Микробиологиялыќ зертхана
-кесте. Гемолизинді титрлеу схемасы
жүктеу/скачать 6,39 Mb. Pdf көрінісі
|
сабақ түсіндірген бойынша
| 2-кесте. Гемолизинді титрлеу схемасы
Компоненттер Гемолизин сұйылтымдары 1:1000 1:1500 1:2000 1:3000 1:4000 1:5000 1:6000 1:7000 Гемолизин, мл 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Физиологиялық ерітінді (антиген мен қан сарысуы орнына), мл 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1:20 сұйылтымындағы комплемент, мл 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 2%-ды қой эритроциті, мл 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Су моншасында ұстау (+37ºС, 10 минут) Титрлеу нәтижесін анықтау - - - - ++ +++ ++++ ++++ Гемолизинді титрлеу кезінде келесі бақылаулар қойылуы қажет: эритроциттер бақылауы – спонтанды гемолиздің болмауы үшін (0,5 мл 2%-ды қой эритроциті + 2 мл физиологиялық ерітінді); гемолизин бақылауы – эритройиттердің комплементсіз гемолизге ұшырауы үшін (0,5 мл 1:1000 қатынасындағы гемолизин + 0,5 мл 2%-ды қой эритроциті + 1,5 мл физиологиялық ерітінді); комплементтің бақылауы – гемолизиннің қатысуынсыз эритроциттердің гемолизге ұшырауының болмауы үшін (0,5 мл 1:20 қатынасындағы комплемент + 0,5 мл 2%-ды қой эритроциті + 1,5 мл физиологиялық ерітінді); гемолитті жүйенің бақылауы (0,5 мл 1:1000 гемолизин + 0,5 мл 2%-ды қой эритроциті + 0,5 мл 1:20 комплемент + 1,5 мл физиологиялық ерітінді). Титрлеудің нәтижесінде эритроциттерді (комплементтің қатысуымен) гемолизге ұшырата алатын гемолизиннің ең минимальды мөлшердегі титрін анықтап алғаннан кейін, негізгі зерттеу жұмыстарына оның төрт еселенген концентрациясын қолданады. Мысалы, гемолизиннің ақырғы титрі 1:3000 болса, зерттеу жұмысына 1:750 қатынасындағы титрді пайдаланады. 1:1 қатынасында глицеринмен консервіленген гемолизинді 2:750 сұйылтымында алады, яғни 0,2 гемолизин және 74,8 мл физиологиялық ерітіндіні құрайды. жүктеу/скачать 6,39 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|