6.Лабораторная диагностика
Предусмотренные случаи обязательного исследования мяса:
Во всех случаях вынужденного убоя, не зависимо от причин;
При подозрении на остропротекающие инфекционные забеливания;
При чуме свиней, роже свиней, пастереллезе и болезни Ауески в случае отсутствия патологических изменений в мускулатуре и внутренних органах;
При ящуре, в случае обнаружения в мышцах единичных некротических очагов;
При лейкозе – в случае поражения отдельных лимфатических узлов или органов и нет изменений в скелетной мускулатуре;
6.Некробактериоз – в случае поражения нескольких органов и удовлетворительной упитанности туши;
7.При желудочно - кишечных заболеваниях;
8.При тяжело протекающих заболеваниях органов дыхания;
9.При удалении кишечника из туши позднее 2 часов после убоя;
10.При доставке на рынок мяса в грязной упаковке;
11.При маститах, эндометритах, параметритах коров и овец;
12.При подозрении на обсеменение мяса сальмонеллами.
13.При отравлении или подозрении на отравление;
14.При сомнительной свежести мяса.
Необходимо отобрать пробы для исследования. Посылают кусочки мышц 2 пробы из передней и задней части туши, вместе с фасцией, размером 8х6х6см, лимфатические узлы не менее 2-х – поверхностный шейный, подколенный не вскрывая в жировой ткани, от свиней – подчелюстной и поверхностный шейный дорсальный. Внутренние органы – почку, селезенку целиком, долю печени с портальными (печеночыми) л/у и опорожненным желчным пузырем (т.к. воспалительные процессы в желчном пузыре). Поверхность разреза печени прижигают до образования струпа, трубчатую кость, тушки птиц, кроликов, нутрий целиком. Это материал доставляют для исследования в охлажденном виде или его консервируют 30% стерильным раствором глицерина.
При исследовании соленого мяса берут из разных мест с рассолом.
Пробы берут стерильными инструментами. Опечатывают.
В сопроводительном документе указывают вид мяса, его принадлежность, перечень пересылаемых проб и их количество, причину, краткие патологоанатомические данные, предполагаемый диагноз, дату взятия образцов и подпись лица, направившего на исследование. Тушу хранят в холодильнике изоляторе при температуре не выше +4°С до получения экспертизы.
При лабораторном исследовании необходимо знать методику исследования, характеристику возбудителя.
Должна сказать, что в природе насчитывается 2501 серовар сальмонелл. При институте Пастера в Париже есть Международный центр по сальмонеллам, который подтверждает в год 40-60 новых серотипов сальмонелл. Однако ведущую роль в патологии отводят немногим более 30.
Относят к семейству Enterobacteriaceae. Делают мазки отпечатки, красят по Граму.
Грам(-), величина 1-4 мкм, спор и капсул не образуют, все подвижны за исключением S. pullorum-gallinarum. Хорошо растут на обычных питательных средах.
На МПА – серо - бело- голубоватые, полупрозрачные, округлые колонии, вокруг которых со временем появляются слизистые валы.
На МПБ – интенсивная муть с обильным серо-белым осадком и пленкой на поверхности.
Для типизации пользуются дифференциально-диагностическими средами: Эндо – бесцветные колонии. Висмут – сульфит - черные с металлическим блеском. На среде Левина колонии прозрачные, со слегка фиолетовым оттенком. На среде Плоскирева колонии прозрачные, уплотненные.
Подозрительные на сальмонеллы колонии пересевают в пробирки со средой Олькеницкого. Готовая среда имеет бледно-розовый цвет. Учет биохимических свойств сальмонелл на указанной среде – визуальный, по изменению цвета среды. На среде Олькеницкого появление желтой окраски в скошенной части агара характеризует ферментацию лактозы и сахарозы; в столбике – глюкозы. Газообразование устанавливают по появлению пузырьков, разрывам агара или его отслоению от стенок пробирки. Об образовании сероводорода судят по почернению среды. При росте культуры, гидролизующей мочевину, среда Олькеницкого приобретает красно-малиновый цвет.
Современные, разработанные за последние годы плотные хромогенные питательные среды для диагностики сальмонелл и кишечной палочки (ХАЙ ХРОМ селективный агар, ХАЙ ХРОМ селективный агар с лауринсульфатом).
При их использовании в посевах проб исследуемого пищевого продукта ингибируется сопутствующая микрофлора (Грам+ бактерии и дрожжи), а вот колонии сальмонелл окрашиваются в светло- лиловый с ореолом или светло-розовый цвет, кишечная палочка в сине-зеленый цвет.
Обладают высокой сахаролитической активностью; для установления родовой принадлежности проводят посевы на короткий «цветной ряд» (среды Гисса).
Биохимические свойства: не ферментируют лактозу, сахарозу, индол (-), ферментируют с образованием кислоты и газа глюкозу, манит, выделят сероводород.
Помимо биохимических свойств изучают серологические свойства. Антигенная структура установлена в 1940г Кауфманом и Уайтом. Сальмонеллы имеют 3 основных антигена: О-соматический (термостабильный), Н- жгутиковый (термолабильный) и К – поверхностный (капсульный). Кроме того, у некоторых серотипов сальмонелл описаны и другие антигены: Vi- антиген или антиген «вирулентности» (один из компонетов О – антигена) и М- антиген (слизистый). Основными факторами патогенности сальмонелл являются энтеротоксин и эндотоксин липосахаридной природы.
Культуру сальмонелл предварительно проверяют с групповыми (поливалентными) сальмонеллезными агглютинирующими О-сыворотками в РА на стекле. На основе общего для нескольких видов сальмонелл О -антигена они подразделяются на серологические группы, обозначаемые заглавными буквами латинского алфавита. При положительном результате с групповой сывороткой проводят испытания той же культуры, выросшей на скошенном МПА с отдельными монорецепторными О -сыворотками, входящими в смесь поливалентной сыворотки. Затем эти же культуры испытывают с монорецепторными Н-сыворотками, 1-й и 2-й фазы, обозначенными цифрами и малыми буквами. Более подробно рассмотрим на ЛПЗ.
Ставят биопробу.3 белым мышкам, массой 14-16 г вводят подкожно суспензию агаровых культур в дозе 500 млн микробных тел в объеме 0,1-0,3 мл. Животные гибнут через 3-10 суток. Выделенную культуру считают патогенной в случае гибели одной и более мышей.
Среди ускоренных методов обнаружения сальмонелл в исследуемых продуктах используется :
1.гетерогенный твердофазный гибридизационный ДНК-РНК анализ с хемилюминесцентным детектированием.
2. Люминометрический метод на базе планшетного люминометра, позволяет в течение 1 минуты по интенсивности свечения судить о степени загрязненности поверхности. Чем выше степень свечения, тем большая загрязненность поверхности. Это позволяет на предприятиях определить степень чистоты поверхности производственных линий и предпринять, если необходимо, дополнительную дезинфекцию и мойку оборудования.
3.Имуноферментный анализ (ИФА), как разновидность твердофазного иммуноферментного анализа. В данном случае реакция проводится с реагентами, фиксированными на поверхности, например в лунках планшеток из полистерола, то тест обозначается как твердофазный. Компоненты выявляют добавлением меченых антител или антигенов. При положительном результате изменяется цвет хромогена.
Достарыңызбен бөлісу: |