Микроорганизмдер-жұқпалы аурулардың қоздырғыштары
Нормофлора препараттарының жеке технологиясы
жүктеу/скачать 33,28 Kb.
|
12биотех нормафлор
| Нормофлора препараттарының жеке технологиясы
Лактобактерин. Лактобактерин өндіру үшін Lactobacillus plantarum лактобактериясының штаммы қолданылады, ол Lactobacillococcus тұқымдасына жатады. Лактобактериялар-ұзындығы 0,7-3,0 мкм грам-оң таяқшалар. Атмосферада СО2, N2, О2 өседі. Құрғақ Лактобактерин (Lactobaeterium stccuum) бактериялық препараттар үшін жалпы схема бойынша алынады. 1. Қоректік ортаны дайындау және зарарсыздандыру 1.1. Гидролизденген сүтті дайындау (РН 7,7±0,1 қайнатылған майсыз сүтке панкреатин мен хлороформ қосылады, 40±2 °с 72 сағат ұсталады; содан кейін сүзіледі, инъекцияға арналған сумен екі рет сұйылтылады, шөлмектерге құйылады және стерильденеді). 1.2. Ашытқы аутолизатын дайындау (нан пісіретін ашытқыны инъекцияға арналған сумен шөлмекте сұйылтады және стерильдейді). 1.3. MRI ортасын дайындау (гидролизденген cho shku-ға ашытқы аутолизаты және келесі заттардың ілмектері қосылады: марганец және магний сульфаты, аммоний лимон қышқылы, глюкоза және т.б.). 1.4. Казеин гидролизатын дайындау (реакторда казеин ерітіндісі дайындалады, рН қажетті мәні орнатылады, хлороформ қосылады, 45 °С температурада бес күн ұсталады, содан кейін бөтелкелерге сүзіледі). 1.5. Казеин-ашытқы ортасын дайындау. 1.6. Кептірудің қорғаныш ортасын дайындау (желатин, сахароза, сүт, лимон қышқылды натрий және су). 2. Жатыр мәдениетін алу Пробиркалардағы, Петри ыдыстарындағы, флакондар мен бөтелкелердегі 6 жолаушы - 9 тәулік ішінде 370 ° С кезінде 8-12 сағат бойы сұйық қоректік ортасы бар реакторларда; өндірістік штаммның 1 мл микробтық суспензиясында кемінде 6 млрд тірі микробтық жасушалар болуы тиіс; алынған микробтық суспензияға кептірудің қорғаныш ортасы – сахароза-желатозды немесе қайтымды) қосылады. 4. Лактобактеринді ампулаларға құю(доза тірі микробтық жасушалардың концентрациясына байланысты). 5. Лиофильді (сублимациялық) кептіру: 5.1. Тоңазыту камерасында минус 40 °С дейін 18-24 сағат бойы 75° бұрышпен көлбеу орналасқан лактобактерині бар ампулаларды мұздату; 5.2. Лиофилизация (сублимация) – терең вакуум жағдайында кептіру, сублимация ұзақтығы 68-70 сағ. 6. Ампулаларды дәнекерлеу Газды қорғау режимінде – азот атмосферасында 7. Сапаны бақылау: 7.1. Сипаттама: сарғыш-ақ түсті кристалды немесе кеуекті масса, қышқыл сүт иісі мен дәмі. Органолептикалық анықталады. 7.2. Шынайылық лактобациллидің өндірістік штамдарында тән морфологиялық, культуралық және биохимиялық қасиеттердің болуымен анықталады. 7.3. Ерітілген препараттың рН көрсеткіші 5,5 (±) 0,5 құрауы тиіс. 7.4. Ампуладағы немесе құтыдағы лактобактериннің қалдық ылғалдылығы 3,5% - дан, таблеткадағы 5% - дан аспауы тиіс. 7.5. Ерігіштігі. Құрғақ препарат тазартылған және 1 дозаға 1 мл есебінен қосылған суда еруі, 5 минут ішінде сарғыш-сарғыш түсті біртекті жүзінді түзуі тиіс. Көзбен анықтайды. 7.6 бактериялық контаминация бактериоскопиялық және бактериологиялық тексеріледі. Бактериоскопиялық жолмен-ерітілген препараттың суспензиясынан дайындалған және граммен боялған жағындыларды қарау арқылы. Жағындыларда лактобациллаларға тән (грам-оң) жасушалар болуы тиіс. Бактериологиялық-қоректік ортаға себу және инкубация арқылы 2 күн ішінде колониялар болмауы керек. Егер кем дегенде бір пробиркада немесе шыныаяқта өсу анықталса, үлгілердің екі еселенген мөлшерін қайта егу жүргізіледі. Қайта өсу жағдайында препараттың сериясы қабылданбайды. Құрғақ Препарат бөгде микрофлорамен контаминацияланбауы тиіс. Таблеткалардағы препараттың құрамында патогенді және шартты-патогенді микроорганизмдер болмауы тиіс; сапрофит микробтарының 1 таблеткаға 300-ден аспайтын мөлшерде болуына жол беріледі. 