Стерильные и асептически
жүктеу/скачать 2,07 Mb. Pdf көрінісі
|
steriles
- Бұл бет үшін навигация:
- 3.4. Методы определения пирогенов в лекарственных средствах
разделения и фракционирования растворов, при котором макромолекулы (с М. м. от 1 тыс. до 1 млн.) отделяются от раствора и низкомолекулярных соединений фильтрацией через мембраны. Установлено, что при ультра- фильтрации через ацетилцеллюлозный мембранный фильтр «Владипор» УАМ-100 со средним диаметром пор 100:25 А задерживается более 99% липополисахаридов, обусловливающих пирогенность. С применением ультрафильтрации получены апирогенные растворы глюкозы, аминокис- лот и др. 3.4. Методы определения пирогенов в лекарственных средствах Ввиду значительной сложности предохранения лекарственных средств от микробной контаминации и большой опасности пирогенной ре- акции, фармакопеями многих стран мира, в том числе в нашей стране пре- дусмотрена проверка воды для инъекций, лекарственных форм для инъек- ций и ряда лекарственных веществ на пирогенность. Особенно важно про- верить препараты, получаемые из природного сырья (антибиотики, фер- менты, экстракты из печени, препараты крови, лизаты белков и т. п.). Тре- буют также проверки пирогенности вода и другие жидкости, используемые для промывания флаконов, ампул, приборов для инфузий, изделий из стек- ла, пластмассы и резины, в которых содержатся или с которыми соприка- саются препараты для вливания; шприцы одноразового использования; пластмассы и резины, применяемые при изготовлении растворов для инъ- екций. Согласно ГФ X испытание пирогенности проводят на здоровых кроликах обоего пола массой 2 – 3,5 кг, содержащихся в строго регламен- тированных условиях и имеющих исходную ректальную температуру от 38,5°С до 39,5°С. Испытание каждого раствора проводят на 3 кроликах, измеряя ректальную температуру 3 раза с промежутками 1 ч. Воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают непирогенным, если сумма повышений температуры у трех кроликов меньше или равна 1,4°С. Если эта сумма превышает 2,2°С, то воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают пирогенным. Данный метод имеет ряд существенных недостатков: необходимость содержать большое количество подопытных животных в строго регламен- тированных условиях, значительные колебания чувствительности кроли- ков к пирогенам, отсутствие количественной характеристики пирогенной реакции, высокая стоимость анализа. По многим причинам он практически неосуществим в условиях даже самых крупных аптек, где в настоящее 22 время готовится подавляющее количество инфузионных растворов, кото- рые вводятся больным без предварительного испытания на пирогенность. Широкое распространение за рубежом получил в последнее десяти- летие метод определения пирогенности с помощью реакции гелирования лизата амебоцитов (РГЛА), называемый также ЛАЛ-тест или Limulus-тест. Метод основан на способности лизированных клеток (амебоцитов) крови Limulus poliphemus реагировать с бактериальными пирогенными эндоток- синами, образуя гель. Лимулус-тест проводят, смешивая в асептических условиях в про- бирке 0,1 мл испытуемого раствора с 0,1 мл ЛАЛ. Смесь инкубируют при 37°С в течение от 15 до 90 мин при рН от 6,0 до 8,0, не подвергая ее встря- хиванию. При наличии пирогенных эндотоксинов грамотрицательных бак- терий образуется гель, который обнаруживается, по увеличению вязкости смеси, потере ею текучести. При повороте пробирки на 180° гель не дол- жен разрушаться. Лимулус-тест уже в 1980 г. включен в XX фармакопею США наряду с тестом на кроликах. Его преимуществом является высокая чувствитель- ность, позволяющая в определенных условиях обнаруживать до 1 мг эндо- токсина. Метод в 5 – 10 раз чувствительнее, чем тест на кроликах. Он лег- ко воспроизводится, надежен и экономичен. Тест широко используется для контроля пирогенности воды, требуя для проведения от 20 до 90 мин, хо- рошо коррелирует с тестом на кроликах. Применение этого метода позво- ляет очень быстро и своевременно, до использования раствора в клинике, получить результаты анализа на их пирогенность. жүктеу/скачать 2,07 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|