына байланысты жоғары және төмен бағытталуы мүмкін, яғни немесе кемуі бойынша зерттелетін компоненттің шоғырлануы (белсенділігі) туралы ұйғарынды. Қазіргі анализаторлар реакция бағытын өзі анықтайды. Нөлдік калибратор ретінде реактивтерге "бос" сынама (реактивтер бланкісі) жиі қолданылады.

"Сызықтық регрессия" бойынша Калибрлеу сирек қолданылады. Бұл жағдайда калибрлеу қисығы графиктің нөлдік мәнінен өтпейді, яғни Х = 0 қисық "х"осінен жоғары (төмен) өтеді. Калибрлеудің осы түрінде кем дегенде 2 калибратор қолдану керек, олардың біреуі х = 0 кезінде γ шамасын анықтау үшін қажет. Бұдан әрі бұл тұрақты шама түпкілікті нәтижені есептеу үшін пайдаланылатын болады. "Сызықтық регрессия" бойынша калибрлеу кезінде 6 калибраторға дейін қолданылуы мүмкін. Калибраторлардың мұндай үлкен саны турбидиметриялық өлшеулерде жиі болатын тік сызықты тәуелділіктің ықтимал өзгерістерін ұстау үшін талап етіледі.

Егер калибрлеу қисығы сызықсыз сипатта болса, онда бұл жағдайда кем дегенде 5 калибратор және бос сынама қолданылады.

Талдау нәтижелерінің сапасын қамтамасыз ету үшін калибрлеу жиілігі бар. Қазіргі уақытта талдағышты қайта калибрлеу аралығын таңдау толық шешілмеген мәселе болып қала береді. Бірқатар жағдайларда қайта калибрлеу жиілігі реактивтерді өндіруші фирма айқындаған талдағыштағы Реактивтердің сақталу мерзімімен анықталады. Жабық талдау жүйелерінде бұл мерзімдер анализатор бағдарламасына енгізілді. Талдаушының аналитикалық жүйесіне кез келген араласу (шамды, суды ауыстыру, жөндеу) қайта калибрлеу арқылы аяқталуы тиіс. Оны жиі орындау өндіруші фирманың нұсқауларына байланысты немесе сапаны бақылаудың қанағаттанғысыз нәтижелері кезінде қажет. Өндірушінің нұсқауларынан ауытқу, мысалы, ескі ерітінділерді, калибраторларды немесе бақылау материалдарын пайдалану, калибрлеу жиілігі сәйкес келмейтін немесе калибрлеу нүктелерінің санын қысқарту немесе бу сынамаларын жеке сынақтарға ауыстыруға жол берілмейтінін атап өткен жөн. Біз калибрлеу жиілігі өндірушінің пайдасын арттыру үшін негізсіз жоғары деп ойлайтын болсақ да, фирманың нұсқауларынан шегінуге болмайды.

Калибрлеу құны калибрлеу жиілігіне және калибрлеу арасындағы аралықтағы зерттеулер санына байланысты талдаулар үшін шығын материалдарының тікелей құнына салынады. Мысалы: айына екі рет калибрлеу жиілігі кезінде; аптасына 1 рет әдісті пайдалану жиілігі кезінде; 5 талдаудың сызықсыз әдісі сериясының орташа шамасы кезінде; - калибрлеуге Реактивтердің шығысы ма-териалдардың тікелей шығынының құнын 60% - ға арттырады. Бақылау анализдеріне Реактивтердің шығысы 20% — ға, ал бақылау материалдары мен стандарттардың құны шамамен 6% - ға өседі. Егер талдау жиілігі осы әдіспен күніне 20-ға дейін өсетін болса, ал сапаны бақылауды орындаудың басқа да шарттары сол күйінде қалатын болса, онда калибрлеуге арналған Реактивтердің құны жалпы тікелей құнның 3% - ын құрайды, ал бақылау талдаулары бар жалпы тікелей шығыстардың 9% - ынан аспайды.