7.7. Ерекше зиянсыздық. Препарат бір доза мөлшерінде ішке енгізгенде ақ тышқандарға зиянсыз болуы тиіс. Тышқандарды бақылау 5 тәулік ішінде жүзеге асырылады. Осы кезеңде кем дегенде бір тінтуір қайтыс болған жағдайда, бақылау жануарлардың екі еселенген мөлшерінде қайталанады. Егер тышқандар өлмесе, препарат сынақтан өтті деп саналады; әйтпесе, препараттың бұл сериясы қабылданбайды. 7.8. Ерекше белсенділік. Препараттың 1 дозасындағы лактобациллдің өміршең жасушаларының саны және қышқыл түзілу белсенділігі бойынша. 1 дозада тірі лактобациллалардың мөлшерін анықтау. Препараттың бір дозасындағы тірі лакгобациллалардың санын анықтау үшін әрбір ерийден кемінде 3 үлгі сыналады. Сұйылтқаннан кейін құтының ішіндегісін Петридің 4 кесесіне 0,1 мл микробтық суспензиядан себеді. 37 ° C температурада 44 сағаттық инкубациядан кейін өсіп келе жатқан колониялар есептеледі және препараттың 1 дозасындағы тірі бактериялардың мөлшері есептеледі. Қышқыл түзілу белсенділігін анықтау модификацияланған бауыр ортасында бифидобактерияларды өсіру кезінде титриметриялық әдіспен жүргізіледі. Әрбір сынама аздап қызғылт бояу пайда болғанға дейін фенолфталеин индикаторының қатысуымен 0,1 моль/л натрий гидроксиді ерітіндісімен титрленеді. Препараттың бір дозасында (1 таблетка) шығару кезінде кемінде 2*109 тірі лактобацилл болуы тиіс. Тернер (ТҚ) градустарында көрсетілген лактобактериннің қышқыл түзілу белсенділігінің көрсеткіші 200-ден кем болмауы тиіс. 7.9. Кептірудің тұрақтандырушы ортасының компоненттерін және препараттың құрамына кіретін басқа заттарды анықтау. 8. Таңбалау және буып-түю. Лактобактерин таблеткаларын өндіру кезінде микробтық суспензия кассеталарда кептіріледі. Құрғақ микробтық массаны (СММ) металл елек арқылы азот құйылған шөлмектерге сүртеді. Таблетка массасын СММ-ге қосымша заттар (лактоза, азросил, кальций стеараты) қосылған шар диірменінде дайындайды. Таблетка массасында тірі лактобактериялардың саны анықталады және таблетка массасы есептеледі. Таблеткалау ауаның ылғалдылығын қатаң сақтай отырып, асептикалық жағдайларда тікелей престеу әдісімен жүргізіледі (50% ври 18 °С артық емес). Таблетка береді өлшеп-орауға береді құтыларда. Препарат вакуумда, азот атмосферасында немесе стерильді ауада болуы керек. Бактериялық препараттарды асқазанның агрессивті қышқыл ортасынан қорғау үшін ацидорезистентті жабыны бар таблеткалар, капельденген формалар, сорбентке иммобилизацияланған бактериялар жасалады. Пробиотиктердің микрокапсулаланған түрлерін жасауға талпыныс жасалды. Ампулалар мен таблеткаларда лактобактерин өндіру процесінің ұзақтығы тиісінше 42 және 66 тәулікті құрайды. Препаратты құрғақ, қараңғы жерде Т = 5±3 °С кезінде сақтайды. Жарамдылық мерзімі 12 және 6 ай. Жарамдылық мерзімі 12 айға тең, егер шығарылған кезде бір дозада 4 миллиард немесе одан да көп тірі лактобацилл болса; 6 – 2-ден 3,9 миллиардқа дейін болса, жарамдылық мерзімінің соңында 1 миллиард тірі лактобацилл болуы керек. жүктеу/скачать 33,28 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|